芜菁花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用

先以芜菁花叶病毒（TuMV）免疫BAL B/C小鼠,然后取其脾细胞使之与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,获得4株能稳定传代并分泌抗TuMV单克隆抗体（Mab）的杂交瘤细胞,并以之制备腹水单抗。4株单克隆抗体腹水ELISA效价在10-5～10-6之间,仅对TuMV起特异性反应。Western blot分析表明,4株单抗都能与TuMV 34kD的外壳蛋白亚基起特异反应。利用TuMV的多抗兔血清和单抗腹水建立了三抗体夹心ELISA检测TuMV的方法,检测病叶的灵敏度为1∶5120倍,检测提纯TuMV病毒绝对量为21.9 ng。利用三抗体夹心ELISA测定出7种作物上有TuMV侵染。      

藤黄新酸抑制肝癌细胞生长的机制研究

在肿瘤细胞中蛋白酶体活性的抑制可以导致细胞凋亡和周期阻滞.藤黄新酸(TH2)是从中药藤黄中提取的一个新的(口山)酮类衍生物.研究结果显示,TH2可以抑制人肝癌Bel-7402细胞的增殖,诱导细胞产生凋亡,且呈浓度和时间依赖性.同时,10μmol/L的TH2与细胞作用24h后,可以导致早期凋亡标志性蛋白PARP发生裂解.在体外采用特异性荧光底物检测TH2对蛋白酶体活性的影响,发现该化合物能够抑制蛋白酶体的糜乳蛋白酶样、胰蛋白酶样活性和谷氨酰后水解活性.抑癌基因p53是细胞内的蛋白酶体降解底物,TH2可使p53蛋白的降解受到阻滞,表达增加.由此可见,TH2具有抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用,可能的分子机制与其抑制细胞内蛋白酶体活性、导致p53蛋白降解受阻有关.     

妊娠晚期孕妇血常规检查结果的临床分析

目的:探讨妊娠晚期妇女全血细胞指标的变化及其正常参考区间,并分析其临床意义.方法:采用日本Sysmex XE-2100血细胞分析仪检测314例妊娠晚期妇女和234例健康未孕妇女进行全血细胞参数,包括红细胞、血小板、血红蛋白、白细胞和中性粒细胞百分比,并比较两组之间各参数的差异.结果:正常妊娠晚期妇女中性粒细胞百分比和血红蛋白含量符合正态分布,白细胞、血小板、红细胞计数均不符合正态分布.其白细胞数、中性粒细胞百分比显著高于健康对照组;而血小板数、红细胞数、血红蛋白含量显著低于健康对照组,两组差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论:妊娠晚期妇女血常规各项指标与正常人的参考值相比均发生了显著变化,需要临床医生引起重视.     

Arrb1基因敲除对小鼠T淋巴细胞发育的影响

该文旨在研究Arrb1(β-arrestin1)基因敲除对小鼠T细胞发育的影响,进一步探讨急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphocytic leukemia,T-ALL)发病机制。该文使用q-PCR、Western blot分别检测Arrb1基因敲除的C57BL/6J小鼠中Arrb1的m RNA和蛋白质水平;流式细胞术检测Arrb1基因敲除小鼠及野生型小鼠的胸腺、外周血、淋巴结的T细胞比例。结果显示,与野生型相比,Arrb1基因敲除小鼠的胸腺CD4CD8双阴(double negative,DN)细胞比例明显增加,DN1期细胞比例增加最为显著(P0.05),而DN4期细胞比例减少(P0.05);CD4CD8双阳(double positive,DP)细胞比例显著减少(P0.05)。外周血CD4阳性T细胞比例减少(P0.05),淋巴结CD4阳性T细胞比例以及CD4/CD8阳性T细胞比值减少(P0.05)。研究结果证明,Arrb1基因敲除显著影响小鼠T细胞发育,使T细胞发育阻滞在DN期,从而可能成为影响T-ALL发病的重要因素。     

5种寄生蚌螨COI基因片段序列及系统发育分析

采用PCR技术对5种寄生蚌螨COI基因片段进行序列测定.序列分析的结果表明,比对后的序列总长度均为658 bp;其中A、G、C、T 4种碱基的平均含量分别为34.6%、20.2%、14.3%、30.9%,平均嘧啶含量（65.5%）明显高于嘌呤含量（34.5%）,说明碱基存在偏向性.弯弓蚌螨Unionicola arcuata与Y纹蚌螨U.ypsilophora 的种间遗传差异为26.4%,达到属间分类水平,结果支持Vidrine将沃蚌螨亚属从寄蚌螨亚属中分离的修订;螫爪蚌螨U.chelata与敏捷蚌螨U.agilex之间遗传差异为23.3%,达到属间分类水平,结果支持文春根等将敏捷蚌螨与其姊妹种腰蚌螨U.lumbaria放入韦蚌螨亚属中的修订.以营自由生活的厚蚌螨U.crassipes作为外类群,使用PAUP4.0b 10软件中的最大似然法（ML）和邻接法（NJ）构建系统树,结果显示：在5种寄生蚌螨中敏捷蚌螨可能是最早从祖先种分化出来的种;弯弓蚌螨与Y纹蚌螨可能起源于蚌螨属的同一个祖先.     

