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重组痘苗病毒表达乙肝核心抗原基因的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
pMM2066质粒EcoR I酶切回收ATG前只有12bp的乙肝核心抗原基因片段,将此基因片段插入痘苗转移载体pGJP-5的P7．5启动子后,组建成P5-C2066质粒,通过细胞内同源重组技术,于BudR存在条件下用人TK-143细胞筛选出三株能表达HBcAg的重组痘苗病毒株。感染细胞上清液1：64稀释时仍能用ELISA法测到HBcAg活性,同时也能测到滴度相近的HBeAg活性。免疫电镜可见平均为26．6nm的HBcAg颗粒。进行了不同量的重组痘苗病毒感染不同细胞,和不同培养温度对HBcAg表达影响的观察。 相似文献
2.
毒素源性大肠杆菌(ETEC）是可以引起幼畜腹泻
的致病菌,此类菌具有对宿主特异的起粘附定居作用
的菌毛,还有直接引起腹泻的肠毒素,目前已发现对热
敏感的肠毒素LT和对热稳定的肠毒素ST。在临床
中经常分离到的带有K88菌毛抗原的致病菌主要是
引起新生仔猪的急性腹泻,其发病、流行都比较快,是
新生仔猪死亡的一个重要原因,给畜牧业造成极大的
危害〔‘’。本实验室经过几年的研究,已经构建了具有
K88ac菌毛抗原和LT肠毒素B亚单位抗原的无毒菌
株,并已作为疫苗菌株应用于畜牧业中。但是考虑到
自然界野生型菌株生命力强,还具有多种不同的。抗
原,所以发展口服免疫的活菌苗有必要考虑上述因素。
这样当孕猪口服免疫活菌苗后,即可以产生更好的免
疫应答,刺激细胞和体液免疫系统,产生保护性伉体,
通过初乳给新生仔猪提供保护。本实验利用我们构建
的带有K88ac抗原和LT=B抗原基因的PMM085质
粒（待发表于生物工程学报,1987,和一株带有0149
抗原和K88ac抗原的野生型菌株,在用常规的Ca'十
处理受体菌转化未获成功后,又利用PEG诱导的原
生质体转化方法,把质粒PMM085转化到上述带有
014,抗原基因的野生型菌中,得到了带有K88ac,LT-B
和014,抗原基因的无毒菌株。可望此菌株能更好地
模仿自然感染致病菌株,在免疫中产生更好的预Vi作
用。 相似文献
3.
用猪心t-PA和人黑色素瘤细胞分泌的t-PA作抗原,经腹腔及脾内免疫Bal b/c小鼠。用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,细胞融合串达85％,获得4株抗t-PA杂交瘤细胞株,鼠腹水抗体效价达1∶10~5;Western Blot结果表明该单抗所结合的抗原分子量与t-PA相符,证明所获得的单抗为特异的抗t-PA单抗;对t-PA的纤溶活性中和抑制试验结果表明,4株单抗中的1株能完全抑制st-PA的纤溶活性,另外3株表现出程度不等的抑制;其中1株亚类为IgG,另外3株为IgM。杂交瘤细胞株无支原体污染;染色体数目正常。对该抗体进行初步纯化后,将其应用于rt-PA的研究中。 相似文献
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