恒河猴(Macaca mulatta)转移因子的研究 Ⅰ转移对结素和破类延迟超敏反应到人的实验研究

将对结素和破类呈现阳性皮肤延迟超敏反应的恒河猴的淋巴结和脾脏剪碎,匀浆,过滤和高速离心,以葡聚糖G25凝胶过滤分离成6个组分。只有组分Ⅳ不仅能将皮肤延迟超敏反应在同种异体之间转移,而且能从恒河猴转移到人。不管TF供体和培养淋巴细胞供体对抗原的应答如何,所有组分均有增强SK—SD刺激淋巴细胞转化作用,组分Ⅲ和Ⅳ的混合物作用最强。组分Ⅲ和Ⅳ对人的淋巴细胞亦有类似的作用。因此,恒河猴TF增强抗原刺激淋巴细胞转化的作用是没有抗原特异性和种属特异性的。 初步的生化分析表明,组分Ⅳ含有RNA,多肽和次黄嘌呤,薄层色谱有2个254nm紫外光吸收成分和2个节三酮显色成分,等电点聚焦电泳时出现17条考马斯兰R250着色带。 这些结果说明,有可能用恒河猴制备某些人类疾病的特异性TF。     

灵长类淋巴细胞亚群的研究——Ⅰ.外周血和淋巴组织的SRBC、SMRBC和ZYC玫瑰花结形成细胞的测定

用经过氨乙基异硫脲(AET)或神经氨酸酶(VCN)处理过的绵羊红细胞(SRBC),酵母多糖—补体复合物(ZYC)和红面猴红细胞(SMRBC)作为标记,测定了健康恒河猴、熊猴、豚尾猴、红面猴和树鼩的外周血以及恒河猴淋巴样组织的淋巴细胞亚群,在这五种动物中,E_(AET)玫瑰花结形成细胞的百分比依次为78.1±6.4,77.7±4.2,76.0±6.4,82和24.9±7.2。ZYC形成细胞的百分比依次为11.4±4.2,9.0±3.8,12.8±2.2,15和15.7±7.4。恒河猴胸腺,脾脏和淋巴结的E_(AET)形成细胞的百分比分别为95.2±2.9,28.8±10.3,44.8±6.2。与人类不同,SMRBC不是恒河猴B淋巴细胞的标记。此外,还与其他作者的结果进行了比较。     

HSF2 mRNA在热应激和大剂量11酸睾酮诱导恒河猴生精细胞凋亡中的表达变化

为了探讨HSF2 mRNA在热应激和超生理剂量睾酮诱导恒河猴生精细胞凋亡中的表达变化,我们建立了手术诱导单侧隐睾和注射大剂量11酸睾酮（TU）恒河猴动物模型,应用3′末端标记分析（TUNEL）和原位杂交方法,检测睾丸细胞的凋亡信号和HSF2的表达变化。TUNEL结果显示热应激和超生理剂量睾酮能够诱导生精细胞出现凋亡信号,它分别于处理后第5天和第30天达到最强,表明热应激和睾酮干扰精子发生可能是通过生精细胞凋亡的方式来实现的。HSF2 mRNA水平在生精细胞凋亡早期（凋亡信号达到最强以前）略有降低,而在凋亡高峰期之后其表达急剧下降。Hsf2基因与我们以前研究的Hsp70-2基因的表达具有时间上的相关性,表明HSF2蛋白可能调控Hsp70-2基因的表达,而且HSF2可能通过多种方式影响精子的发生以及抑制生精细胞的凋亡。     

P16蛋白和生精细胞凋亡对热压和11酸睾酮诱导的恒河猴无精子症和少精子症中的作用

探讨了P16蛋白和生精细胞凋亡在热压和11酸睾酮诱导恒河猴无精子症和少精子症中作用间的关系。3′末端标记分析（TUNEL）结果显示热应激和超生理剂量睾酮能够诱导生精细胞出现凋亡信号,它分别于处理后第5天和第30天达到最强,免疫组化结果显示,热压或TU主要诱导精原细胞和其它生精细胞以及Sertoli细胞P16的表达。P16蛋白的表达在生精细胞凋亡晚期,即隐睾手术第10天或注射TU第60天后迅速升高并维持在热压或11酸睾酮诱导的早期精母细胞和精子细胞的凋亡和在晚期对精原细胞有丝分裂的抑制,二者共同作用导致热压或TU诱导的恒河猴无精子症和少精子症。     

恒河猴(Macaca mulatta)生殖周期内性类固醇激素分泌规律的研究

本文用放射免疫测定法对7只雌性恒河猴(Macaca mulatta)的20个月经周期进行了雌二醇,孕酮和睾酮的动态测定分析,其中15个月经周期的中期都有睾酮和雌二酮峰(其峰值分别为1010.7±0.65ng/ml. 正常黄体期的血清孕酮水平不低于1ng/ml. 20个月经周期的平均天数为28.6±5.4天, 滤泡期和黄体期分别为11.9±2.6和19.2±6.3天. 月经周期可用公式Y=18.92±0.03×X²(Y:月经周期,X: 黄体期. R=0.9444)表示.实验结果表明, 测定周期内三种性类固醇激素可以准确确定排卵.睾酮在生殖受气内的分泌调节机制还待进一步研究.     

