AMPK调控内质网应激抵抗COPD大鼠肺泡上皮细胞凋亡的实验研究

目的:初步探讨AMPK在内质网应激所致COPD大鼠肺泡上皮细胞凋亡中所起的作用及机制。方法:实验分三组:对照组,COPD模型组,AICAR干预组,以香烟烟雾烟熏加气管内滴注脂多糖方法构建COPD大鼠模型,取大鼠肺组织行HE染色病理观察,免疫组化,western blot检测p-AMPK/AMPK,ORP150,caspase-3及CHOP表达,TUNEL法检测各组凋亡情况。结果:病理HE染色提示模型组大量炎症细胞浸润,肺大疱形成,支气管壁发生狭窄;AICAR干预组炎症细胞较模型组减少。与正常对照组相比,免疫组化及western blot均提示模型组中p-AMPK和ORP150蛋白表达含量增强,差异有统计学意义(P0.05)。而AICAR干预组中p-AMPK/AMPK及ORP150蛋白表达较模型组明显上升,差异有统计学意义(P0.05)。内质网应激相关凋亡指标CHOP及caspase-3的表达在模型组明显增强,较正常组比较差异有显著性(P0.05),而AICAR组中凋亡指标较模型组明显下调。结论:AMPK可以保护肺泡上皮细胞免于香烟烟雾所致内质网应激凋亡,且有可能通过增加ORP150来实现其保护作用。     

钾肥及与秸秆配施对紫色土作物产量和微生物群落结构的影响

基于紫色菜园土壤莴笋-白菜-甜玉米轮作4年12季连续定位施钾肥试验,研究不同种类钾肥及用量对重庆地区紫色菜园土上作物产量和土壤微生物群落结构的影响,为该地区作物生产确定合理的施钾技术提供科学依据。结果表明,在施用氮磷肥基础上,不同钾肥处理莴笋、白菜、甜玉米产量均显著提高;从3种作物4年平均产量和钾肥效益看,以单施适量化学钾(K_2)、单施适量秸秆钾(M_2)和秸秆还田配施少量化学钾(K_1+M_1)的施钾肥模式对白菜的增产效果好,增产28.05%—30.27%;M_2和K_1+M_1施钾肥模式对莴笋的增产效果较好,增产13.89%和13.81%;K_1+M_1施钾肥模式对甜玉米的增产效果最好,增产15.10%,表明秸秆还田配施少量化学钾(K_1+M_1)模式在供试3种作物生产中具有很好的应用前景。不同施钾处理对土壤微生物群落结构及丰度均会产生一定影响,以秸秆还田配施少量化学钾肥(K_1+M_1)对提高土壤细菌、真菌、革兰氏阳性菌的作用较好,并显著增加土壤微生物总PLFA含量,缓解对土壤微生物生存环境的胁迫,说明K_1+M_1能为土壤微生物的生长繁育创造有利环境。莴笋、白菜、甜玉米3种作物4年平均产量与土壤细菌、真菌、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌数量间存在显著相关性(P0.05),而不同钾肥处理对土壤微生物特征具有一定影响,说明施钾肥可能会调节土壤微生物特征,从而促进作物增产。     

Rho-ROCK信号通路在肝纤维化形成过程中的作用

肝纤维化是一种由多种因素导致的慢性疾病,严重威胁着人类的健康,目前尚无有效的治疗手段。Rho-ROCK信号通路是机体内一条重要的信号转导通路,可以影响细胞收缩、迁移、骨架重塑等生理功能以及平滑肌收缩,细胞凋亡等。该通路可以由多种炎性因子激发,通过激酶级联反应,影响细胞和机体的一系列生物学行为。同时,Rho-ROCK信号转导通路也与肝纤维化的发生密切相关,本文就这二者的关系作一综述,以期为肝纤维化的治疗提供新的思路与方法。     

茄科劳尔氏菌复合体毒力基因及调控网络最新研究进展

植物青枯病是一种能造成巨大经济损失的土传病害,其病原茄科劳尔氏菌复合体(Ralstonia solanacearum species complex,RSSC)能通过复杂的毒力调控网络将毒力因子合成并分泌到植物细胞胞质间或细胞质内,从而引起寄主植物发病。本文详细分析了RSSC主要的毒力基因及调控网络,包括其运动性(鞭毛,菌毛)、细菌分泌系统(T2SS、T3SS以及T6SS)、毒力调控系统(Phc、Prh、Vsr、Peh、Sol)、毒力因子(CWDEs、T3Es、EPS)、群体信号因子AHL及植物激素,总结了近年来最新的研究进展并绘制了相关网络调控模式图,以期为进一步研究RSSC的致病机理及防控研究提供参考。     

茎环法RT-qPCR定量检测细胞抗猪瘟病毒siRNA的表达

RNAi(RNA interference)已成为特异抗病毒治疗研究的热点,但siRNA(small interfering RNA)的定量检测仍是评价RNAi抗病毒效果的瓶颈。为了检测抗CSFV特异siRNA分子(siN1和siN2)在细胞中的表达水平,设计并以交叉组合方法筛选了具有较高特异性和灵敏度的siRNA特异茎环引物(SLP-N1-6和SLP-N2-8),成功地建立了最优的siN1和siN2的茎环法RT-qPCR检测方法。该方法表现出良好的特异性和较高的灵敏度,能检测出102至108个拷贝的siRNA,至少可达7个数量级的检测范围,平行性好(Rsq=0.999),扩增效率高(Eff.=98.2%)。茎环法RT-qPCR能准确地定量检测抗CSFV的PK-15细胞克隆的siN1/siN2表达水平,可结合常规的检测病毒水平的间接免疫荧光和TCID50等技术定量评价RNAi抗CSFV的有效性,为未来抗猪瘟转基因猪的抗病毒效果评价提供了先进的检测技术。     

