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摘要:【目的】建立多粘类芽胞杆菌SC2 的基因敲除体系。【方法】利用电转化把温敏型自杀质粒pRN5101导入到多粘类芽胞杆菌SC2中。采用基因重组技术敲除SC2 中的多粘菌素基因E(pmxE),得到突变株SC2-E。利用抗细菌性能检测和高效液相色谱分析合成多粘菌素的能力,来证实pmxE基因是否被敲除。【结果】成功构建了多粘类芽胞杆菌SC2 的基因敲除体系。pRN5101转入SC2后能够在28℃复制,39℃自杀。突变株失去了合成多粘菌素的能力,成功敲除pmxE基因,验证了此体系的可用性。【结论】首次构建了多粘类芽胞杆菌的基因敲除体系,拓展了pRN5101的使用范围,为研究多粘类芽胞杆菌的基因功能提供了高效的遗传操作工具。 相似文献
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多粘菌素BSub—MICs导致大肠杆菌自溶的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过建立多粘菌素BSub-MICs诱导大肠杆菌形成溶菌环的实验模型,自溶环上细菌进行了动态观察,以光学显微镜检查,可见随着时间延长,细菌淡染程度加重;以活菌计数法观察到活菌数量的下降;用透射电镜观察到细菌胸壁不完整或全部破损,内容物流失,确证了多粘 素BSub-MICs诱导大肠杆菌形成的溶菌环上细菌发生了自溶。 相似文献
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天然免疫系统在机体抵抗微生物的过程中起到重要作用,抗微生物多肽和蛋白(antimicrobial peptides and proteins,AP)是这一系统中的重要防御物质。AP具有多种活性,可抵御革兰阴性和阳性细菌、真菌和一些包膜病毒的致病作用。革兰阴性菌能发生一系列变化来抵抗AP的活性。如大肠埃希菌等可拥有1种外膜蛋白OmpT,能分解蛋白质以清除AP;又如淋病奈瑟菌和小肠结肠炎耶尔森菌可依赖能量将AP泵出细胞外。 相似文献
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魏家绵 《植物生理与分子生物学学报》1990,(4)
多粘菌素B抑制类囊体膜上的Mg~(2+)-ATP酶活力,且其部分抑制作用受控于高能态。如将酶反应速度和[Mg~(2+)ATP]的浓度作双倒数图,则可观察到多粘菌素B和[Mg~(2+)ATP]浓度之间存在着类似竞争的关系。再经用多粘菌素B抑制游离的β亚单位的活力。证明多粘菌素B在偶联因子上的作用部位是在β亚单位上。 相似文献
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替加环素与多粘菌素B对泛耐药鲍曼不动杆菌体外研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的为治愈耐舒普深的泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-Ab)提供新药。方法替加环素采用二倍琼脂稀释法,多粘菌素B用E-test条法测分离目标菌株100株的最低抑菌浓度(M IC),并用WHONET 5.4软件分析数据。结果多粘菌素B对耐舒普深的泛耐药鲍曼不动杆菌株的M IC值分布情况为:1.5 mg/L为2株,1.0 mg/L为9株,0.75 mg/L为9株,0.5 mg/L为38株,0.38 mg/L为34株,0.25 mg/L为8株,均为敏感;替加环素对耐舒普深的泛耐药鲍曼不动杆菌株的M IC值分布情况为:≥32 mg/L为0株、16 mg/L为2株、8 mg/L为3株、4 mg/L为4株、2 mg/L为6株、1 mg/L为9株、0.5 mg/L为30株、0.25 mg/L为33株、0.125 mg/L为9株、0.06 mg/L为2株、0.03 mg/L为2株,敏感率为95.0%,中敏率为3.0%,耐药率为2.0%。结论替加环素或多粘菌素B是目前对耐舒普深的泛耐药鲍曼不动杆菌最有效药物之一。 相似文献
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【背景】小肠结肠炎耶尔森菌(Yersinia enterocolitica)是重要的人畜共患食源性病原菌。由于其生存环境与传染性生活方式,小肠结肠炎耶尔森菌暴露在各种生存压力中,而胞膜压力应答能力对维持其环境耐受性和毒力发挥着重要作用。【目的】探究小肠结肠炎耶尔森菌在胞膜压力应答中的调节机制。【方法】通过使用多粘菌素B破坏小肠结肠炎耶尔森菌细胞膜的稳定性,并从生长能力、运动能力、生物被膜形成能力以及相关基因表达的变化探讨Rcs (Regulator of Capsule Synthesis)系统对多粘菌素B产生的胞膜压力的应答。【结果】多粘菌素B引起的细胞胞膜压力抑制了小肠结肠炎耶尔森菌的运动和生物被膜形成能力;而阻断Rcs信号途径后,小肠结肠炎耶尔森菌的运动和生物被膜形成能力有所恢复。对flhC、hmsS、hmsT等关键下游表型基因的表达水平的分析结果表明Rcs双组分系统对由多粘菌素B诱导的胞膜压力作出响应,通过感知胞膜胁迫向胞内传递信号,积极地调控细菌增强对抗菌肽的抗性。【结论】明确了Rcs双组分系统在响应多粘菌素B压力胁迫中的特异性调控作用,加深了对小肠结肠炎耶尔森菌环境应答机制... 相似文献
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多粘菌素B在低浓度的磷酸盐存在下,抑制光合磷酸化和电子传递,但在较高浓度的磷酸盐存在下,却能促进光合磷酸化和提高P/O值。多粘菌素B在促进光合磷酸化时与无机磷酸之间存在着类似竞争的关系,并显示出能增加叶绿体的毫秒延迟发光和用中性红表示的类囊体膜内外的pH变化,多粘菌素B亦能促进光下的ATP_P_j交换。根据上述实验结果;我们推测多粘菌素B在类囊体膜上可能有两个作用部位,一个在类囊体膜上,另一个在偶联因子(CF_1)的β亚单位上。 相似文献