番茄耐盐体细胞变异体的离体筛选

以上海主要栽培番茄品种“鲜丰”的下胚轴作为外植体诱导愈伤组织,用NaCl进行直接高盐胁迫和逐渐加大盐浓度胁迫筛选。研究结果表明,逐渐NaCl浓度胁迫筛选获得的耐盐性大多属生理适应性,直接高盐胁迫筛选才有可能获得真正的耐盐突变体。直接高盐胁迫筛选再生出的12株耐盐植株,在150mmol/L NaCl的盐胁迫下,幼苗的成活率可达66％,而未经胁迫筛选过的原始株成活率则为零。其中,2株耐盐突变株能正常开花、结果。其在盐胁迫培养基中芽体的生根率、鲜重及干重均显著高于原始株。     

番茄下胚轴离体培养植株再生及其组织学观察

研究了上海地区的主要栽培品种之一“鲜丰”番茄下胚轴离体培养过程中的激素调控 ,结果表明 :“鲜丰”番茄下胚轴进行离体培养过程中 ,MS培养基上附加不同浓度的生长素( IAA)和细胞分裂素 ( BA) ,对愈伤组织的形成影响不大 ,但对不定芽的分化有较大的影响 ,得出最佳培养基为 MS+ BA1 .0～ 2 .0 mg· L- 1+ IAA0 .2 mg· L- 1。用不同浓度的 ZT、BA、KT进行单因子芽器官的诱导实验 ,发现 ZT的作用力强于 BA和 KT,KT最弱 ;用不同浓度NAA、IAA、IBA、2 ,4- D进行发根培养实验 ,发现番茄的内源生长素浓度较高 ,用外植体直接发根外加生长素有一定的作用 ,若用不定芽扦插发根 ,不附加生长素也极易发根 ,故番茄的生根培养基为 1 /2 MS或 MS附加 IAA 0 .0 5～ 0 .1 mg· L- 1。另外 ,对有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生的组织学观察表明 :番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区 ,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

盐胁迫下不同基因型番茄可溶性物质含量的变化

以两种野生番茄秘鲁番茄(Lycopersicon peruvianum LAlll)、潘那利番茄(Lycopersicon pennellii LA716)和两种栽培番茄"鲜丰98-7"、"交农1号"为材料,用NaCl 150 mmol/L进行盐胁迫,测定及分析了植株体内Na 、K 、Ca2 等无机离子和某些有机溶质游离脯氨酸、可溶性糖的含量.结果表明,盐胁迫条件下,野生番茄在新叶中积累了大量的Na 等无机离子,而栽培番茄新叶内脯氨酸和可溶性糖的含量却显著提高,且它具有将吸收的Na 区域化到老叶中的能力.说明野生番茄和栽培番茄在可溶性物质的合成和积累能力上有明显差异,它们是通过不同代谢途径和机理来适应盐环境的.     

Cloning of a NaCl-induced fructose-1, 6-diphosphate aldolase cDNA from Dunaliella salina and its expression in tobacco

Itisaworld-widefocusthatsoilbecomesmoreandmoresaline.Aboutone-thirdirrigablelandbecomeslostallovertheworldforthereasonthatthesalinityistoohigh.Therefore,im-provingthesalt-toleranceofcropsseemsmoreandmoreimportant.Previousstudyonthemecha-nismofsaltresistantofplantshaspaidmoreattentiontohigherplants,whileonlyafewtoalgae.Studyintheseyearsshowedthatalgaehadthesimilarbiophysiologicalandbiochemicalreactiontoallhigherplantsinadversity[1].Soitisreliabletoapplyalgatorelatedstudy.Dunaliellasalina,akind…     

番茄离体培养过程中器官发生的细胞组织学观察

对番茄下胚轴、子叶、茎段、叶片、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察。研究结果表明番茄不同类型外植体在同样的培养条件下,愈伤组织生长表现出明显差异,其中下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动最早,生长最快,其分裂方式基本为无丝分裂,未见有丝分裂,因此我们认为以不定芽方式获得转基因植株时,植株的所有性状变化,是否纯属目的基因所为,应该反复考察,不能忽视不定芽产生过程中的种种变化;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规则的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到的正常芽的比例高于子叶的;番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

