癌基因的活动与肿瘤转移的关系

肿瘤细胞的异质性与肿瘤的转移能力有密切联系。在一个肿瘤细胞群体中,细胞的形态、增殖能力、染色体数目、抗原性和对药物的反应不完全相同;特别是在一个细胞群体中,它们的转移能力是不相同的。近来人们注意到癌转移与某些癌基因的活动有一定的联系。     

微波辐射的细胞生物效应及其在肿瘤治疗中的作用

近年来,人们利用现代细胞生物学技术,对微波辐射的生物学作用和机制做了深入的研究。发现经微波照射后的细胞,在细胞、亚细胞及分子水平上产生一系列的变化,导致细胞形态发生改变;细胞膜通透性增加;酶活性下降;分裂指数减少;DNA合成受抑制以及染色体断裂等。在肿瘤治疗中,利用微波加热可选择性地杀伤癌细胞,与化疗和放疗联合应用可提高其治疗效果。     

人胃癌细胞株BGC-823 DNA二轮转化细胞基因组文库的构建及其转化基因的克隆

以人胃癌细胞株BGC-823 DNA二轮转化的鼠成纤维细胞为材料,用λ噬菌体EMBL_3,作克隆载体,构建了转化细胞的基因组文库。用~(32)P标记的人Alu重复顺序和原癌基因c-Ha-ras为探针,对100万基因文库噬斑进行原位杂交筛选,找出了两个可以同时与上述探针杂交的阳性克隆。经对两个阳性克隆DNA进行分子杂交表明,它们均含有来自人胃癌细胞株BGC-823的转化基因Ha-ras,进一步运用质粒载体pBR322对这一转化基因进行次级克隆,并进行了限制性内切酶图谱的初探,从而为研究胃癌转化基因的结构、DNA序列及与原癌基因的异同奠定了基础。     

吖啶橙激光光敏化对离体培养肝癌细胞系的生物学效应

吖啶橙(Acridine Orange,AO)具有肯定的光敏作用,已在原生动物、离体培养细胞和动物实验中得到了证明。我们除了研究AO激光光敏化杀伤离体培养人体肝癌细胞的效应,对激光光动力学作用的规律与机制也作了一定的探索。材料和方法一、光敏剂AO,中国医药公司进口分装。以无菌生理盐水配制成0.5微克/毫升或0.01微克/毫升的工作液,室温下处理细胞6分钟后弃之,Hanks     

转化相关蛋白p86的鉴定

以转化细胞Rat3-3免疫大鼠,获得单克隆抗体E5(MeAb E5)。其对应抗原耐热,是分子量为86kD的蛋白质(P86)。它在c-Ha-ras癌基因转化的细胞上均有较高的阳性表达,而在其相应的非转化细胞上含量甚微。以人工合成的反义c-Ha-ras寡聚核苷酸As-Ⅱ处理Rat3-3细胞,该细胞生长受抑(44.2％),,此对p86的表达亦降低(39.1％)。P86在五种人胃癌细胞系中均有较高表达,在原发胃癌及其转移灶中阳性率达82.6％。p86不仅是一种与C-Ha-ras转化相关的蛋白,而且为胃癌相关抗原。     

生物素标记检测在基因探查中的应用

生物素标记检测技术用于分子杂交已有数年历史,并有很多成功的报道。其原理是用生物素标记的核酸探针进行分子杂交,尔后用免疫组化技术显示杂交结果。它具有快速、准确等优点,特别是避免了使用放射性同位索。它可用于细胞学、染色体及分子学标本,甚至石蜡切片。当然,此方法的灵敏度尚不及放射性探针,且常有本底过高。     

两个癌基因转化细胞系的建立

用BGC-ras~H和v-myc共转染第四代大鼠全胚细胞(REF),BGC-ras~H单独转染NIH3T3小鼠成纤维细胞分别获得两个恶性转化细胞系REF_(4-3)和BGC3T3。其中REF_(4-3)由一早代成纤维样细胞转化成为上皮样的、染色体高度界倍体化并可稳定传代的细胞。两种转化细胞均可接种裸鼠致瘤,成为二个用癌基因转化建立的细胞系。