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抗鞘翅目δ-内毒素
及毒素基因文库的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了对鞘翅目昆虫有毒效的5个苏云金芽孢杆菌新菌株YM-03、Sph04-04、YK14-01、SH11-05、Sph16-01伴孢晶体的蛋白质组成,以柳蓝叶甲为供试虫测定了它们的LC_(50)值,其中YM-03毒力最高。测定了YM-03晶体蛋白N-末端部分氨基酸序列。用琼脂糖凝胶电泳快速检测了5株菌的质粒组成,证明其质粒图型各不相同。以广谱的cosmid质粒pLAFRI为载体,通过限制酶EcoRI部分酶解获得“目的”DNA片段,构建了菌株YM-03的总DNA文库,对17个抗性克隆的质粒进行酶切分析表明,其中含有外源片段的克隆占总数的76%,超过要求的理论值。以人工合成的杀鞘翅目基因的18bp保守序列片段为探针,筛选了近1200个抗性克隆,获得了3个阳性克隆,LE392(PBYM2)、LE392(pBYM3)和LE392(pBYM4),毒力测定试验表明LE392(pBYM3)和LE392(pBYM4)有一定表达,表明其携带有δ-内毒素基因。 相似文献
4.
5.
脏器微血管对荧光素钠通透性的实验方法 总被引:4,自引:1,他引:3
大鼠颈动脉注射1%FlNa,荧光显微镜下活体观察肠系膜微血管血流状态及FlNa的渗出情况,并在不同时间点经股动脉采血,测定血浆内FlNa浓度随时间的变化,利用组织匀浆测定不同脏器中FlNa的分布,再辅以冰冻切片进行观察。活体观察发现,FlNa注入体内后,经微血管迅速向周围组织渗出,最后汇集于淋巴管,血浆及组织匀浆FlNa浓度的测定表明,FlNa浓度随时间的变化呈指数衰减,各脏器FlNa的分布极不相同。冰冻切片也显示了同样的分布差别。这些结果表明,我们所建立的方法可直观、定量地反映FlNa在微血管的通透情况。 相似文献
6.
高温胁迫对光系统Ⅱ异质性的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
高温胁迫可诱导光系统Ⅱ(PSⅡ)活性中心转化为无活性中心。本文讨论了在高温胁迫导致荧光猝灭的情况下如何用叶绿素荧光动力学计算PSⅡ无活性中心相对含量的问题。正常的小麦叶片其PSⅡ无活性中心相对含量(Fvi/FV)约为0.155±0.011。小麦叶片经50℃1分钟高温胁迫后,其Fvi(相对于正常Fv)降至对照的70%,在随后室温下60分钟内又降至50%。而55℃5分钟和55℃10分钟高温胁迫后,在恢复期内其PSⅡ无活性中心的含量从常温的1.4倍左右的基础上分别上升至2.4和2.9倍,说明高温胁迫对PSⅡ中心除了起瞬时钝化作用外,还存在一个间接的较为缓慢的持续钝化作用。 相似文献
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Wei Lv Wei Jiang Hongmei Luo Qian Tong Xiaoyu Niu Xiao Liu Yang Miao Jingnan Wang Yiwen Guo Jianan Li Xizhen Zhan Yunqing Hou Yaxin Peng Jian Wang Shuhong Zhao Zaiyan Xu Bo Zuo 《Nucleic acids research》2022,50(18):10733
Long noncoding RNAs (lncRNAs) play important roles in the spatial and temporal regulation of muscle development and regeneration. Nevertheless, the determination of their biological functions and mechanisms underlying muscle regeneration remains challenging. Here, we identified a lncRNA named lncMREF (lncRNA muscle regeneration enhancement factor) as a conserved positive regulator of muscle regeneration among mice, pigs and humans. Functional studies demonstrated that lncMREF, which is mainly expressed in differentiated muscle satellite cells, promotes myogenic differentiation and muscle regeneration. Mechanistically, lncMREF interacts with Smarca5 to promote chromatin accessibility when muscle satellite cells are activated and start to differentiate, thereby facilitating genomic binding of p300/CBP/H3K27ac to upregulate the expression of myogenic regulators, such as MyoD and cell differentiation. Our results unravel a novel temporal-specific epigenetic regulation during muscle regeneration and reveal that lncMREF/Smarca5-mediated epigenetic programming is responsible for muscle cell differentiation, which provides new insights into the regulatory mechanism of muscle regeneration. 相似文献
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10.
Jing Chen Jialin Meng Yi Liu Zichen Bian Qingsong Niu Junyi Chen Jun Zhou Li Zhang Meng Zhang Chaozhao Liang 《Journal of cellular and molecular medicine》2022,26(21):5379
To identify prostate cancer (PCa) patients with a high risk of recurrence is critical before delivering adjuvant treatment. We developed a classifier based on the Enzalutamide treatment resistance‐related genes to assist the currently available staging system in predicting the recurrence‐free survival (RFS) prognosis of PCa patients. We overlapped the DEGs from two datasets to obtain a more convincing Enzalutamide‐resistance‐related‐gene (ERRG) cluster. The five‐ERRG‐based classifier obtained good predictive values in both the training and validation cohorts. The classifier precisely predicted RFS of patients in four cohorts, independent of patient age, pathological tumour stage, Gleason score and PSA levels. The classifier and the clinicopathological factors were combined to construct a nomogram, which had an increased predictive accuracy than that of each variable alone. Besides, we also compared the differences between high‐ and low‐risk subgroups and found their differences were enriched in cancer progression‐related pathways. The five‐ERRG‐based classifier is a practical and reliable predictor, which adds value to the existing staging system for predicting the RFS prognosis of PCa after radical prostatectomy, enabling physicians to make more informed treatment decisions concerning adjuvant therapy. 相似文献