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Met-Lys-双C肽人胰岛素原基因的构建表达及分离纯化 总被引：2，自引：0，他引：2
应用 Ｐ Ｃ Ｒ 定点突变方法构建编码 Ｍ ｅｔ Ｌｙｓ 双 Ｃ 肽人胰岛素原基因,并在大肠杆菌中以包含体方式获得表达 表达产物经还原、重组、 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ ７５ 分离纯化,获得 Ｍ ｅｔ Ｌｙｓ 双 Ｃ 肽人胰岛素原,经胰蛋白酶与羧肽酶 Ｂ的酶解, Ｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｔ Ｍ Ｑ 阴离子交换柱层析分离制备得人胰岛素,其放免活性、受体结合活性均与猪胰岛素相同 相似文献
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纯化猪脑苯甲二氮结合性抑制物 (DBI)并研究它在镇痛方面的生物学功能 .猪脑提取液经SephadexG 5 0分子筛层析、SP SepharoseFastFlow阳离子交换柱层析、SourceTM30SFPLC和RP HPLC分离得到DBI ,纯度达 93 5 % .经测定其相对分子质量 (Mr)为 980 8.3,pI为 7 2 .氨基酸组成及其序列检测结果表明 ,该蛋白由 86个氨基酸组成 ,与猪肠DBI的序列相同 ,而且N端都是乙酰化封闭的 .镇痛活性实验在SD雄性大鼠上进行 ,测量其对伤害性热和机械刺激反应的潜伏期作为指标 .将DBI注射到大鼠的侧脑室和脊髓蛛网膜下腔内 ,都产生明确的镇痛作用 ,在吗啡耐受的大鼠侧脑室注射DBI仍有镇痛作用 .无论在脊髓或脑水平 ,DBI对吗啡的抗伤害作用均无明显影响 .结果提示 ,中枢神经系统内 ,DBI在一定剂量内有明确的镇痛作用 ,对吗啡耐受的大鼠DBI仍有镇痛作用 相似文献
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猪脑组织提取液经SephadexG-50分子筛层析,S-SepharoseFastFlow阳离子交换柱层析及两次HPLC分离得到一分子量为12000,等电点pI7．1的多肽,并测定了其氨基酸组成和N末端部分序列：N-phe-Lys-Gly-Phe-Pro-Asp-Asp／（Lys）-Lys／（Asp）-Asp-Tyr．给昆明小鼠脑室注射或尾静脉注射该肽均能抑制吗啡引起的镇痛作用,其作用随着注射剂量的增大而增强．用BALB／C小鼠制备了该肽的抗血清,脑室注射此抗血清能明显逆转昆明小鼠对吗啡的耐受．因为这种来自猪脑的具有抗阿片镇痛作用的肽有99个氨基酸,所以简称此肽为AOP-99a（anti-oPioidpeptide）． 相似文献
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