蓝色犁头霉原生质体的制备与再生

研究了氢化可的松生产菌蓝色犁头霉原生质体的形成与再生。通过对溶解酶系统的选择,影响原生质体形成的因素如渗透压稳定剂、酶浓度、菌龄、菌丝培养基和培养方式等因素进行考察,发现以0．4mol/L NH4Cl做为稳定剂、2．5mg/mL溶壁酶和5mg/mL纤维素酶组成的混合酶液溶解菌丝,4h后原生质体量可达10^6cell/mL。通过显微镜观察原生质体的形成过程以及在高渗培养基上的再生情况,再生率为15．6％。     

Biogen公司克隆了抗炎因子

<正> 一种最终能代替可的松应用于关节炎及气喘病的抗炎剂——脂肪(肾上腺)皮质激素,已经由Biogen公司通过基因工程生产出来。脂肪皮质激素是一种能抑制引起炎症的前列腺素和Leukotrienes的产生所必需的磷酯酶活性人体蛋白质,预期到1986年开始进行这种抗     

超级马拉松运动中唾液α-淀粉酶活性和尿液糖皮质激素浓度的时程变化*

目的: 观察超级马拉松过程中唾液α-淀粉酶活性和尿液糖皮质激素浓度的时程变化。方法: 选取长期规律参加有氧训练的20名男性健康青年,年龄为(22.57±1.63)岁,身高(175.28±4.58)cm,体重(66.95±5.36)kg,完成一次36 h的超级马拉松(12 h～24 h休息),记录运动中R-R间期,分别在在0 h(运动开始前)、12 h(首日结束后)、24 h(次日开始前)、36 h(运动结束后)采集测试对象的唾液和尿液,采用碘-淀粉法检测唾液α-淀粉酶活性,采用液相色谱法检测尿液糖皮质激素浓度。结果: 与安静状态(0 h)相比,运动中的心率、运动后的过氧消耗和运动冲量值均显著增加(P＜0.05),其中,0-12 h的运动后的过氧消耗和运动冲量值显著高于24~36 h(P＜0.05)。与安静状态相比,12 h时唾液α-淀粉酶活性显著增加(P＜0.05),24 h时显著下降(P＜ 0.05);与24 h相比,36 h时显著增加(P＜0.05)。与安静状态相比,12 h、24 h和36 h时尿液中的皮质醇的浓度显著升高(P＜ 0.05),24 h时显著低于12 h和36 h(P＜0.05);可的松的浓度在运动过程中持续升高,且显著高于安静状态(P＜0.05)。结论: 人体唾液α-淀粉酶活性和尿液皮质醇浓度于运动后升高,休息后下降;尿液可的松浓度在运动过程中持续升高。     

简单节杆菌转化氢化可的松的△-脱氢反应动力学I．简单节杆菌BY-2-13自由细胞转化氢化可的松的△-脱氢反应动力学

本文研究了简单节杆菌(Arthrobacter simplex) By-2-13转化氢化可的松为氢化泼尼松韵△一脱氢反应动力学。其中包括溶解底物的底物浓度对反应速度的影响,反应初速度与底物浓度的关系;固体悬浮液中底物总浓度对反应速度的影响,反应初速度与底物浓度的关系;酶量对反应的影响以及产物的抑制作用等。溶解底物和固体悬浮液底物的反应初速度与底物浓度的关系都符合简单米氏方程,米氏常数Km分别为0．33mg／mJ和29．41n,g／ml,而两者的反应过程曲线均与简单米氏方程不符。无论在较低或较高浓度的固体悬浮液底物转化过程中,产物对A’。脱氢反应都呈现抑制作用。由此建立了该反应的反应动力学模型及相应的动力学方程,井经线性化后回归得出反应的动力学参数。当反应时间小于‘(达到约85％的转化率所需要的时间)时,用此动力学方程拟合所得的数据与实验测定值相符。     

用新月弯孢霉11β——羟基化16α——甲基化合物Rs—21醋酸酯

The conversion of 16 alpha-methyl-Reichstein's compound S 21-acetate (I) to 16 alpha-methyl-hydrocortisone (II) by the mycelium Curvularia lunata AS3.4381 was studied. Maximal 11 beta-hydroxylating activity of the mycelium was found during cultivation of the microorganism by 24h. Inhibition of the ethanol to the 11 beta-hydroxylating activity was obvious. The yield of 55.4% (II) (W/W) could be achieved during conversion of 0.15% substrate at 72 h.     

