钠离子通道β4亚基糖基化的初步研究

异常表达的糖蛋白与PD等多种神经退行性疾病有关。糖蛋白组学研究发现,电压门控钠离子通道β4亚基在PD病人脑组织中表达明显增加。为了深入探索β4亚基及其糖链在帕金森发生发展中的作用,采用PD转基因鼠对其表达进行验证,对其潜在的糖基化位点进行定点突变,构建重组表达质粒。结果发现,在新生PD转基因鼠和野生成鼠脑组织中有~38kDa蛋白条带表达,而在新生野生鼠脑组织中不表达;用PNGase F酶处理去除糖链后,~38kDa蛋白条带变成迁移速递更快的较小分子量条带,说明β4亚基是高度糖基化的蛋白,并且其糖基化与生长发育有关。将突变重组质粒转入HEK-293细胞和小鼠神经瘤细胞Neuro2A中表达,结果发现突变型质粒分子量明显低于野生型。为研究β4亚基及其糖链的功能提供了一定的实验数据并打下了基础。     

金属硫蛋白对缺氧／复氧心肌细胞的保护作用

金属硫蛋白 (ＭＴ)是普遍存在各种生物体内、富含硫基的小分子蛋白 ,在缺血 /再灌注 (Ｉ/Ｒ)损伤中通过清除自由基减轻心肌细胞损伤 ,同时ＭＴ参与预缺血保护 (ＩＰＣ)。目前对ＭＴ在ＩＰＣ中的保护作用机制及功效仍无明确研究 ,本实验以培养的乳鼠心肌细胞缺氧 /复氧模拟缺血 /再灌注损伤 ,检测心肌细胞在ＩＰＣ处理后 2 4ｈＭＴ的含量、脂质过氧化程度及Ｎａ Ｋ ＡＴＰ酶、Ｃａ2 Ｍｇ2 ＡＴＰ酶的活力变化 ,锌诱导产生的ＭＴ作用 ,并比较ＭＴ与抗氧化剂谷胱甘肽 (ＧＳＨ)的保护作用 ,初步探讨ＭＴ的心肌保护作用机制及应用价值。1　…     

大肠杆菌O157菌体抗原基因检测芯片的制备

选择编码O157菌体抗原特异合成酶的rfbE基因设计引物于口探针,并制备检测芯片,通过两次PCR扩增,制备荧光标记的靶序列,并与芯片进行杂交,检测O157菌株和非O157病原体。结果所有O157菌株均在芯片相应探针处出现阳性信号,非O157杂交结果均为阴性;芯片检测灵敏度比PCR检测高50倍。说明基因芯片可以快速、灵敏、特异地检测O157菌体抗原,为建立快速灵敏的检测细菌病原体特征和鉴别诊断的自动分析系统提供了新方法。