大肠杆菌AS1.357 L-天门冬酰胺酶的选择性化学修饰

用九种化学修饰剂研究了大肠杆菌AS1.357 L-天门冬酰胺酶分子中的五种不同氨基酸侧链基团与催化活性的关系。结果说明,渡酶活力与硫氧墓完全无关;与色氨酸、精氨酸和组氨酸亦无直接联系;而酪氨酸残基和羧基的修饰引起酶活力急剧下降。其中酪氢酸残基巳被证实是该酶活力的必需基团,处于该酶分子的活性部位。     

抗噬菌体的产L-天冬酰胺酶的生产菌

L-天冬酰胺酶是有效的抗白血病药物,大肠杆菌AS 1.357是该酶的高产菌株,早在1973年已鉴定投产。但因设备、环境等原因。近年噬菌体为患严重。从生产车间的典型环境中分离得到七个噬菌体样品。对E.coil AS1.357均有强烈的感染力。图1示该菌平板培养     

发酵饲料中微生物的调查

随着发酵饲料的推广应用,不少科技工作者进行过饲养对比试验和化学分析,了解到用各种曲种和发酵方法制成的发酵饲料,饲养效果各有高低。而且原料在发酵前后的主要化学     

关于大肠杆菌L-天冬酰胺酶亚基的研究

单个L-天冬酰胺酶分子由四个相同的亚基组成,亚基分子量37,000道尔顿,电镜下可见四个球形亚基形成一个中间有小孔的平面,它们有一致的一级结构。用固定化亚基技术证实:亚基单独存在不表现催化能力,但固定化亚基具有“检起”可溶性初生亚基的能力,重组成寡聚的固定化酶之后酶活力恢复。     

北京棒状杆菌AS1.299谷氨酰胺合成酶的提纯和性质

用热变性、硫酸铵分段沉淀和DEAE纤维素柱层析部分纯化了北京棒状杆菌AS1.299(Corynebacterium pekinense)谷氨酰胺合成酶,并用垂直平板电泳对酶进一步精制。酶对谷氨酰胺的Km值为16.4mM,对羟胺的Km值为43.5mM;酶的沉降系数为21S,SDS凝胶电泳测得酶的亚基分子量为56,000。化学修饰表明,该酶活力与硫氢基、色氨酸、精氨酸残基无关;酪氨酸修饰剂的作用引起酶活力下降,初步证明,组氨酸残基是该酶活力的必需基因。     

北京棒状杆菌AS1.299谷氨酰胺合成酶活力调节的研究

北京棒状杆菌(Corynebacterium pekinense AS1.299)谷氨酰胺合成酶的转移酶活性依赖于Mn~(++),酶的生物合成酶活性依赖于Mg~(++),其他二价金属离子只能部分代替Mn~(++)和Mg~(++)的作用。Mn~(++)对ATP或ADP的克分子比对酶活力起调节作用。ATP、CTP,丙氨酸和甘氨酸对谷氨酰胺合成酶有较强的抑制作用;丝氨酸、谷氨酸和6-磷酸葡萄糖胺对酶活力的抑制作用分别是24,15和21％。效应物混合物对酶的作用被证明是累积性的抑制作用。     

用同位素竞争技术研究与L-天门冬酰胺酶相关的代谢产物

同位素竞争(isotopic competition)技术是揭示各种代谢产物相关性的有效而便捷的手段。Roberts等曾报告借助这一方法考查野生型大肠杆菌氨基酸生物合成的途径。该研究技术基于以下原理:在以~14C-葡萄糖为唯一碳源的培养基上培养微生物,放射性~(14)C将分布于微生物体的各种氨基酸中。倘若同时把某已