表达barstar基因及bar基因的转基因油菜的研究

从细菌Ｂａｃｉｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ染色体ＤＮＡ中克隆了ｂａｒｎａｓｅ抑制剂ｂａｒｓｔａｒ的基因,构建了带有ＴＡ－２９基因５′调控区（－１３００－＋３）与ｂａｒｓｔａｒ基因编码区、ＣａＭＶ３５Ｓ启动子与除草剂抗性基因ｂａｒ两个表达框架的植物表达质粒ｐＢＢＳ。以“双低”油菜“５－４”的子叶柄为受体,通过农杆菌介导的遗传转化,获得了在含有１０ｍｇ／Ｌ卡那霉素和２０ｍｇ／ＬＰＰＴ的筛选培养基上再生的转基因植株。ＰＣＲ分析结果表明,ｂａｒｓｔａｒ基因已整合到油菜染色体上;Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测表明,ｂａｒｓｔａｒ基因及ｂａｒ基因在转基因植物中得到了正确的调控与表达。以转基因油菜“５－４”为父本授粉给表达ｂａｒｎａｓｅ基因的雄性不育植株,不育株能正常结实。     

海洋鱼产品品质的影响因素及其标准化

影响海洋鱼产品品质的因素有很多,如鱼体含水量、肉质及传统加工过程中一些原料的用量(如糟制过程中食盐、酒糟等的加入量)、贮藏过程中贮藏条件的改变等,加工和贮藏过程中水分活度、色泽、pH、酸价、过氧化物值、硫化巴比妥酸值、挥发性盐基氮、蛋白质水解程度及微生物等一些指标可以反映海洋鱼产品的品质。本文对影响海洋鱼产品品质的因素及上述指标一些常用的检测方法进行阐述,并简要论述国内外海洋鱼产品的标准化,以期对控制海洋鱼产品品质提供借鉴。     

Homozygosity at a class II MHC locus depresses female reproductive ability in European brown hares

The link between adaptive genetic variation, individual fitness and wildlife population dynamics is fundamental to the study of ecology and evolutionary biology. In this study, a Bayesian modelling approach was employed to examine whether individual variability at two major histocompatibility complex (MHC) class II loci (DQA and DRB) and eight neutral microsatellite loci explained variation in female reproductive success for wild populations of European brown hare (Lepus europaeus). We examined two aspects of reproduction: the ability to reproduce (sterility) and the number of offspring produced (fecundity). Samples were collected from eastern Austria, experiencing a sub‐continental climatic regime, and from Belgium with a more Atlantic‐influenced climate. As expected, reproductive success (both sterility and fecundity) was significantly influenced by age regardless of sampling locality. For Belgium, there was also a significant effect of DQA heterozygosity in determining whether females were able to reproduce (95% highest posterior density interval of the regression parameter [−3.64, −0.52]), but no corresponding effect was found for Austria. In neither region was reproduction significantly associated with heterozygosity at the DRB locus. DQA heterozygotes from both regions also showed a clear tendency, but not significantly so, to produce a larger number of offspring. Predictive simulations showed that, in Belgium, sub‐populations of homozygotes will have higher rates of sterile individuals and lower average offspring numbers than heterozygotes. No similar effect is predicted for Austria. The mechanism for the spatial MHC effect is likely to be connected to mate choice for increased heterozygosity or to the linkage of certain MHC alleles with lethal recessives at other loci.     

cry3A和vhb基因在转基因马铃薯中的表达

分别构建了含cry3A和cry3A+vhb基因的植物表达载体pBCry3A和pBC₃Vhb,并通过根癌农杆菌介导转化了马铃薯. 对转化再生植株进行PCR和DNA印迹分析表明,外源基因已整合到马铃薯基因组中, 且连续三代无性繁殖后转基因仍存在. ELISA分析表明cry3A基因在转基因植株中得到了高效表达, 在单转cry3A植株中最高表达量达0.1%, 转cry3A与vhb双基因株系中为0.065%. 水涝试验显示,转双基因且vhb mRNA的RT-PCR呈阳性的马铃薯植株,对低氧胁迫有较好的耐受性, 表明获得的上述转双基因马铃薯株系可能会具有很好的抗虫和耐涝性能.     