分子鉴定背瘤丽蚌中弯弓蚌螨的隐藏种

Unionicola sp.与弯弓蚌螨U.arcuata在形态结构上非常相似,为了鉴别弯弓蚌螨U.arcuata 和Unionicola sp.,本研究扩增出Unionicola sp.12S rRNA的部分基因片段,与基因数据库中5种寄生蚌螨序列进行比较分析.结果显示,Unionicola sp.与弯弓蚌螨U.arcuata遗传差异为0.145,而分子系统树表明,Unionicola sp.与弯弓蚌螨U.arcuata聚为一支,具较近的亲缘关系.我们推断Unionicola sp.是弯弓蚌螨U.arcuata的1个隐藏种.这可能是由于不同寄主蚌造成了宿主隔离,从而引起了蚌螨遗传基因的分化.     

贵州姑菁野生茶树形态多样性及相关性研究

以贵州省毕节市纳雍县姑菁村周边的野生茶树为研究对象,对其叶、花及果等34个表型性状进行统计分析,结果表明:21个描述型性状中有10个仅表现为1种表型,具有相对稳定的植物学性状,其他11个表现出不同程度的遗传分化。在数值型性状方面,变异系数在3.74%~21.86%之间,平均为15.10%;多样性指数在0.15~2.02之间,平均为1.62;基于数值型性状的聚类分析可把样本聚为3类,其中第Ⅱ、Ⅲ类均仅有3个样本,说明在后续进行农艺性状和品质性状鉴定以及对该资源保护与利用时应对该类的样株加以区分和重点关注;在环境影响方面,叶器官与果器官受到不同程度的海拔因素影响,表现出极显著相关以及分海拔区段间的差异性。姑菁野生茶树资源表型多样性丰富,后代遗传变异水平较高,具有较高的育种潜力。     

成年与老年大鼠耳蜗核胆碱乙酰化酶免疫组织化学研究

采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法,对成年（２～３月龄）和老年（２０～３６月龄）Ｗｉｓｔａｒ大鼠耳蜗核组织进行ＣｈＡＴ免疫组织化学显色,并利用计算机图像分析系统对免疫反应阳性细胞进行计数。观察老年大鼠耳蜗核组织胆碱乙酰化酶（ＣｈＡＴ）免疫反应的变化,研究其与老年性聋的发病关系。结果发现ＣｈＡＴ免疫反应阳性神经元主要散在分布于背侧核（ＤＣＮ）的梭型细胞层,老年大鼠耳蜗背侧核ＣｈＡＴ阳性细胞数目少于成年组（Ｐ＜０．００１）。实验结果提示,耳蜗核ＣｈＡＴ阳性细胞数目的减少可能与老年性聋的发病有关。     

水稻AT-hook基因家族生物信息学分析

AT-hook是一种小型的DNA结合蛋白基序, 在哺乳动物非组蛋白染色体的高移动组蛋白(HMG-I/Y)中首次发现。对其它生物的研究表明, AT-hook蛋白在染色质结构组装、靶细胞特异性结合、转录调控和生长发育的调控中发挥重要作用。利用生物信息学方法, 从水稻(Oryza sativa)基因组中鉴定出了45个编码AT-hook蛋白的基因, 并对这些基因的系统进化、染色体定位及其编码蛋白的结构和功能等进行了系统的生物信息学分析。结果表明, 水稻AT-hook蛋白的结构和特性分化不显著; 45个水稻AT-hook基因可划分成5个亚族; 染色体复制是基因家族成员扩增的进化途径之一。基因数字表达分析结果显示, AT-hook基因主要在水稻幼穗中表达, 并通过qRT-PCR验证了部分基因的数字表达结果。     

花烛离体培养叶色变异株系的相关性状

以花烛(Anthurium andraeanum)间接器官发生途径中再生出的一株花叶变异植株为原始材料, 进行增殖并对得到的3个叶色变异株系的叶色相关性状进行了初步研究。结果表明: 通过愈伤组织器官发生途径和腋芽增殖途径对这一花叶苗进行增殖, 均分离到3种变异株系, 即花叶苗、黄化苗和天鹅绒绿色叶片苗; 天鹅绒绿色苗叶片中的叶绿素含量比正常离体苗的含量低; 叶片解剖结构表明, 叶绿体在叶肉细胞中的分布与其叶片表现型相同, 天鹅绒绿色叶片与正常叶片在解剖结构上无明显差异。花烛原套只具有1层细胞, 无明显的L2层分生结构, 因此叶肉的薄壁细胞完全由向各个方向分裂的原体细胞发育而来, 这种组织结构导致花叶叶片中含有叶绿体的细胞和不含有叶绿体的薄壁细胞呈不规则分布。这种花叶株系可以作为育种材料或直接作为盆栽花烛进行推广。