病毒免疫荧光结合物性能的研究

统一测定荧光血清中各种成分的方法,观察荧光素(F)、蛋白质(P)及免疫活性抗体(ab)间的比例关系,使之规格化,对荧光血清的制备检定有重要意义,也是免疫荧光技术在推广应用中极待解决的问题。E.H.Beutner报告了抗人IgG的检定及其对抗梅毒螺旋体抗体及抗核抗体的染色效果。E.H.Hébert,等报告了细菌的直接荧光抗体制剂的最适F/P。为了     

轮状病毒生物学性状的研究

对最常应用的3个轮状病毒(RV)标准株(人的Wa株,牛的NCDV株,猴的SA_(11)株)进行了形态学、培养特性及理化性质的比较观察与检测。它们在MA_(104)细胞上的培养特性基本相同,在电镜下呈现RV特有的形态结构,RNA电泳图具有典型的电泳带分布模式4、2、3、2规律,各项理化性质亦与文献报道一致。表明RV的细胞适应株的生物学性状有相当高的稳定性。     

SINDBIS病毒结构蛋白的肽图

采用双向肽图法对Sindbis病毒糖蛋白(E_1和E_2)及衣壳蛋白(C)的寡肽进行了分析。首先,用不连续的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对该病毒的三种结构蛋白进行分离,经考马斯蓝染色定位后,分别切取蛋白带。然后,按改良的氯氨T法用~(125)I直接标记胶条中的蛋白质;~(125)I标记的蛋白经TPCK-胰酶消化后,在硅胶板上进行电泳和层析。结果表明,三种结构蛋白的肽图是不同的。但两种糖蛋白分子E_1和E_2具有某些类似之处,因此,它们可能含有一些共同的顺序;与衣壳蛋白C相比则截然不同。说明Sindbis病毒的结构蛋白E_1、E_2和C具有不同的氨基酸排列顺序。     

SINDBIS病毒基因组的研究

Sindbis病毒经蔗糖密度梯度离心纯化后,用SDS/酚/氯仿/异戊醇处理和乙醇沉淀,制得的基因组RNA具有典型核酸紫外吸收光谱的特征:最大吸收在260nm,最小在235nm。沉降系数为45S。沉降扫描图表明,RNA样品均一,分子完整。 用高渗法在原代鸡胚纤维母细胞测定了基因组RNA的感染性,空斑滴度为5.9×10~4pFU(空斑形成单位)/ml,空斑形态和大小与完整病毒颗粒相同。经核糖核酸酶处理,基因组RNA即丧失感染性,说明了这种生物活性的特异性。     

基孔肯雅病毒浓缩提纯及多肽抗原研究

采用聚乙二醇(PEG 6000)沉淀法(粗提)和蔗糖密度梯度速率区带离心(精提)浓缩纯化基孔肯雅病毒获得满意效果。以SDS-PAGE和免疫印迹法分析基孔肯雅病毒结构蛋白的组成及抗原性。结果证实:基孔肯雅病毒含有三种结构蛋白(E₁、E₂和C),另一种病毒特异性蛋白E₃与完整毒粒无结构上的联系;病毒粗提样品与精提样品的免疫印迹结果基本一致,尽管在SDS-PAGE图谱上二者相差甚大,因而就某些研究或应用目的而言,病毒的纯化程序可简化。文中初步探讨     

Sindbis病毒基因组的寡核苷酸指纹图

迄今,医学上重要病毒病的诊断和流行病学的研究,仍依赖血清学和生物学(表型特征) 的检测方法。由于这些方法主要是针对一小部分病毒蛋白或少数基因功能的;加之有些病毒易发生抗原漂移,表型标志不稳定,因此,对亲缘关系较近毒株的鉴别,对探讨病毒(型或亚型内)遗传学和流行病学关系,推断病毒流行传播途径等几乎是不可能的。因而给病毒病的诊断     

基孔肯雅病毒浓缩提纯及多肽抗原研究

采用聚乙二醇(PEG 6000)沉淀法(粗提)和蔗糖密度梯度速率区带离心(精提)浓缩纯化基孔肯雅病毒获得满意效果。以SDS-PAGE和免疫印迹法分析基孔肯雅病毒结构蛋白的组成及抗原性。结果证实:基孔肯雅病毒含有三种结构蛋白(E_1、E_2和C),另一种病毒特异性蛋白E_3与完整毒粒无结构上的联系;病毒粗提样品与精提样品的免疫印迹结果基本一致,尽管在SDS-PAGE图谱上二者相差甚大,因而就某些研究或应用目的而言,病毒的纯化程序可简化。文中初步探讨了以基孔肯雅病毒包膜糖蛋白为特异性抗原用于流行病学调查和临床     

番茄叶绿体DNA的分离纯化及某些性质的研究

分离纯化了番茄的叶绿体DNA(ct DNA)。热变性分析测得Tm=82.1℃,由此计算得(G+C)％=31.2％。热变性微分曲线表明,在番茄ct NDA分子上存在着碱基组成比例分布上的异质性。分析超离心测得沉降系数S_(20w)=62.4。据此计算出分子量为80×10~6d。用电子显微镜观索了制备的ctDNA.