花生根瘤菌抗药性菌株的选育

花生接种根瘤菌有明显的增产效果,但是在老种植区,由于土壤中存有大量的根瘤菌,人工接菌效果不佳。解决这个问题的关键是选育竞争力与感染力强和固氮效率高的菌株。本文主要报道,用抗药标记法选育优良菌株和鉴定人工接种效果。     

牛病毒性腹泻病毒P125基因重要区的比较与分析

牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)为黄病毒科瘟病毒属中的成员。根据在细胞培养物中是否产生病变,可将BVDV分为致细胞病变(CP)和非致细胞病变     

山羊（Capra hircus）重构胚与再重构胚早期发育的研究

选择山羊９细胞期到桑椹胚期的正常胚胎或重构胚的卵裂球,或选择胚泡期胚胎的内细胞团细胞作为供核,并以ＬＲＨ注射后２６－２８ｈ的去核成熟卵球作为受体,制备重构胚或再重构胚,琼脂糖包埋,植入山羊输卵管内,体内培养４－６天发育结果表明：不同发育时期（８细胞期至胚泡期）的正常胚胎细胞核或重构胚细胞核中,至少有部分细胞核均保留着发育的全能性;这些细胞核在母系基因表达产物的调控下,实现＝重新编程,启动并完成正常     

鹅细小病毒和番鸭细小病毒核酸疫苗重组质粒的构建及表达

将鹅细小病毒（GPV）和番鸭细小病毒（MPV）主要结构蛋白（VP2－VP3）基因克隆到核酸疫苗质粒pIRESlneo载体上,构建了核酸疫苗重组质粒pIGVP1和pIMVP,通过脂质体转染法分别将重组质粒到鹅胚成纤维细胞和番鸭胚成纤维细胞中,核酸疫苗重组质粒pIGVP1和pIMVP分别转染鹅胚成纤维细胞和番鸭成纤维细胞中,于转染后72h收取细胞,细胞裂解液裂解后,经Western blot检测其表达产物可出现特异性反应带,证明表达产物具有很好的反应原性。     

鹅细小病毒长春分离株主要结构蛋白(VP2-VP3)基因的原核表达

根据国外巳发表的鹅细小病毒（GPV）A株基因组核苷酸序列,设计并合成了一对用于GPV主要结构蛋白（VP2-VP3）基因表达的引物。利用合成的引物,扩增并鉴定了GPV中国长春株（GPV CC株）的VP2-VP3基因。将扩增的目的的基因插入到原核表达载体pET28(a)的多克隆位点,构建了表达GPV,VP2-VP3基因的原核载体pEGVP1。重组表达载体质粒转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测到大小分别为75000和58000的表达蛋白带。Western blot分析表明,表达产物具有很好的特异性。     

甘海胃康胶囊治疗慢性浅表性胃炎的临床疗效分析

目的:探讨甘海胃康胶囊治疗慢性浅表性胃炎的临床疗效。方法:选择2013年3月到2015年3月我院消化内科收治的慢性浅表性胃炎患者128例,根据随机抽签法分为治疗组与对照组各64例,对照组服用多潘立酮片治疗,治疗组在对照组基础上给予甘海胃康胶囊,两组均治疗4周。之后对两组治疗效果,中医评分及生活质量评分情况进行考察。结果:治疗组总有效率为96.9%,对照组总有效率为84.4%,治疗组明显高于对照组(P0.05)。治疗后治疗组与对照组的中医评分分别为2.19±1.11分和5.09±1.56分,都明显低于治疗前的17.34±1.34分和17.39±1.45分(P0.05),同时组间对比差异明显(P0.05)。治疗后治疗组的生理功能、总体健康、生理职能、社会职能、生命活力、情感职能与精神健康明显高于对照组(P0.05)。结论:甘海胃康胶囊治疗慢性浅表性胃炎能有效缓解临床症状,提高治疗疗效,有利于患者生活质量的改善,值得推广应用。     

