膜过滤细胞直接计数新方法

介绍了两种膜过滤细胞直接计数新方法,即不透明滤膜的金相显微镜细胞直接计数法和透明滤膜的生物显微镜细胞直接计数法的基本原理、仪器设备、分析和计算方法,并且将此方法与荧光显微镜细菌计数、血球计数板等方法进行了比较。实际计数结果表明,两种膜过滤细胞直接计数法配合了独特的酸碱处理法以分散聚团细胞,用于非环境样品细胞浓度的测定具有快速准确简便的特点。此外,该方法基本不受细胞大小的影响,除了适用于体型较大的藻类、酵母菌的快速计数以外,还可以清晰地分辨诸如光合细菌这样体积较小的细菌。     

蜘蛛牵引丝蛋白cDNA的扩增、克隆与序列分析

蜘蛛是一种能在同一生物体内产生具有不同功能的多种丝的生物。蜘蛛丝的本质是蛋白质。牵引丝 (Ｄｒａｇｌｉｎｅｓｉｌｋ)是由蜘蛛的主壶腹腺 (Ｍａｊｏｒａｍｐｕｌｌａｔｅ ,ＭＡ)产生的 ,其较高的抗张强度 (4× 10 9Ｎ ｍ2 )与弹性 (35 % ) [1 ,2 ] ,使之成为一种有广阔应用前景的生物材料。目前 ,国外已有实验室通过构建ｃＤＮＡ文库的方法获得Ｎｅｐｈｉｌａｃｌａｖｉｐｅｓ中的两个牵引丝蛋白Ｓｐｉｄｒｏｉｎ1与Ｓｐｉｄｒｏｉｎ2的ｃＤＮＡ片段[3 ,4] ;但国内尚未见有相关报道。本文介绍的工作是利用简单便捷的ＰＣＲ技术对牵引丝…     

白念珠菌毒力因子及致病机制研究进展

白念珠菌作为条件致病真菌,其感染力受各种毒力因子及不同宿主的影响。该文将白念珠菌的毒力因子和宿主细胞作为论述对象,探究其对白念珠菌致病性的影响,并对其致病机制进行综述,为进一步开发、利用治疗白念珠菌的药物奠定理论依据。     

兔防御素（MCP—1）cDNA的克隆与序列分析

从兔脾脏细胞中分离提取总ＲＮＡ,经反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增出兔巨嗜细胞阳离子多肽（ＭＣＰ－１）ｃＤＮＡ,插入经ＥｃｏＲ Ｉ和Ｘｂａ Ｉ双酶切的ｐＵＣＤ１９中,构建了党生质粒ｐＵＣＤＥＦ,进行了限制性酶切鉴定和序列分析,结果在扩增出的ｃＤＮＡ２８８个碱基中,在前片段中有一个碱基与发表的兔ＭＣＰ－１ ｃＤＮＡ序列不同,即第１５７位碱基由Ｇ变为Ａ,导致编码的氨基酸由丙氨酸变为苏氨酸。该ｃＤＮＡ全     

兔防御素(MCP-1)cDNA的克隆与序列分析

从兔脾脏细胞中分离提取总RNA,经反转录PCP(RT-PCR)扩增出兔巨嗜细胞阳离子多肽(MCP-1)cDNA,插入经EcoRI和XbaI双酶切的pUC19中,构建了克隆质粒pUCDEF.进行了限制性酶切鉴定和序列分析,结果在扩增出的cDNA288个碱基中,在前片段中有一个碱基与发表的兔MCP-1cDNA序列不同,即第157位碱基由G变为A,导致编码的氨基酸由丙氨酸变为苏氨酸.该cDNA全长288bp,编码94个氨基酸,由编码信号肽,前片段及成熟肽片段的序列组成.     

