海洋真菌产抗菌物质培养基及其性质研究

目的:海洋真菌Fy-04产抗菌物质培养基及性质研究.方法:管碟法测定抑菌效果确定海洋真菌Fy-04产抗菌物质的培养基及其性质.结果:海洋真菌Fy-04产抗菌物质对金黄色葡萄球菌抑菌最佳培养基组成为:马铃薯海水浸出液60%,葡萄糖2%,蛋白胨1%,酵母膏0.1%,抑菌圈直径34.6mm;对大肠杆菌抑菌最佳培养基组成为:葡萄糖2%,蛋白胨0.7%,酵母膏0.1%,FePO4 0.04%,抑菌圈直径21.6mm;抗菌物质80℃处理1h,残留活性60%以上,pH稳定范围在pH 6.0～10.0.结论:该菌株代谢产物对细菌有较好的抑菌效果,并能溶于乙醚、三氯甲烷中等极性的有机溶剂中.     

两种生物型芦苇胚性悬浮培养物对渗透胁迫的生理响应 Ⅱ．抗氧化酶类活性的变化

渗透胁迫处理下,沙丘芦苇和沼泽芦苇培养细胞的H2O2含量变化不大,MDA含量随时间延长而降低。抗氧化酶中,沙丘芦苇的SOD、CAT、POD和APx的活力均显著高于沼津芦苇,显示出比沼泽芦苇更强的ROS清除能力。胁迫初期（0．5h-1d)沙丘芦苇细胞中主要表现出SOD、CAT活力的提高,胁迫2d后4种酶活力均明显被诱导。两种生态型芦苇的PEG适应性培养物APx及SOD酶活力显著提高,POD活性仅沼泽芦苇中升高。提示SOD、CAT主要参与沙丘芦苇在渗透胁迫下的短期响应,而APx与长期响应有关。     

辣椒疫毒致病毒素

辣椒疫霉（PhytophthoracapsiciLeonian）在培养液中振荡培养时可分泌毒素,这种毒素能引起辣椒叶片形成水渍状褐腐斑,类似病原菌侵染后形成的症状。Plich’s和V8C培养液适于P.capsici的生长和产毒;生长适宜温度和pH范围分别为20～30℃与pH6～7,在25～30℃、pH5～8的条件下培养滤液毒性最强;培养15天产毒达到最高值。滤液先后经85％硫酸铰沉淀、DE52、CM32和SephadexG－75柱层析将毒素纯化。经鉴定该纯毒素为39．8kD酸性糖蛋白,并对80℃以上高温或蛋白酶敏感,而β-D-葡萄糖苷酶处理不影响其毒性,蛋白亚基为毒素的活性中心。毒素处理寄主叶片引致病理性坏死,这一作用与辣椒品种抗病性有关。     

一株海洋真菌菌株M-01产抑菌物质发酵条件研究

对从海泥中分离到的1株海洋真菌菌株M-401产抑菌物质的发酵条件及所产抑菌物质的热稳定性、pH稳定性进行了初步的研究。结果表明,菌株M-401适宜发酵培养基组成为马铃薯40%,蛋白胨0.6%,酵母膏0.2%,葡萄糖1%,海水100%;培养基初始pH值为6.0~7.0;发酵温度24℃,发酵时间48~72 h;抑菌物质80℃处理1 h,残留活性60%,pH稳定范围在4~8之间。     

胃癌及癌旁组织中Rb基因缺失和重排的研究

<正> Rb基因即视网膜母细胞瘤敏感基因,被认为是一种抑癌基因。它在正常细胞中存在,而在视网膜母细胞瘤中有缺失。将正常的Rb基因导入有Rb基因缺失的视网膜母细胞瘤和骨肉瘤细胞内,可以抑制上述两种肿瘤细胞的生长。目前已在多种人类肿瘤中如骨肉瘤、纤维肉瘤、小细胞肺癌、乳腺癌等发现有Rb基因的缺失。胃癌组织中Rb基因丢失的研究未见报道。本实验使用Southern杂交方法在胃癌及癌旁组织中进行Rb基因缺失和重排的研究,探索Rb基因在胃癌发生、发展中的作用。     