有机无机缓释复合肥对土壤微生物量碳、氮和群落结构的影响

研究缓释复合肥不同用量对土壤微生物量碳、氮和群落结构多样性的影响,在农业生产上广泛应用缓释复合肥有着重要意义。试验采用室内长期恒温培养和磷脂脂肪酸法,以化肥和普通复合肥适量施用养分量为对比,研究缓释复合肥适量、高量和超高量施肥水平对土壤微生物PLFA含量的影响规律。结果表明,SRF1、SRF2、SRF3(缓释复合肥适量、高量和超高量)较CK(不施肥)和CF1(化肥适量)显著增加土壤微生物量碳,且较CK、CF1和CCF1(普通复合肥适量)显著增加土壤微生物量氮。土壤微生物量碳、氮随着缓释复合肥施肥水平的增加而增加,但没有随着施肥水平的倍量增加而倍量增加,且SRF2和SRF3无显著差异。缓释复合肥(SRF1、SRF2和SRF3)较CK、CF1和CCF1增加土壤PLFA的种类和含量,且总PLFA含量增加7.4%—26.7%、17.6%—38.7%和12.8%—33.0%,3个施肥水平以SRF2作用效果最好,总PLFA含量最高,分别较SRF1和较SRF3高16.4%和17.9%。土壤细菌、放线菌、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌PLFA含量以SRF1和SRF2显著高于CF1和CCF1。主成分分析和聚类分析显示施肥处理分布较多PLFA的优势种群,SRF3与SRF1和SRF2的PLFA结构差别较大。综上认为,适量施肥水平以缓释复合肥较化肥和普通复合肥对土壤微生物的作用显著,其中缓释复合肥3个施肥水平以高量施肥水平作用最好。     

肺结核合并肺癌患者的临床分析

目的:探讨肺结核合并肺癌的临床特点,提高临床医师诊断肺结核合并肺癌的警惕性.方法:对2000年1月至2009年12月在我院诊断为肺结核、肺结核合并肺癌、肺癌患者各40例进行回顾性分析.结果:三组之间的临床表现与实验室检查进行相互比较,发现其临床表现并无统计学差异,影像学与支气管镜检查有明显统计学差异外,其他实验室检查无差异.结论:结核合并肺癌与肺结核、肺癌等临床表现、实验室检查近似,易造成漏诊、误诊,临床医师应提高警惕,及时行影像学及支气管镜等检查.     

禾谷镰孢转化体系的优化

禾谷镰孢是小麦赤霉病和玉米茎腐病的主要病原真菌。试验优化了聚乙二醇介导的原生质体转化法,建立了禾谷镰孢高效转化的稳定体系,并总结了影响转化成功的主要因素。以此方法对禾谷镰孢进行活体荧光标记,并用转化菌株侵染小麦胚芽鞘,在荧光显微镜下追踪病原真菌在宿主植物体内的生长及扩展过程。     

TLR4-Nrf2/HO-1信号通路在小鼠机械通气所致肺损伤的作用研究

目的:机械通气作为一重要措施,拯救呼吸衰竭患者的生命,有致肺血管炎症及渗透增加等病变的可能,即VILI。本研究旨在明确VILI是否受潮气量、Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)基因敲除及核因子-E2相关受体2/血红素氧化酶-1(Nuclear factor-erythroid 2 related factor2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)表达的激活关联是否存在。方法:TLR4基因缺失和野生型(WT)小鼠分别分为对照(CON),低潮气量(low tidal volume,LTV)和高潮气量(high tidal volume,HTV)组。给小鼠禁食、禁水12小时后,麻醉小鼠,做气管切开,将气管导管经口插入,通气4小时,呼气末正压(PEEP)2 cm H2O,R:100次/分钟,吸呼比1:2;CON组仅气管插管。小鼠处死,测湿/干重比(W/D)。肺组织依次:HE染色组织学评价;评价肺损伤评分;测定肺炎症因子表达:肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β);免疫组化及免疫印迹法,测Nrf2蛋白值;测HO-1蛋白值。结果:在WT+HTV组,Nrf2和HO-1的表达比较WT+LTV组明显升高,但受到TLR4基因敲除的调节,相应的TLR4基因敲除组升高更明显。肺损伤评分、湿/干比在WT+HTV组增加,相应的TLR4基因敲除组升高更显著。结论:HTV通气可致小鼠VILI。VILI小鼠肺中的Nrf2/HO-1表达升高,TLR4基因缺失可以升高Nrf2/HO-1表达,保护肺组织,减轻VILI。     

云南路网特征及其与紫茎泽兰传播扩散的相关性分析

公路廊道是外来植物入侵定居和扩散的主要通道之一,公路沿线频繁的人工干扰与车辆交通,有利于外来植物种子的传播与扩散,同时公路和铁路有助于外来植物克服地理或生态的传播阻碍.论文分析云南省公路路网空间分布格局和公路里程与紫茎泽兰传播扩散的关系.结果表明:云南省路网分布不均匀,西部公路密度偏低,中东部地区密集;紫茎泽兰发生总面...