Ⅲ届欧洲细胞生物学会议简介

由欧洲细胞生物学联盟(EOCB)举办的第三届欧洲细胞生物学会议于1990年9月2日至9月7日在意大利著名城市弗罗伦萨举行。这是一次大规模,高水平的细胞生物学会议。这次会议吸引了来自欧洲各国的学者及来自亚洲国家,美国,加拿大,澳大利亚,南美及一些非洲国家的科学工作者共1600多人,其中相当多的国际著名细胞生物学家。会议共印发了1200多篇论文摘要,有200个专题报告在会上进行了交流。北京大学翟中和教授与兰州大学贾敬芬教授由国家教委委派参加了会议,翟中和应邀在     

抗氧化剂对苜蓿原生质体早期培养的影响

研究发现,分离原生质体的酶解脱壁处理可以诱导苜蓿细胞产生活性氧。培养基中添加抗氧化剂,有助于提高培养原生质体的分裂频率,缓解褐化现象的出现。经紫外照射处理的培养基不利于苜蓿原生质体的生长和分裂,添加抗氧化剂后,紫外辐射所引起的不良效应则被抵消。因而,通过抗氧化剂对活性氧的清除,有助于早期原生质体的培养。     

怀地黄ISSR扩增条件优化的研究

用CTAB法提取怀地黄嫩叶DNA,进行简单重复间序列标记(ISSR)分析.通过单因子实验分别研究了退火温度、Taq酶单位、Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR反应的影响,找出各自的合适条件,而且每一个合适条件确定以后都被作为后续研究的一个条件.通过各个因子的组合研究建立了适宜于怀地黄ISSR分析的扩增体系25 μL PCR反应体积,1×Taq DNA酶缓冲液(10 mmol/L Tris-HCl,50 mmol/L KCl,0.1% Trion X-100,pH9.0 ),2.5 mmol/L MgCl2,1.5～1.0 U Taq酶,60 ng模板DNA,0.4 μmmol/L引物,各0.4 mmol/L的dATP、dGTP、dCTP和dTTP.合适的退火温度为53～55℃.为用ISSR技术分析鉴定怀地黄种质资源奠定了良好的基础.     

草木樨状黄芪变异系中甲硫氨酸代谢相关cDNA的分子克隆及其在大肠杆菌中的表达

利用mRNA差异显示技术(differential display)从草木樨状黄芪耐甲硫氨酸变异系中分离到一差异cDNA片段,命名为tm03(360bp)。mRNA杂交结果显示,该片段只在变异苗中表达,初步确定其与甲硫氨酸代谢相关。测序后在Genebank搜寻,未发现有同源序列。进一步分析表明,该cDNA克隆可编码完整的蛋白。在该基因片段两端分别合成含HindⅡ和BamH Ⅰ酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到pRSET A表达载体,转化宿主菌JMl09(DE3),经IPTG诱导表达了N′端含6个组氨酸的蛋白质,分子量约为14kD,为进一步研究该蛋白的结构和生物学功能奠定基础。     

亚麻遗传转化体系的建立及几丁质酶基因导入的研究

报道了亚麻遗传转化体系的建立和几丁质酶基因对亚麻遗传转化的研究。亚麻下胚轴切段培养在不同激素浓度的ＭＳ培养基上,诱导分化出不定芽。最佳的激素组合是ＭＳ＋ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ,分化频率可达９７％。亚麻的下胚轴经带有几丁质 根癌农杆菌感染后,在含有１００ｍｇ／Ｌ卡那霉素的选择分化培养基上,１４￣２１ｄ就能产生抗生小芽,小芽进一步伸长后可在１００ｍｇ／Ｌ卡那霉素的ＭＳ选择生根培养基（ＭＳ     

发根农杆菌A4菌株转化苜蓿悬浮培养物

将苜蓿无菌苗下胚轴切割后,在附加2mg／L 2,4-D的MS培养基上诱导愈伤组织。愈伤组织在附加O．5mg／L 2,4-D的SH培养基中悬浮培养。悬浮培养物在用于转化之前,用0．45mol/L甘露醇处理1h．然后用O．16mol/L CaCl₂．2H₂O洗涤两次。预处理后的悬浮培养物用SH培养基悬浮(10ml／g悬浮培养物),再加O．2ml农杆菌悬浮液,于25±2℃共培养2d。共培养的悬浮培养物洗涤后在附加0．5mg／L羧苄青霉索的无激素培养基上选择培养。悬浮培养天数、悬浮培养基激素组成和选择培养基种类明显影响转化频率。纸电泳分折表明70％的转化体可以台成农杆碱和甘露碱。染色体观察显示转化组织细胞存在严重的数目和结构变异。     

农杆菌转化的植物细胞的若干特性

根癌农杆菌的质粒基因组中T-DNA在宿主细胞中的表达导致转化细胞具有以下特性:激素自主性生长、冠瘿碱合成、器官发生异常、特殊糖类的利用以及对某些氨基酸和碱基类似物具抗性等。深入揭示和认识这些特性有利于探讨外源基因在受体细胞中的表达与调控。     

沙打旺胚性原生质体培养优化及高频再生植株

外植体类型和光照条件决定沙打旺胚性愈伤组织的形成。用生长10d的胚性愈伤组织可分离到1.2×10⁶个/g(原生质体/细胞),活力超过80%。当原生质体以1.0×10⁵/mL的植板密度培养在含0.6%琼脂糖附加1.5mg/L 2,4-D、0.5mg/L BA和0.5mol/L葡萄糖的培养基(无机盐降为1/4)中,植板率为16.8%。条件培养基显著促进原生质体的生长发育。长大的细胞克隆经2周4℃低温处理后转到含0.1mg/L NAA和1.0mg/L BA分化培养基上,体细胞胚胎发生频率高达70%,每克细胞产生的体细胞胚数在200个以上。成熟的体细胞胚转到无激素的1/2MS培养基中即分化成苗,再生植株为正常的二倍体。     

3种发根农杆菌A4转化系毛根的细胞学观察及同工酶酶谱分析

利用根尖压片法对可再生型发根农杆菌A4转化系毛根和不可再生型转化系毛根进行了染色体计数,并利用聚丙稀酰胺凝胶电泳法对其进行过氧化物酶(POD)、细胞色素氧化酶(COD)、酯酶(EST)的同工酶酶谱分析。结果表明：(1)染色体丢失现象在转化的毛根根尖中是普遍存在的,不可再生转化系与可再生转化系相比,染色体丢失比例显著增多;(2)不可再生转化系的POD和COD同工酶酶谱变化较可再生转化系的变化大,且EST含量明显低于可再生转化系。     

毛脉蓼的离体培养

1植物名称毛脉蓼[Polygonum ciliinerve（Nakai）Ohwi]。 2材料类别幼叶和茎段。 3培养条件基本培养基为MS。愈伤组织诱导培养基：（1）MS＋2,4-D1．0mg·L^-1（单位下同）＋6-BAO．5;（2）MS＋2,4-D2．0＋6-BA0．5。芽分化培养基：（3）MS＋6-BA2．0＋NAA0．1;（4）MS＋6-BA1．0＋NAA0．1;