癌基因Ha-ras在转化和未转化细胞中表达和调控的差异

以前的工作曾用人胃癌基因Ha-ras转化了大鼠全胚细胞系Ratl细胞,得到转化细胞Rat3-3。克隆了Ha-ras癌基因6.6kb及其上游区2.5kb DNA片段,并发现2.5kb有Alu重复顺序,说明这个片段是来源于人胃癌细胞,虽族观察到p21蛋白编码12位点突变,我们又发现转化的Rat3-3细胞的Ha-ras mRNA水平比未转化的Rat1高大约五倍;通过DNase I超敏感实验证明只有转化细胞核中的Ha-ras基因对DNaseI敏感,1μg/mL的DNaseI就有明显的降解,而未转化细胞Rat1细胞核的Ha-ras基因在15μg/mL的DNaseI中也未发现有任何降解;另外还发现转化细胞核有一种能为Ha-ras基因上游区2.5kb特异结合的核蛋白,分子量大约35kD,此核蛋白不能与6.6kb Ha-ras基因本身结合,在未转化细胞中未发现此蛋白。从这些结果推测,癌基因Ha-ras的活化,除了点突变外,还可能存在另一条活化途径,即它的上游区可能有类似增强子的调控区。     

以寡聚核苷酸为探针对癌基因Ha-ras点突变的测定

<正> 基因中一个核苷酸的改变(点突变)是原癌基因活化的途径之一。核苷酸序列分析表明,我们从胃癌细胞系中克隆出的癌基因Ha-ras,就是由于其编码区第35位核苷酸从鸟嘌呤(G)变为胸腺嘧啶(T)而被激活的。测定基因的点突变除了序列分析方法之外,还有比较简单、经济的寡聚核苷酸探针分子杂交等方法。我们按照正常的原癌基因c-Ha-ras和胃癌     

一种测定癌基因c-Ha-ras点突变的简易方法——PCR-RFLP法

利用多聚酶DNA链延伸反应与限制性内切酶酶解片段长度多态性分析相结合,可简单、迅速、准确地对胃癌组织及细胞株DNA中癌基因c-Ha-ras第12位密码子是否存在点突变进行测定。这个方法是使用非同位素方法对单拷贝基因点突变进行检测的首次报道。     

胃癌和癌旁组织癌基因c-Ha-ras第12位密码点突变测定的研究

 <正> 胃癌是我国发病率、死亡率最高的肿瘤之一,癌基因c-Ha-ras第12位密码子的点突变(鸟嘌呤突变为胸腺嘧啶)是其激活的重要方式之一,这一突变使c-Ha-ras的产物p21蛋白第12位氨基酸从正常的甘氨酸变为胃癌中的缬氨酸~[1-4]。点突变的测定可成为临床医生判断术后患者预后的有用指标,为拟定更有效的治疗方案提供帮助。据有关资料统计,点突变阳性及阴性患者的术后生存期分别为11.3±4.5个月和>29±8.1个月,两组间有显著差异     

转化相关蛋白p86的鉴定

以转化细胞Rat3-3免疫大鼠,获得单克隆抗体E5(MeAb E5)。其对应抗原耐热,是分子量为86kD的蛋白质(P86)。它在c-Ha-ras癌基因转化的细胞上均有较高的阳性表达,而在其相应的非转化细胞上含量甚微。以人工合成的反义c-Ha-ras寡聚核苷酸As-Ⅱ处理Rat3-3细胞,该细胞生长受抑(44.2％),,此对p86的表达亦降低(39.1％)。P86在五种人胃癌细胞系中均有较高表达,在原发胃癌及其转移灶中阳性率达82.6％。p86不仅是一种与C-Ha-ras转化相关的蛋白,而且为胃癌相关抗原。