非特异性脂质转移蛋白突变体的构建及在两种硫氧还蛋白表达载体中的表达比较

对水稻非特异性脂质转移蛋白(Nospecific lipid transfer protein,nsLTP) LTP110中结构重要的5个氨基酸位点进行了定点突变,测序结果证实了突变体构建成功。在尝试了多种大肠杆菌表达系统进行表达之后,发现硫氧还蛋白融合表达载体适合于LTP110野生型及突变体的表达。将编码野生型LTP110及突变体Y17A,P72L,R46A,D45A,C50A蛋白的cDNA顺序克隆进两种硫氧还蛋白表达载体并对其表达情况进行了比较：pTrxFus载体可以在宿主菌GI724中以较低水平表达野生型LTP110及突变体Y17A,P72L,R46A融合蛋白,但不能表达D45A和C50A融合蛋白;pET32a(+)载体可以在宿主菌BL21 (DE3) trxB-中以可溶蛋白的形式表达野生型及所有突变型融合蛋白,且表达量比在pTrxFus载体/GI724突主菌中表达量高。对pET32a(+)载体中表达的LTP110融合蛋白进行了纯化,并利用带有荧光标记的脂肪酸分子对其测活,结果表明表达的野生型LTP110分子具有结合脂质的活性。     

水稻中一个人类肿瘤抑制基因同源物的克隆与表达分析

用同源筛选方法,从水稻 (Oryza sativa L.) 基因组文库中分离到一个与人类肿瘤抑制基因QM具有同源性的基因,命名为OSQM1.该基因包括4个外显子和3个内含子,编码219个氨基酸,其中有46个碱性氨基酸,其等电点高达11.02.同源性搜寻发现此基因存在于真核生物中而且保守性较强,表明它可能具有重要的作用.Northern分析结果表明,它在不同的水稻器官中都有表达,但在花和愈伤组织中的表达水平明显低于其他营养器官.它在根和叶中的表达水平受环境因素的影响.     

水稻中一个人类肿瘤抑制基因同源物的克隆与表达分析(英)

用同源筛选方法 ,从水稻 (OryzasativaL .)基因组文库中分离到一个与人类肿瘤抑制基因QM具有同源性的基因 ,命名为OSQM1。该基因包括 4个外显子和 3个内含子 ,编码 2 19个氨基酸 ,其中有 4 6个碱性氨基酸 ,其等电点高达 11.0 2。同源性搜寻发现此基因存在于真核生物中而且保守性较强 ,表明它可能具有重要的作用。North ern分析结果表明 ,它在不同的水稻器官中都有表达 ,但在花和愈伤组织中的表达水平明显低于其他营养器官。它在根和叶中的表达水平受环境因素的影响。