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大伙房水库是我国大型水库之一,位于沈阳、抚顺两个大城市东部。最大库容达2.1×10~9m~3,是沈阳、抚顺两市人民生活用水主要水源之一。水库上游三条主要入库河流(浑河、苏子河和社河)流经清原、新宾、抚顺三县。这三条河的河水较浅,水生生物资源比较丰富。通过对其中水生植物的生态特征和生物效应分析,旨在探讨污染对水生植物群落结构 相似文献
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棕色固氮菌nifS敲除菌株的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
从Azotobacter vinelandii中通过PCR扩增了5’和3’端分别缺失264bp和261bp的nifS'片段,克隆至载体pUCl8,形成重组质粒pUCS,再通过同源重组的方法,将pUCS插入Azotobacter vinelandii的nifS中,形成够阻断突变体SUl,经Southern杂交和:PCR扩增,证明所得确为nifS阻断突变株。SUl在外加氮源的BBGN培养基中能够快速生长,但在Burk's无氮培养基中,生长却极其缓慢,表明,nifS基因的破坏,已造成SU1的固氮能力接近完全丧失。该突变体的成功构建,为进一步从中纯化固氮酶两组分,研究nifS对固氮酶结构及功能的影响及iscS与nifS之间的关系奠定了良好的基础。 相似文献
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在人体解剖性理学的教学中,对动物进行观察的问题,早就引起我的兴趣。几年来,我在阐明И.П巴甫洛夫条件反射学说时,就用兔子做实验。 相似文献
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通过酶学手段在β-内酰胺酶启动子间隔序列中造成C-17的缺失突变,以氨苄青霉素为底物,检测突变前后β-内酰胺酶活力变化,并作了细菌的Amp耐受性试验,实验结果表明,C-17的缺失突变使启动子强度增加约60%,含有突变启动子的细菌对Amp的抗性明显增强,突变体生长的半抑制浓度为280μg/ml,而在此浓度下野生型菌体吸光度只有突变体的50%左右,对启动子强度增加的原因进行了讨论。 相似文献
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MAGUKs蛋白家族成员位于细胞表面,通过其PDZ、SH3、GK结构域调节离子通道受体的聚集,构建细胞骨架,参与信号转导,调控细胞周期进程,并与机体神经发育密切相关. 相似文献
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果蝇中Ecp蛋白的表达、纯化与抗体制备 总被引:3,自引:0,他引:3
获得特异性抗Ecp多克隆抗体,为进一步研究ecp的功能奠定基础。利用特异引物,通过RT-PCR扩增出编码Ecp蛋白的全长cDNA,克隆至谷胱甘肽S转移酶融合蛋白表达载体pGEX-4T-1(His)6C中,转染大肠杆菌DH 5α,经诱导表达后,利用谷胱甘肽琼脂糖珠从细胞裂解物中特异吸附融合蛋白,经凝血酶裂解,释放出Ecp蛋白,再经Ni-NTA亲和层析,最终获得高纯度的Ecp蛋白。用纯化的Ecp蛋白免疫新西兰家兔,亲和层析纯化抗Ecp抗体。利用该抗体进行的Western Blot结果表明:Ecp蛋白在野生型黑腹果蝇胚胎、三龄幼虫神经系统、成虫、成虫头部组织中均有明显表达,提示ecp可能是一个重要的管家基因。 相似文献
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为了研究果蝇中SR蛋白家族新成员Dxl6的功能,通过RT-PCR得到Dxl6的全长cDNA,并根据Dxl6基因产物的功能区,分别将Dxl6中间区域(Dxl6 middle part, Dxl6MP)、Dxl6 C末端RS结构域(Dxl6 RS domain, Dxl6RSD)序列亚克隆至pGEX-4T-1(His)6C 及pET32a 表达载体中,表达和纯化获得融合蛋白。用纯化的融合蛋白GST-Dxl6RSD-His和GST-Dxl6MP-His免疫家兔,分别得到抗Dxl6RSD和抗Dxl6MP两种抗体。WESTERN BLOT结果显示两种抗体能特异地识别在原核表达系统内表达的抗原,抗Dxl6RSD的抗体对果蝇组织中的Dxl6具有较高的特异性。Abstract: In order to study the function of Dxl6 which is a novel member of SR protein family, its cDNA was cloned by RT-PCR, and the sequences of its RS domain and its middle part were subcloned into two fusion express vectors, pGEX-4T-1His(6)C and pET32a. After expressing in E.coli BL21, the truncated proteins of Dxl6 RS domain part and Dxl6 middle part in pGEX-4T-1His(6)C were purified and used to immunize rabbits. Purified antibodies against the RS domain and Dxl6 middle part were obtained by affinity chromatography with the expressed products of Dxl6 RS domain part and Dxl6 middle part in pET32a, respectively. The result shows the antibody against Dxl6 RS domain has a good specificity to Dxl6 in Drosophila larvae by Western blot analysis. 相似文献
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纤溶酶原激活剂(Plasminogen Activator,PA)对血液中蛋白水解酶的活性有重要的调节作用。纤溶酶原激活剂的抑制物(Plasminogen Activator Inhibitor,PAI)可物异地抑制PA(t-PA和u-PA),其作用迅速,是PA活性的重要调节因子。很多证据表明,PAI、Pat和体内许多生理反应有密节的关系,如炎症[1]、组织重塑[2]、肿瘤生长及恶性细胞的转移[3,4]等。目前已发现了四种类型的PAI,PAI-2是基中的一种,它可由人胎盘滋养层细胞合成,在孕妇血浆中大理存在[5].该蛋白具有两种形式:一种分子量为43~47kDa的非糖基化形式:另一种分子量为58~60kDa的糖基化形式[6,7].对其结构与功能深入的研究将有助于了解许多生于现象,但由于PAI-2基因在大肠杆菌和哺乳动物细胞中的表达都不理想,不能获得足够量的该活性蛋白,本文在以轩状病毒为载体在昆虫细胞中成功地表达了该基因。 相似文献