双胸蚓纤溶酶的纯化及性质

 用硫酸铵分段盐析、超滤膜分级分离及DEAE-纤维素、Sephadex A-25和Sephadex G-50三种柱层析方法从双胸蚓组织的粗提取液中分离纯化出一种纤溶酶,分子量为29kD,由一条肽链组成。此晦具有强烈的溶解纤维蛋白的作用,对家兎实验性血凝块也具有明显的溶解作用。此酶的最适pH为8.0,在pH7.6～8.4之间活力相差不到2％;酶在PH4.7—11.0范围内稳定;酶作用的最适温度为57℃;此酶热稳定性较好,于25～50℃保温3小时,酶活力基本不变,60℃时,活力保留65％。金属离子Na~(+)、K~(+)、Mg~(2+)等可提高此酶的活力,而Hg~(2+)、Ca~(2+)等金属离子对此酶有不同程度的抑制作用。     

小鼠肝脏免疫抑制蛋白质(LISP)的分离纯化和鉴定

用硫酸铵分段盐析及DEAE-Sephadex A-50、羟磷灰石和CM纤维素等多种柱层析方法,从正常小鼠肝浸液中分离纯化出一种免疫抑制蛋白质(LISP)。在体外用微量该蛋白质就能强烈抑制小鼠T、B淋巴细胞对促有丝分裂原和同种异型抗原的增生反应。纯化的蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PACE)和等电聚焦(IEF)鉴定时均显示为一条区带,其等电点(pI)值在7.5—7.8范围。沉降系数利S_(20),w为5.39。Sephadex G-100凝胶层析测得LISP的分子量为78,000道尔顿。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)提示LISP是由二个相同的亚基组成,亚基分子量为38,500道尔顿。LISP是一种既非糖蛋白又非脂蛋白的碱性蛋白质,对它的氨基酸组成也作了分析。     

水浴法提取叶绿体中色素的探讨

"叶绿体中色素的提取和分离"是中学生物学教学中的一个经典实验,人教版高中<生物>多种版本教材中均将其列为必做实验.该实验分为2步:1)是提取绿叶中的色素;2)是采用纸层析法分离绿叶中的色素.只有制备高质量的色素提取液,纸层析分离的效果才明显.     

聚酰胺薄膜分离细胞膜上常见的几种单糖

本文报道了用聚酰胺薄膜在醋酸乙酯-醋酸-乙醇体系中分离细胞膜上常见的几种单糖,具有快速、方便、经济的特点。     

枯草杆菌碱性蛋白酶E的纯化和性质

目前国内外研究较多的是地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)碱性蛋白酶Carlsberg和解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)碱性蛋白酶BPN’的纯化。鉴于蛋白酶E和蛋白酶BPN’在结构上有15％的非同源性,故我们用修饰纯化蛋白酶BPN’的方法来纯化蛋白酶E(subtilisin E)。     

用胶原纤维分离含不同糖基数的黄酮苷类化合物北大核心CSCD

以戊二醛交联的胶原纤维做固定相,通过柱层析法研究其对含不同糖基数的黄酮苷类化合物（槲皮苷、芦丁、刺槐素）的分离特性。结果表明,在高浓度乙醇溶液中,胶原纤维对黄酮苷类化合物的吸附以氢键作用为主;在低浓度乙醇溶液中,吸附以疏水键作用为主。采用90%~70%~50%的乙醇水溶液进行分步洗脱,槲皮苷、芦丁和刺槐素能够得到分离,它们的纯度分别为99.39%、95.32%和94.23%,回收率分别为89.25%、80.36%和80.49%。戊二醛交联的胶原纤维分离材料具有良好的重复使用性能,在5次重复分离实验中,其分离性能无明显降低。     

山溪鲵皮肤分泌物抗菌活性的初步研究

山溪鲵皮肤分泌物和经两次SephadexG-25层析分离得到的初步提纯样品经抗菌实验,发现具有抗菌活性。其中的抗菌活性成分为蛋白质性质,分子量约为20kD,具有在高温下短时间、常温下长时间保持稳定的特性。初步提纯样品经尿素SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为两条带;经反相高效液相层析(RP-HPLC)检测为13个峰。此提纯方法的活性回收率为46．7％。这为进一步的纯化和性质鉴定工作奠定了基础。