中缝核提取液对体外培养的中脑黑质神经元存活和生长的影响

中脑黑质是中缝核５－ＨＴ神经元最早期的靶组织之一。为了分析神经元对其靶细胞的作用是受某种特异性蛋白或神经营养因子的影响,本文用中缝核提取液作用于体外培养的中脑黑质神经元,证明了该提取液能促进中脑黑质神经元的存活和生长,其活性部分是分子量大于３０ｋＤ的组份,经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,呈现一条主带,分子量在４３ｋＤ左右。     

大鼠大脑皮质星形胶质细胞条件培养液促进小脑皮质神经元的生长

本研究从大鼠大脑皮质分离、纯化星形胶质细胞,再经培养后收集星形胶质细胞的无血清条件培养液。用盖玻片培养法与快速自动比色微量分析法研究了星形胶质细胞条件培养液对小脑皮质神经元生存以及神经元活力的影响。发现星形胶质细胞条件培养液能够明显提高小脑皮质神经元的体外存活率,增强神经元的活力。表明星形胶质细胞具有神经营养性作用。     

巨噬细胞源性神经营养因子的纯化和鉴定

应用Sephacryl S-100-HR凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)和反相高效液相色谱(R-HPLC)分析,从巨噬细胞条件培养基中纯化了巨噬细胞源性神经营养因子(MΦDNF)。该因子在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现一条单一蛋白带,其分子量为60.5kD,等电点约5.1。其氨基酸组成含有较高比例的天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸。纯化的MΦDNF能支持体外培养的小脑皮质神经元的存活,增强其活性及促进神经元突起的生长。其最大效应浓度为500—1000ng/ml。     

巨噬细胞条件培养基对小脑皮质神经元生存的影响

用快速自动比色微量分析法检测巨噬细胞条件培养基(MφCM)对体外培养的生后7天SD大鼠小脑皮质神经元的作用。实验结果表明,MφCM具有支持神经元生存及增强其活性的作用。此作用以细胞密度1×10~5/孔,MφCM加入量10μl/孔为显著(P<0.05)。不同分子量的MφCM对神经元的作用亦有不同,>10KD分子量的MφCM比<10KD的作用强。