受NaCl诱导的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶cDNA的克隆及其在烟草中的表达

采用快速扩增cDNA末端(RACE)技术, 获得了盐藻(Dunaliella salina)受诱导表达的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶全长cDNA (DsALDP). 蛋白质序列分析发现, DsALDP与许多植物叶绿体的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(AldP)具有较高的同源性(66%~73%). 系统进化分析进一步证明DsALDP与藻类的AldP亲缘关系最近. 就表达谱而言, DsALDP是NaCl诱导下新表达的转录本, 其表达水平随诱导时间的不同而呈显著变化. 筛选的DsALDP cDNA构建到双元载体pBI121并导入农杆菌用以转化烟草, 对4个T₁代转基因植株进行Southern检测, 证明DsALDP已整合入转基因植株的基因组. RT-PCR分析显示DsALDP在这些植株中均得到有效表达. 生物测试表明, T₁-1, T₁-2和T₁-3植株在100~200 mmol/L NaCl下仍保持醛缩酶活性, 且其脯氨酸含量均有不同程度的升高.     

Bt 毒蛋白基因在转基因抗虫植物中的应用

1　引言世界上每年因虫害而造成的农产品损失估计为 13 %。在我国 ,水稻每年因虫害减产 10 %以上 ,小麦减产近 2 0 % ,棉花产量损失达 2 0 %～3 0 % ,如果加上这些农产品在贮藏过程中因虫害而造成的损失则更大。目前 ,农作物保护主要依赖于施用农药 ,从长远利益来看 ,将来必须发展绿色环保型农业 ,以减少能源和化学药剂的投入量 ,并且不会产生药剂残留、环境污染以及害虫的抗药性等问题。基因工程技术的发展克服了常规育种的不足 ,开辟了植物抗病虫害育种的新时代。抗植物虫害的基因有很多 ,目前经常使用的主要有 3种 ,即豇豆胰蛋白酶抑制剂…     

利用花粉管通道技术培育番茄耐盐新种质

利用白花授粉后形成的花粉管通道分别将番茄耐盐野生近缘种Lycopersicon peruvianum LAlll、Lycopersicon cheesmanii LAl66、Lycopersicon pennellii LA716、Lycopersicon pimpinellifolium LA2184的总DNA及含来源于大麦LEA基因家族的HVAl基因的pBY520质粒DNA导人栽培番茄“鲜丰”及“矮黄”,获得了较为广泛的变异,经过对后代的选择培育获得了一批农艺性状优良的耐盐新种质,并已培育耐盐新品系1个;传统的叶色遗传与现代的PCR检测表明番茄通过花粉管通道导人外源DNA是可行的。     

Cloning of a NaCl-induced fructose-1, 6-diphosphate aldolase cDNA from<Emphasis Type="Italic">Dunaliella salina</Emphasis> and its expression in tobacco

Using Rapid Amplification of cDNA ends (RACE) technique, the full-length cDNA encoding a NaCl-induced fructose-1, 6-diphosphate aldolase (DsALDP) was obtained. It was shown that the DsALDP had a relatively high homology (66%–73%) to chloroplast fructose-1, 6-diphosphate aldolase (AldP) in many plants according to their amino acid sequences. The phylogenetic analysis further confirmed that AldP in alga is the nearest to DsALDP. As to its expression pattern,DsALDP was denovo synthesized by NaCl induction. Its expression level was significantly changed with inducing time. After the selectedDsALDP cDNA subcloned into a binary vector pBI121, the new construct was introduced into tobacco byAgrobacterium tumefaciens. The results of Southern blot and RT-PCR analysis of four transgenic T1 plants indicated thatDsALDP was integrated into genome of these transgenic plants and effectively expressed. Aldolase activities have been detected in T1-1, T1-2 and T1-3 plants by bioassay under 100–200 mmol/L NaCl. It was also observed that proline contents in them were differentially increased.     

番茄离体培养过程中器官发生的细胞组织观察

对番茄下胚轴、子叶、茎段、叶片、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察。研究结果表明：番茄不同类型外植体在同样的培养条件下,愈伤组织生长表现出明显差异,其中下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动最早,生长最快,其分裂方式基本为无丝分裂,未见有丝分裂,因此我们认为以不定芽方式获得转基因植株时,植株的所有性状变化,是否纯属目的基因所为,应该反复考察,不能忽视不定芽产生过程中的种种变化;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规则的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到的正常芽的比例高于子叶的;蕃茴离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。