大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体的纯化

本文利用抗大鼠肝细胞内糖皮质激素受体的单克隆抗体制备的免疫亲和层析柱,将大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体纯化了约1150倍,SDS聚丙烯酰胺簿层梯度凝胶电泳显示,在约67kD处有一较明显的染色条带。     

人体肝癌细胞系(SMMC-7721)糖皮质激素受体的半衰期

用抑制蛋白质合成的方法,测定了人体肝癌细胞系(SMMC-7721)糖皮质激素受体(GCR)的半衰期。结果显示,在蛋白质合成被抑制79.30±3.69%的情况下,GCR的半衰期为3.5±0.3h,降解速度常数为0.200±0.017h~(-1)。如果正常细胞GCR也具有如此短的半衰期,则提示GCR对内外环境的变化可做出迅速的反应,可能在靶细胞对激素反应的调节中起着活跃的作用。     

大鼠脑突触质膜糖皮质激素结合位点的等电点测定

利用离子交换层析法测定了大鼠脑突触质膜糖皮质激素结合位点的等电点,结果表明,膜糖皮质激素结合位点的等电点为5.5,与细胞内糖皮质激素受体的等电点(pI6.7)不同。     

小鼠脾细胞糖皮质激素受体的鉴定及其半衰期的测定

用[~3H]Dex作为配体,证实小鼠游离脾细胞有[~3H]Dex特异结合部位,该部位有低容量(表观结合容量为10.70±2.35 fmol/10~6个细胞)、高亲和力(表观平衡解离常数为6.37±1.97 nM)、甾体结合特异性等特点,具备了作为GCR的基本判据。用CYCLO抑制蛋白合成的方法,测定了该GCR的半衰期。在蛋白质合成被抑制70%的情况下,GCR的半衰期为1.6±0.5h,降解速度常数为0.455±0.132h~(-1),表明GCR是代谢活跃的蛋白质,提示GCR不仅是激素信息的接受者和传递者,而且可能是激素反应的调节者。     

一种改进的神经突触膜制备方法

介绍一种改进的神经突触膜(SPM)的制备方法.采用此方法,可简化制备过程,缩短制备时间,提高 SPM 产率,特别是可以完全排除胞液对 SPM 制备物的污染.     

甲酰寡肽引发的外周血白细胞的化学发光

在有发光剂鲁米诺存在的条件下,甲酰寡肽可以引起外周血白细胞的化学发光反应,其强度依赖于甲酰寡肽和鲁米诺的浓度,其动力学随测定时温育温度的不同而呈单峰型或双峰型。     

猪脑突触质膜糖皮质激素膜结合位点的测定

利用放射配体结合法,测定了猪脑六个不同脑区突触质膜糖皮质激素膜结合位点(GCM-BS)的最大结合量(Bmax)和平衡解离常数(Kd)。结果表明:猪的大脑、小脑、中脑、丘脑、下丘脑和尾状核的突触质膜GCMBS的Kd都在200nmol/L左右,提示它们对[~3H]皮质酮的亲和力基本相同;而各脑区内GCMBS的Bmax相差较大,从218.98fmol/mg蛋白至486.95fmol/mg蛋白不等,说明不同脑区内所含有的GCMBS的数量不同。     

猪大脑皮层突触质膜糖皮质激素结合位点的测定

利用放射配体结合测定法,测得猪大脑皮层突触质膜上存在有皮质酮特异结合位点,该皮质酮膜结合位点的最大结合量（Ｂｍａｘ）为３３１．８±３６．９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白,平衡解离常数（Ｋｄ）为１８５．０±６２．７ｎｍｏｌ／Ｌ。竞争取代实验表明,它具有较高的甾体结合特异性,按亲和力大小排列为：皮质酮＞孕酮＞１７β－雌二醇≈醛固酮＞睾酮。