产青霉素酰化酶的大肠杆菌AS1.76的固定化

用在有机溶剂中成型的琼脂凝胶包埋,结合戊二醛处理的方法,制备产青霉素酰化酶的大肠杆菌AS1.76固定化细胞,其细胞含量可达50%以上。固定化细胞水解青霉素 G 钾盐的最适 pH 为8.0,比原细胞约高0.3pH 单位;最适温度与原细胞一样,均为45℃。固定化后,Hg2+对酶抑制作用降低,但酶对Fe3+、Cu2+等金属离子敏感性增加。在无底物情况下,与原细胞相比,固定化细胞对 pH 和热的稳定性增加;4℃保存14个月无活力损失。固定化细胞装柱,在pH7.7,37℃下连续裂解青霉素 G,转化率达95%以上。155天无明显酶活力损失。     

Inhibition of tumor growth in mice by endostatin derived from abdominal transplanted encapsulated cells

Endostatin,a C-terminal fragment of collagen 18a,inhibits the growth of established tumorsand metastases in vivo by inhibiting angiogenesis.However,the purification procedures required for large-scale production and the attendant cost of these processes,together with the low effectiveness in clinicaltests,suggest that alternative delivery methods might be required for efficient therapeutic use of endostatin.In the present study,we transfected Chinese hamster ovary(CHO)cells with a human endostatin geneexpression vector and encapsulated the CHO cells in alginate-poly-L-lysine microcapsules.The release ofbiologically active endostatin was confirmed using the chicken chorioallantoic membrane assay.The encap-sulated endostatin-expressing CHO cells can inhibit the growth of primary tumors in a subcutaneous B 16tumor model when injected into the abdominal cavity of mouse.These results widen the clinical applicationof the microencapsulated cell endostatin delivery system in cancer treatment.     

氧化葡萄糖酸杆菌SCB329染色体的测定

对氧化葡萄糖酸杆菌(\%Gluconobacter oxydans\%)SCB329的纯培养进行了研究,测定了其生长曲线,确定其对数期为4～27h。获得纯培养的对数期菌体后采用凝胶包埋法制备完整染色体,用脉冲场电泳方法对SCB329的染色体进行了分析,确定其有一条染色体和一个大质粒。染色体的长度在22Mb到35Mb之间。     

一种新颖的棉铃虫单闰包埋核多角体病毒表达系统

将含有低拷贝数的mini-F replicon,一个卡那霉素抗性基因和一个lacZα基因8.6kb的DNA片段经同源重组置换到棉铃虫核型多角体病毒基因组中的多角体蛋白基因内,构建了既能在E.coli内复制又可在昆虫细胞内复制形成完整的病毒粒子棉铃虫核型多角体病毒Bacmid(HaBacmid-HZ8)。另外将HaSNPV的多角体蛋白基因和P10启动子序列取代pFastBacDual质粒上的AcMNPV的多角体启动子序列和P10启动子序列,构建插入HaSNPV多角体蛋白基因和P10启动子序列的HapFastBacPhP10供体质粒。利用HapFast BacPhP10供体质粒将eGFP基因转位至HZ8的Tn7附着位点上。随后将含有eGFP基因的重组HZAml细胞内。转染5d后,细胞核内能形成典型的多角体,在萤光显微镜下观察到细胞内显示出强烈的绿色萤光。结果证明我们构建的HaBac to Bcac表达系统能有效的表达外源基因。     

Lowicryl K4M 低温包埋显示甲状腺球蛋白的免疫电镜法

免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体 ,能显示抗原或抗体在细胞微细结构水平的定位 ,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。目前透射电镜观察的样本制备中 ,为保存良好超微结构的需要一般采用戊二醛、锇酸两种固定液 ;为使超薄切片有一定硬度采用的包埋剂如环氧树脂 6 18、 812需高温聚合 ,这些实验条件均可使多种抗原活性减低或丧失。因此 ,探索既能保持超微结构又能保存抗原性的电镜包埋剂及其应用很有必要。已知ＬｏｗｉｃｒｙｌＫ4Ｍ等低温包埋剂系列可能符合以上要求 ,为此我们进行了有关实验。材料和方法1.材料1 1…     

杆状病毒包埋型病毒粒子研究进展

杆状病毒是一类专一性感染节肢动物的病原微生物,在其生活周期中产生两种不同形态的病毒粒子,即芽生型病毒粒子和包埋型病毒粒子。自然界中,杆状病毒通过经口感染的方式在其宿主的中肠中建立原发性感染,杆状病毒的包埋型病毒粒子在此过程中发挥关键作用。本文回顾了杆状病毒的基本特性,阐述杆状病毒包埋型病毒粒子的蛋白组成及分类,并着重介绍多粒包埋型病毒粒子的进化及在杆状病毒经口感染过程建立中的意义,对进一步了解杆状病毒的进化历程和侵染机制具有重要的指导意义。     

人工种子的研究现况

随着生物技术的不断发展,植物材料的工厂化生产越来越受到人们的重视。这不仅是因为它有巨大的商业价值,更重要的是它将彻底改观传统的农业生产,从而造福于整个人类。这项新技术的发展主要归功于植物组织和细胞培养及生物反应器技术的发展。人工种子概念的产生,就始于五十年代这两项技术的突破。     

杆状病毒基因工程进展

近年来,应用昆虫杆状病毒作载体在昆虫细胞或虫体中高效表达外源基因的技术已得到广泛的推广应用。这一基因工程系统安全、高效、容量大,表达产物具有生物活性,是很有潜力的系统之一,已有数百种动物、植物、微生物,病毒的基因在这一系统中成功表达,并有多篇综述文章和专著详细介绍这一载体表达系统。本文将概述杆状病毒分子生物学及基因工程的基本原理,主要介绍近几年来的研究与进展。     

吸附法固定微生物细胞的研究进展

固定化细胞研究的历史不足三十年,但其应用和研究目前已遍及工业、医药、食品、环境保护、能源开发以及理论等方面,发展非常迅速。固定化方法主要有两大类:吸附法和包埋法。     

薄层包埋法的改进

薄层包埋法是北京大学胡适宜教授的实验室最先将其应用到植物材料的制作中（胡适宜和徐丽云,１９９３）。它主要是针对一些植物样品如花粉、花粉管和细胞原生质体等在超薄切片制作中较难定位而设计的。由于该方法能准确定位,因而大大提高了这些样品的超薄切片效率和质量...