L-苏氨酸产生菌的选育

以亚硝基胍(MNNG)诱变处理大肠杆菌ASI．358,获得蛋氨酸缺陷型(Met-)突变株,从中得到一株B2851菌,能在培养基中积累少量苏氨酸。通过连续诱变,得K1-73菌株(Met-),在5％葡萄糖与DL-蛋氨酸舔加量为75mg／l的条件下,能够积累3．5mg／ml L-苏氨酸。同样以MNNG诱变处理钝齿棒状杆菌C. crtenalum ASI．542,获得抗a一氨基一β一羟基戊酸(AHV)突变株1770林,其中6％菌株能够积累少量苏氨酸。选得LR—1458菌产L一苏氨酸(1mg／ml。 对该菌逐步诱变,得一株抗8mg／ml AHV及蛋氨酸缺陷型双重突变株(AHV,Mer) LRA-96,其L一苏氨酸产率与亲株比较有明显提高,达3．5mg／ml。连续再诱变并结合单菌落分离选育,得一突变株m一85(AHV,Met-),能在培养基中积累13mg／ml L-苏氨酸。试验表明,连续诱变处理是选育L一苏氨酸高产菌株有效手段之一。     

疏花水柏枝内生真菌QY-1的抗氧化活性分析

以从疏花水柏枝(Myricaria laxiflora)中分离的1株内生真菌QY-1为研究对象,为分析其体内及体外的抗氧化活性,对其发酵液及其提取物的活性进行了综合评价。对nr DNA内转录间隔区进行测序鉴定。分别采用总抗氧化力试剂盒、自由基清除试剂盒和还原力测定试剂盒评价发酵液及粗提物的体外抗氧化能力活性;对发酵液提取物及其主成分进行了大肠埃希菌、人神经母瘤细胞SH-SY5Y的体内抗氧化损伤保护作用分析。结果表明QY-1是1株球毛壳菌(Chaetomium globosum),其粗提物具有很高的抗氧化活性,总抗氧化活力、自由基清除率及总还原力均接近维生素C的50%,远高于国际报道水平。且其发酵液提取物有促进细胞增殖和抗氧化保护作用,显著提高大肠埃希菌细胞和神经细胞在H2O2胁迫下的存活率。其粗提物可保护神经细胞膜的完整性,有效减低乳酸脱氢酶(LDH)的渗漏率。从粗提物中分离到一种主成分SF2,可显著抑制凋亡蛋白Caspase 3和Caspase 9的活性。结果表明内生真菌球毛壳菌QY-1不管在体内还是体外都具备较强的抗氧化能力,是一种具有潜在开发价值的天然抗氧化剂资源。     

体内和体外评价法分析内生真菌粗提取物的抗氧化活性

对几株经初筛具较高抗氧化活性的疏花水柏枝的内生真菌展开研究,在体内和体外两种方法下分析了其抗氧化能力。本研究选择1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法、总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒和铁氰化钾还原力测定法来评价内生真菌的体外抗氧化活性,并对不同方法进行了比较分析;建立并优化了大肠杆菌的氧化损伤模型,并将内生真菌对其保护作用与对人神经母瘤细胞SH-SY5Y的氧化损伤保护作用进行比较,分析了不同内生真菌在体内的抗氧化活性。结果表明体内和体外的抗氧化分析方法存在一定偏差,体外分析中活性最高的菌株是SJ-12和QY-1,体内分析中对大肠杆菌抗氧化保护效果最好的菌株也是QY-1和SJ-12,但对神经细胞保护效果最好的菌株是QY-1和MG-9。综合几种方法,本实验证明了内生真菌QY-1及其发酵产物具较强的抗氧化活性,可以作为潜在的新型抗氧化剂开发利用。     

R质粒对大肠杆菌L-天门冬酰胺酶活力的影响

对含有不同R质粒的6株大肠杆菌J53和不含质粒的大肠杆菌J53所产生的L-天门冬酰教酶的活力进行了比较,前者的L-天门冬酰胺酶活力比后者的降低了约1/2—3/4。消除大肠杆菌J53细胞中的R质粒后,L-天门冬酰胺酶活力明显增加并与不含质粒的大肠杆菌J53的相近。结果表明,在大肠杆菌内存在的R质粒对寄主的L-天门冬酰胺酶活力具有明显的抑制作用。