促性腺激素诱导猕猴排卵周期中卵巢纤溶酶原激活因子与抑制因子的变化

在用 PMSG 和 hUG 诱导猕猴排卵过程中,我们研究了 pA 和它的抑制因子 PAI-1与排卵的关系。实验结果表明,由促性腺激素所诱导出的卵巢 tPA 活性的增加与排卵密切相关,在排卵前达到高峰,而排卵后明显下降;uPA 只在排卵后的颗粒细胞大量出现;PAI-1分泌高峰比 tPA 峰值早出现12—24小时;排卵来临时,tPA 的明显上升导致 PAl-1的空然下降。上述实验结果说明,卵巢中 tPA 和 PAI-1活性的这种平衡性的变化可能在排卵机制和维持卵巢的正常生理功能中起重要作用,而 uPA 或许与黄体形成的调节有某些关系。     

恒河猴睾丸内激素调控的离体研究 I.恒河猴睾丸Leydig细胞的离体培养及激素分泌的研究

为了研究恒河猴睾丸的激素分泌及其调节作用,作者发展了一种简便分离睾丸Ｌｅｙｄｉｇ细胞和用无血清培养的实验模型,研究了人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）、恒河猴绒毛膜促性腺激素（ｍＣＧ）、环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）、Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ和雌二醇（Ｅ２）对睾丸Ｌｅｙｄｉｇ细胞激素分泌的影响。结果显示离体的Ｌｅｙｄｉｇ细胞对低剂量同源的ｍＣＧ和异源的ｈＣＧ产生睾酮都有依赖反应,而高剂量的前者对Ｌｅｙｄｉｇ细胞分泌睾酮有明显的抑制作用,后者不出现反向调节;ｃＡＭＰ和Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ对Ｌｅｙｄｉｇ细胞分泌睾酮有刺激作用;雌二醇具有明显抑制ｈＣＧ和ｍＣＧ促睾丸分泌的作用     

糖在猕猴精子低温冷冻保存过程中的作用

TTE或TEST防冻液在冻存猕猴精子时产生不同结果,其主要不同在于防冻液中糖成分的不同。本实验利用透射电镜技术检测这2种防冻液冻存的猕猴精子冷冻前后超微结构的变化,以说明糖在低温冻存过程中的作用。结果表明,冷冻复苏过程对精子结构产生了影响。TTE法低浊保存的猕猴精子的头部的质膜出现少许皱褶或泡化现象,但精子的顶体、核或是精子尾部的结构与鲜精的结构基本相似。猕猴精子经TEST法低温保存后,大部分精子结构则发生了明显的变化。精子膜、顶体和精子核明显泡化、损伤或破裂,精子尾部不能分辨出正常的超微结构。这提示,可能由于TTE防冻液中复杂的糖成分在降温／复苏过程对精子起到了较好的协同冷冻保护作用;而TEST防冻液中单一的糖成分不能完全保护精子避免低温损伤,低温保存过程破坏了精子的结构,并影响了复苏后精子体外存活能力与受精能力。     

懒猴能量需求的研究

本文报道了懒猴(Nycticebus coucang bengalensis)能量需求的研究结果。三组成年懒猴(共14只)用饭、猕猴配合饲料、小鼠、面包虫和香蕉分别组合的饲料饲喂。实验日期共17天(其中预试期11天,试验期6天)。三组成年懒猴日均摄入量能值分别为210.1 9KJ/KG,177.222KJ/KG和161.608 KJ/KG;日均消化能分别为191.89 KJ/KG,155.131KJ/KG和146.783 KJ/KG。据统计学方差及t测验分析表明:Ⅰ—Ⅱ组之间和Ⅰ—Ⅲ组之间的日均摄食量能值及日均消化能均有显著性差异。实验结果表明:Ⅰ组所饲喂的配合饲料的组成优于Ⅱ、Ⅲ组并可做为懒猴的长期用配方。     

恒河猴(Macaca mulatta)生殖周期内性类固醇激素分泌规律的研究

本文用放射免疫测定法对7只雌性恒河猴(Macaca mulatta)的20个月经周期进行了雌二醇、孕酮和睾酮的动态测定分析,其中15个月经周期的中期都有睾酮和雌二醇峰(其峰值分别为1010.7±411.3pg/ml和179.1±91.3pg/ml),孕酮在黄体期的峰值为2.54±0.65ng/ml。正常黄体期的血清孕酮水平不低于1ng/ml。20个月经周期的平均天数为28.6±5.4天,滤泡期和黄体期分别为11.9±2,6和19.2±6.3天。月经周期可用公式Y=18.92±0.03×X~2 (Y:月经周期,X:黄体期。R=0.9444)表示。实验结果表明,测定周期内三种性类固醇激素可以准确确定排卵。睾酮在生殖周期内的分泌调节机制还待进一步研究。