长足大竹象成虫体表信息化学物质的提取和鉴定

为了确定我国南方竹林主要害虫长足大竹象Cyrtotrachelus buqueti Guerin-Meneville雌虫是否存在诱引雄虫的化学信息素以及所释放的相关化学信息素的成分, 本研究利用风洞和“Y”型嗅觉仪测试到长足大竹象雄虫对雌虫及雌虫体表提取化合物具有正趋向行为反应, 随后用GC-EAD和GC-MS对雌虫体表提取化合物进行了分析。在GC-EAD分析时发现雄虫触角对雌虫体表粗提液和体表物质标准品化合物的触角电位反应时有5个GC峰有电生理活性; 通过质谱法确定这5个电生理活性GC峰的化学成分分别为苯酚、己酸乙酯、2-壬酮、壬醛和十五酸甲酯。风洞和GC-EAD分析表明, 这5种成分的标准品化合物对长足大竹象雄虫具有诱引生物活性和触角电生理活性。结果说明长足大竹象雌虫体表粗提液中存在的苯酚、己酸乙酯、2-壬酮、壬醛和十五酸甲酯是长足大竹象成虫的化学信息素物质。     

西南地区硬枝野荞麦(Fagopyrum urophyllum)居群的遗传多样性研究

采用等位酶电泳技术了云南省中北部昆明、富民、宾川3县（市）及四川省西南布拖县的硬枝野荞麦（Fagopyrum urophyllum)6个天然居群的遗传多样性和分化。硬枝野荞麦居群内维持有较高的遗传多样性,多态位点比率为50．0％,预期杂合度和观察杂合度分别为0．251和0．471。并对硬枝野荞麦（F.urophyllum)与栽培荞麦之间遗传变异作了比较。     

超声波介导法转化玉米愈伤组织及可育转基因植株的获得

应用超声波介导法,首次成功地将Bt毒蛋白基因导入了重要的禾谷类作物玉米,并获得了可育的转基因植株及后代.Southern分子杂交结果证明,外源基因已整合进R_0植株和R₁代的染色体组中.超声波声强和处理时间是决定超声波介导法转化效率的2个最重要的参数,以 0.5W/cm²的声强、30min处理的转化效果最佳,最高相对转化频率达到13.3%.适当参数的超声波处理能使细胞表面形成大量的小孔,又减少了外源DNA分子的断裂,从而使外源DNA分子进入细胞.     

四川省凉山州北部栽培苦荞麦的遗传多样性研究

用等位酶电泳技术测定了四川省凉山彝族自治州北部越西和甘洛２县的苦荞麦「Ｆａｇｏｐｙｒｕｍ ｔａｔａｑｒｉｃｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ．」１７个栽培居群的遗传多样性和分化,结合农业生物学性状进行了分析。对７个酶系统的１５个位点的检测表明,苦荞麦居群内的遗传多样性水平高于该州南部的苦荞麦和其他地区甜荞麦,每个位点的等位基因平均数为１．９,多态位点比率为５２．１％,平均实际杂合度和预期杂合度分别为０．１９     

酶联免疫斑点法在新发传染病疫苗研究中的应用

酶联免疫斑点法(ELISPOT)是一项具有较高敏感性和特异性的细胞免疫学检测技术,目前常用于疫苗开发中评价疫苗诱发的细胞免疫效应。我们就ELISPOT技术的原理、具体实验操作、技术优势,及其在新发传染病疫苗研究中的应用等进行综述。     

鳙鱼染色体的DAPI核型分析

利用腹腔注射秋水仙素制备肾细胞染色体方法和DAPI（4＇,6＇-diamidino-2-phenylindole）荧光染色的方法,对鳙鱼（Aristichthys,nobills）的染色体组型和染色质的分布进行了研究。结果表明,其二倍体数目为2n=48,核型为30M＋14SM＋2ST＋2T。DAPI荧光染色显示间期细胞核中荧光亮度较为一致,提示异染色质在间期细胞核中分布比较均一。而DAPI荧光染色在第1和第4染色体的短臂上较为明亮,其余染色体上的明亮区都分布在着丝粒区域,表明第1和第4染色体上的异染色质主要集中在染色体的短臂上,其余染色体的异染色质主要分布在着丝粒区域。