小脑症蛋白ASPM和钙调蛋白的复合物的纯化和表征

常染色体隐性小脑症(Autosomal recessive primary microcephaly, MCPH)是一种与大脑缩小和智力缺陷有关的神经发育障碍。 ASPM(abnormal spindle-like microcephaly-associated)是最常见的MCPH的致病基因,但其潜在机制尚不清楚。我们发现钙调蛋白(calmodulin, CaM)通过与ASPM的IQ区域相互作用而对ASPM的功能有重要的调控作用。我们纯化了ASPM IQ区域和CaM的复合物,并通过分子排阻色谱结合多角度静态光散射（SEC-MALS）和圆二光谱（CD）实验发现了ASPM和apo_CaM的结合比例为1：8。有趣的是,在Ca2+存在时,ASPM的IQ区域与Ca2+_CaM的结合比例变为了1：7。此外,通过比较不同条件下（Ca2+存在与否）的CD光谱,ASPM-CaM复合物显示出Ca2+依赖性的热稳定性变化。综上所述,我们的研究揭示了Ca2+诱导的ASPM-CaM相互作用的调节机制。     

内皮细胞生长因子的提取纯化和鉴定

通过CM-纤维素C50,肝素交联琼脂糖6B凝胶及高效液相色谱将内皮细胞生长因子高度纯化.结果表明,该因子分子量15 500道尔顿,等电点pH 6.0,能同时促进人脐静脉内皮细胞及L 929成纤维细胞生长.     

人心肌肌钙蛋白T的纯化和单克隆抗体的制备

从人左室心肌中成功纯化心肌肌钙蛋白T(cTnT). 经匀浆, 70℃加热处理, 咪唑盐酸透析, DEAE-纤维素层析, 100g心肌获取cTnT 5mg, 纯度为97.6%. 同时采用脾内免疫法, 免疫Balb/C小鼠, 经细胞融合, 筛选, 克隆化得5株稳定分泌抗人cTnT单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞(G₃, G₈, G₁₀, A₅, A₇), 4株为IgM, 1株为IgG, 染色体数目92～110条. 腹水效价为3.2×10^-6～1. 6×10^-7.     

BLUF蛋白TePixD Y8F突变体的结构

目的 TePixD（Tll0078）是一种来自细长嗜热聚球藻（Thermosynechococcus elongatus BP-1）的blue light-using flavin（BLUF）感光蛋白。TePixD蛋白在FAD口袋周围有一个保守的Tyr8-Gln50-Met93三联体,以介导质子偶联电子转移（proton-coupled electron transfer,PCET）过程。但具体的光响应机制有待进一步研究。本文的目的是解析TePixD在光响应关键位点突变体的结构以及生化性质,以此分析TePixD的光响应过程。方法 利用X射线衍射法解析TePixD Y8F突变体的晶体结构,Tyr8侧链在PCET过程中有重要作用,而突变体Phe8的侧链失去了羟基从而使分子无法介导PCET。本文比较了TePixD野生型和Y8F突变体之间的结构,并比较了同蛋白家族的SyPixD Y8F与TePixD Y8F的结构。此外,使用多角度光散射法分析几种TePixD在光响应关键位点突变体（Y8F、Q50L、W91F、Y8F/W91F和Q50L/W91F）在溶液中的生化特性。结果 本文以2.54 ?分辨率解析了TePixD Y8F突变体的晶体结构,发现其与TePixD野生型的整体结构相似,而与SyPixD Y8F存在显著差异。生化分析表明,对比黑暗和光照条件时,TePixD突变体与野生型的分子质量变化以及洗脱峰表现出差异,表明突变体对光诱导蛋白质构象变化产生干扰。结论 本文的结构测定和生化分析为揭示BLUF蛋白的光响应机制提供了新信息。     

同步纯化人心肌肌钙蛋白T、I

同步纯化人心肌肌钙蛋白Ｔ、Ｉ李志梁付朝平钱学贤陆青王素华黎梅兰（第一军医大学珠江医院心内科,广州５１０２８２）关键词心肌肌钙蛋白Ｔ;心肌肌钙蛋白Ｉ;同步纯化收稿日期：１９９６－０４－１７;接受日期：１９９６－０８－２７。心肌肌钙蛋白包括３种不同的蛋白...     

炉甘石洗剂外涂治疗小儿手足口病皮疹的临床观察

目的观察炉甘石洗剂外涂治疗小儿手足口病皮疹的效果。方法选择2017年8月～2018年8月在我院儿科一区住院的手足口病患儿100例,随机分为治疗组和对照组各50例,对照组50例患儿给予隔离、抗炎、营养、增强免疫力等对症支持治疗,治疗组患儿在对照组治疗的基础上予以炉甘石洗剂外涂皮疹局部,比较两组患儿的疗效、皮疹消退时间、住院时间、体温恢复正常时间。结果治疗组的总有效率为98%优于对照组的70%(P0.05),皮疹消退时间、住院时间、体温恢复正常时间均短于对照组,组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论炉甘石洗剂外涂治疗小儿手足口病皮疹的疗效显著,无不良反应,值得临床推广应用。