诱导胚胎干细胞向角膜上皮细胞分化的实验研究

探索胚胎干细胞在表层角膜缘基质诱导下向角膜上皮细胞分化的可能性. 体外培养带GFP标记的 ES-D3细胞, 并利用视黄酸进行预诱导, 然后将预诱导后的细胞接种在表层角膜缘基质上, 细胞融合形成单层后, 随机分为3组进行研究: 第1组传代后直接进行检测; 第2组在 气-液界面上培养10天, 然后植入裸鼠皮下以进行体内诱导; 第3组作为对照组, 不给予GFP-ES-D3细胞特殊诱导条件, 细胞自由分化. 诱导分化的细胞植入裸鼠皮下体2周后没有畸胎瘤形成. 诱导分化的细胞呈现上皮样外观, 体内诱导组和体外诱导组免疫组织化学染色均检测到CK3, P63和PCNA表达阳性, 电子显微镜检查可见两组细胞表面都有微绒毛和细胞间紧密连接形成. 实验对照组部分细胞脱落和死亡, 大部分表现神经样细胞的树突样外观, 小部分未死亡的贴壁细胞呈多态性, 这些结果表明胚胎干细胞在特定条件下经表层角膜基质诱导能够分化为角膜上皮细胞. 胚胎干细胞诱导分化有可能为眼表重建和组织工程化角膜的构建提供上皮种子细胞.     

植物抗体工程的研究

植物抗体工程研究的产生 　　自单克隆抗体技术建立以来,单抗在人类许多疾病的诊断和治疗中得到广泛应用。然而,在这些应用中存在两个需解决的问题：一、由于人的杂交瘤极难获得,所以大多数单抗来自小鼠,对人体有较强的免疫原性;二、治疗用的单抗生产成本高,运输困难,需要严格的无菌操作及冷藏系统等,难以普及应用。因此,现在对降低免疫原性和降低成本这两个方面,开展了研究。 　　植物基因工程的研究随着转基因技术的完善,越来越显出优越性。许多转基因产品已进入市场,近年来该技术已将外源基因从有利于植物生长、抗病抗逆等基…     

肿瘤患者感染三种常见革兰阴性杆菌耐药性分析

目的分析肿瘤患者临床分离的革兰阴性杆菌分布及其主要菌株的耐药性,为指导临床合理用药提供依据。方法对2014年1月~2015年12月恶性肿瘤患者感染分离的1478株革兰阴性杆菌及其主要菌株的耐药性进行回顾性分析。结果分离的1478株革兰阴性杆菌中,以大肠埃希菌(568/1478)38.43%、肺炎克雷伯菌(338/1478)22.87%、铜绿假单胞菌(216/1478)14.61%3种为主。这3种革兰阴性杆菌均呈多药耐药性;除亚胺培南对革兰阴性杆菌有较好的抗菌活性外,其它药物均显示有一定的耐药性,其中对派拉西林的耐药率在91%以上,头孢他啶、头孢噻肟、复方新诺明等药物的耐药率在70%以上。结论肿瘤患者感染革兰阴性杆菌耐药现象严重,尤其是感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌呈多重耐药,实验室应加强对革兰阴性杆菌耐药性的监测,以指导临床合理选用抗菌药物。     

降低外淋巴钙浓度对耳蜗电位的影响

本实验在人工灌流条件下降低鼓阶外淋巴钙的浓度,观察其对听神经动作电位（ＣＡＰ）、耳蜗微音器电位（ＣＭ）以及蜗内直流电位（ＥＰ）的影响,以分析钙离子的作用机制。无钙液鼓阶灌流使ＣＡＰ、ＣＭ幅度可逆地下降,但不明显地改变ＣＡＰＩ／Ｏ曲线的非线性特征。无钙外淋巴灌流并不改变ＥＰ以及用缺氧法得到的负相ＥＰ（Ｎ－ＥＰ）,但使ＥＰ对强声给－撤时的快速变化趋于消失。本文讨论了这些耳蜗生物电改变所提示的钙离子作用的可能机制。     

阿莫西林、雷贝拉唑联合克拉霉素治疗Hp 相关消化性溃疡的疗效

目的：探讨阿莫西林、雷贝拉唑联合克拉霉素治疗Hp相关性消化性溃疡的疗效及对患者生活质量的影响,为临床治疗提供 依据。方法：选择2013 年4 月-2015 年4 月本院收治的Hp 相关消化性溃疡患者120 例,根据治疗方法不同将患者分为研究组和 对照组,每组各60 例。研究组采用阿莫西林、雷贝拉唑及克拉霉素联合治疗,对照组采用奥美拉唑单药治疗。观察并比较两组患 者的临床疗效、SDS 评分及SAS 评分。结果：研究组总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;研究组SDS、SAS 评 分低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：采用阿莫西林、雷贝拉唑和克拉霉素联合治疗Hp 相关消化性溃疡具有较好的 临床疗效,能够显著改善患者的临床症状,提高生活质量,值得推广应用。