氢化可的松高产菌株新月弯孢霉的选育*

应用酮康唑抗性筛选法,将经过紫外线诱变处理的甾体11β-羟基化菌株——新月弯孢霉的原生质体倾注在含有酮康唑最小抑制浓度(10μmol/L)的再生培养基平板上,再生出136株酮康唑抗性突变株。其中氢化可的松转化率高于出发菌株的有14株,正向突变率达到10．3％,同时获得了氢化可的松转化率为出发菌株1．42倍的遗传稳定突变株KA-91。     

当归与激素合用对哮喘小鼠的治疗作用及其机制

目的：探讨当归与激素合用对哮喘小鼠的治疗作用及其机制。方法：取BALB/c小鼠随机分为对照组、血瘀模型组、哮喘模型组、氢化可的松组、当归组、氢化可的松与当归合用组（n=12）。采用卵白蛋白致敏、激发,复制哮喘模型;使用氢化可的松复制血瘀模型。观测当归、氢化可的松及其合用对小鼠血液流变学（全血黏度与血清TXB2含量）和哮喘（哮喘行为学、肺功能、肺指数与肺组织含水量）的影响,采用ELISA法、免疫组化法测定相关细胞因子和HMGB1/TLR4/NF-κB蛋白质的表达水平。结果：8 g/kg当归、0.05 g/kg氢化可的松及其合用可明显缓解哮喘行为学指标,提高肺功能,降低肺指数及肺组织含水量,降低BALF中TNF-α、IL-1β及IL-6水平,抑制肺组织HMGB1、TLR4及NF-κB蛋白质的高表达;当归与氢化可的松合用对提高哮喘小鼠肺功能、降低相关细胞因子（TNF-α、IL-1β及IL-6）水平明显优于单独使用当归组,抑制肺组织中TLR4和NF-κB蛋白质表达的作用优于单独使用当归或氢化可的松。二者合用后可缓解氢化可的松所致的小鼠血清TXB2含量升高、血液粘稠度增加。结论：当归与激素及其合用具有明显的平喘作用,抑制HMGB1/TLR4/NF-κB蛋白质合成是其平喘的机制之一。当归与激素合用改善肺功能的作用更强,可能与加强抑制TLR4/NF-κB合成有关。合用当归可缓解激素在治疗哮喘时引起的血液流变学异常变化。     

改进底物添加体系制备氢化可的松

在蓝色梨头霉和新月弯孢霉协同转化制备氢化可的松(HC)过程中,常规的底物热溶液体系由17α羟基孕甾4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯(RSA)和乙醇组成,其中m(RSA)∶V(乙醇)=1∶25;改进后的底物溶液体系由Tween-80、丙三醇、RSA和磷酸盐缓冲溶液(PBS)组成,其中V(Tween-80)∶V(丙三醇)∶m(RSA)∶V(PBS)=1∶3∶1∶25。RSA质量浓度从2g/L起,累加到5g/L,RSA全部被转化,且产物氢化可的松(HC)产率与常规低浓度投料相当;在RSA质量浓度3g/L时添加底物,协同菌丝体能重复利用达3次,HC产率稳定在70%左右;经3批次实验室摇瓶放大制备实验,产物HC平均收率为52%,重现性较好,工艺操作稳定。Tween-80/丙三醇/RSA/PBS底物体系较常规RSA/乙醇构成的底物添加体系,可显著提高HC生产收率,有工业应用价值。     

四君子汤对免疫抑制小鼠肝脏细菌易位的影响

目的观察四君子汤对免疫抑制小鼠免疫功能及肝脏细菌易位的影响,探讨神经-内分泌-代谢-微生态-免疫网络之间的关系。方法应用氢化可的松制备小鼠免疫功能抑制模型,造成肝脏细菌易位;观察四君子汤对小鼠吞噬细胞功能的影响和细菌易位的控制,同时设自然恢复组和正常对照组进行比较。结果氢化可的松灌喂3d后,小鼠吞噬细胞的吞噬功能明显下降,肝脏出现大量细菌易位;经四君子汤治疗6h后,小鼠吞噬细胞吞噬功能显著提高。肝脏细菌易位明显减少。结论四君子汤能有效地控制免疫抑制小鼠肝脏细菌易位。     

静息细胞连续两批次生物催化生产氢化可的松

以新月弯孢霉（Curvularia lunata）的Ⅱ级培养18h的活菌丝作为C11β位羟基化生物催化剂,在选定的含有微粒结晶甾体底物（0．2％,质量分数）17α,21-二羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮的磷酸缓冲液（0．05mol／L,pH6．0）介质体系中,在经过连续两批次约55h的转化反应,底物转化率可维持在较高水平,产物氢化可的松净收率可达60％;从菌丝回收的底物RS可再利用。此工艺提高了生物催化剂的利用率,具有工业应用价值。