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1.
N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或 N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNGase基因功能缺陷会导致先天性去糖基化障碍,小鼠PNGase缺陷会导致胚胎致死性,线虫PNGase缺陷使其寿命下降。本文对PNGase在不同物种的分布、蛋白质结构、酶学功能及生物学功能进行阐述,为PNGase的生理病理功能及致病机制的基础研究提供思路,为PNGase作为糖生物学工具酶或药物开发的创新应用研究奠定基础。 相似文献
2.
宋兰坤 《中国生物工程杂志》2005,25(9):104
Fractogel EMD是合成的聚甲基丙烯酸酯树脂,十几个官能团排布在线形聚合物长链上,称为“触角”,所有的“触角”都是通过共价键结合到聚合物骨架上,生物分子更加容易和“触角型”介质的官能团结合,并且可以大大降低生物分子和介质基质的非特异性相互作用,提高生物分子的回收率。 相似文献
3.
4.
海枣曲霉β—D—岩藻糖苷酶的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
Although beta-D-fucosidase (beta-D-fucoside fucohydrolase, EC 3.2.1.38) has been isolated from various sources, the identity of this enzyme is still not settled. We have purified a specific beta-D-fucosidase in electrophoretically homogeneous form crude extracts of Aspergillus phoenicis by polyethyleneglycol 6000-phosphate buffer aqueous two-phase separation, and successive chromatography on DEAE-Sephadex A-50, hydroxyapatite and Sephadex G-100 columns. The molecular weight of the enzyme was estimated to be 57000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and 50000 to 60000 by gel filtration on Sephadex G-100. The enzyme showed optimum coside were 2.4mmol/L, and 1.28 mumol min-1 the pH range 5.5-6.5 and below 35 degrees C. The Km and the Vmax values for pNP-beta-D-fucoside were 2.4mmol/L, and 1.28 mumol.min-1.mg-1 respectively. The enzyme was strongly inhibited by sulfhydryl group reagents, PCMB-NEM and iodoacetate. It was also inhibited by EDC, DEP and NBS. Thus, -SH, -COOH groups, histidyl and tryptophyl residues were essential for enzyme activity. The purified beta-D-fucosidase showed high specificity toward p-nitrophenyl beta-D-fucoside. The enzyme was inhibited by D-fucose and D-fucono-gamma-lactone, but not by D-galactose, D-galactono-gamma-lactone, D-glucose or D-glucono-gamma-lactone; the latter compounds are specific inhibitors of beta-D-galactosidase and beta-D-glucosidase respectively. Thus, this enzyme is the most strictly specific beta-D-fucosidase when compared with those previously reported. 相似文献
5.
细胞培养生产人参寡糖素降低成本的途径 总被引:1,自引:0,他引:1
在人参(Panaxginseng)细胞悬浮培养中,以无离子水代替重蒸馏水,细胞生长速率和寡糖素产率分别降低2.3%和2.9%。用白糖代替蔗糖,细胞生长速率和寡糖素产生率分别降低1.74%和1.23%。综合上述两方面结果,以无离子水和白糖分别替代原培养基中的重蒸馏水和蔗糖组成替代培养基,用替代培养基培养人参培养细胞,其生长速率可达0.509gDW/L.d.寡糖素产率可达1.443g/L,和原培养基相 相似文献
6.
目的 对重组人源化抗CD52单克隆抗体N-糖糖型的分析方法亲水相互作用液相色谱法进行方法学验证,并根据多批次产品的检测结果制定质量标准。方法 参考《中华人民共和国药典》2020版(三部)通则9101中相关要求及重组人源化抗CD52单克隆抗体的制造与检定规程,对单克隆抗体N-糖糖型的分析方法进行方法学验证,验证项目包括专属性、线性、准确度、精密度、范围和耐用性。对多批次重组人源化抗CD52单克隆抗体产品(≥15批)的N-糖糖型的检测结果进行分析,计算非岩藻糖及半乳糖的相对含量,确定质量标准。结果 空白对照、阴性对照对重组人源化抗CD52单克隆抗体N-糖糖型的分析无干扰;在60~300μg的抗体含量范围内线性良好,r2≥0.99;高、中、低3种抗体含量的回收率均在96%~106%;仪器进样重复性、样品制备重复性及中间精密度均良好,峰面积百分比及保留时间的RSD均≤5%;耐用性考察时各条件下的峰面积百分比及保留时间的RSD均≤5%。对多批次重组人源化抗CD52单克隆抗体的检定结果进行统计分析,确定N-糖糖型分析的质量标准为非岩藻糖相对含量4%~20%,半乳糖相对含量≥2... 相似文献
7.
【背景】道路重金属污染问题日益严峻,寻找高效的微生物资源用于环境修复已迫在眉睫。【目的】从乌鲁木齐市道路林带土壤中筛选抗重金属菌株,并对其重金属去除能力进行探究。【方法】使用含5种重金属离子(铅、镉、锌、铜、镍)的4种培养基进行抗性菌株筛选,通过形态学特征和16S rRNA基因序列进行鉴定,采用电感耦合等离子体发射光谱仪(inductively coupled plasma optical emission spectrometer,ICP-OES)检测分离株对重金属离子的去除情况。【结果】4种分离培养基中,TSA是抗重金属菌株筛选的最适培养基,共筛选出16株抗重金属菌,其中4株抗Pb菌、4株抗Cd菌、4株抗Zn菌、3株抗Cu菌和1株抗Ni菌,其抗性分别高达3 000、800、600、300和400mg/L,16株菌中以芽孢杆菌属(Bacillus)数量最多。在初始浓度为700mg/L Pb2+下,菌株Pb6的去除率高达92.48%,菌株Pb11、Pb3和Pb9的去除率分别为27.70%、40.37%和58.88%;在200mg/L Cd2+... 相似文献
9.
用Ciprofloxacin去除传代细胞株中的支原体污染的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在应用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个非常棘手的问题。对Vero和SP2/0-Ag14等细胞,应用Ciprofloxacin,10μg/ml处理14天,支原体检测全部转阴,经4个月的培养、传代、冻存、复苏,每次支原体检测均保持阴性。对去除了支原体的Vero和ISC-116细胞株,测试了其生长特征和功能,均未见受影响。 相似文献
10.
α1,3—岩藻糖基转移酶及其相关产物 总被引:3,自引:0,他引:3
α1,3┐岩藻糖基转移酶及其相关产物陈继华陈惠黎(上海医科大学卫生部糖复合物重点实验室,上海200032)关键词α1,3-岩藻糖基转移酶Lewis(Le)系抗原细胞表面的糖蛋白或糖脂的一部分含有外链岩藻糖(Fucose,Fuc)化的乙酰乳糖胺糖链,常... 相似文献