利用慢病毒载体观察microRNA-194 对人骨肉瘤细胞系U2-OS 生物学特性的影响

目的：通过构建携带针对microRNA-194 的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系U2-OS,改变细胞 内microRNA-194 基因的表达水平,研究microRNA-194 对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,为探索microRNA-194作为骨肉瘤 生物治疗的新靶点提供理论和实验依据。方法：PCR扩增pri-miR-194 及miR-194-5 成熟体,克隆于慢病毒载体plent-i GFP 中,转 染大肠杆菌感受态细胞,收获并浓缩慢病毒颗粒,感染人骨肉瘤细胞系U2-OS。进行MTT,流式,平板克隆等试验。结果：1.重组慢 病毒表达质粒构建正确,过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5× 108 TU/ml及4× 108 TU/ml;2. microRNA-194过表 达的人骨肉瘤细胞系U2-OS 细胞增殖速度,凋亡率及细胞周期相较于其它实验组都有明显变化(P<0.01)。结论：成功构建了 microRNA-194 过表达及抑制过表达慢病毒表达载体;miR-194 的表达水平对U2-OS 细胞的增殖和凋亡造成显著影响。 microRNA-194 可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点,但该基因对骨肉瘤发生发展的作用及其机制尚待进一步研究。     

人工腰椎间盘置换研究应用进展

椎间盘病变是脊柱外科的常见疾病,是成年人疼痛和致残的常见原因,常常给人带来沉重的肉体和经济负担。经过长时间的发展与脊柱外科手术的进步,常规手术治疗在临床上虽然取得了一定的疗效,但是没有保留脊柱的生理运动功能,对临近阶段的椎间盘的退变起到促进作用,并且腰椎运动节段的融合加快了邻近节段椎间盘和小关节的退变。腰椎独特的解剖学特点和生物力学的研究及不同材质和特点的人工椎间盘材料的发展使人工椎间盘手术成为可能。与常规手术方式相比,人工椎间盘假体设计与人生理的解剖结构更加吻合。术后可以保持瞬时和长期的稳定性,从而对邻近的椎间盘的退变起到抑制作用。取得了较好的疗效。人工椎间盘置换术作为治疗腰椎间盘除腰椎融合之外的另一合理选择,目的是使退变导致的疼痛可以稳定长期缓解,并重建椎间隙高度以保护神经,从而避免晚期关节突关节及邻近节段的病变,恢复脊柱的运动学和载荷特性。目前人工腰椎间盘有了长远的发展,适应症不断扩大,但仍有较多限制。期待在将来能够找出更加符合人体生物力学特点的材料和设计,使之成为一种更为有效的治疗腰椎疾病的治疗方式。现就人工椎间盘的类型、疗效、适应证、禁忌证以及术后并发症等方面予以综述。     

利用慢病毒载体观察microRNA-194对人骨肉瘤细胞系U2-OS生物学特性的影响

目的：通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系U2-OS,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,为探索microRNA-194作为骨肉瘤生物治疗的新靶点提供理论和实验依据。方法：PCR扩增pri-miR-194及miR-194-5成熟体,克隆于慢病毒载体plent-i GFP中,转染大肠杆菌感受态细胞,收获并浓缩慢病毒颗粒,感染人骨肉瘤细胞系U2-OS。进行MTT,流式,平板克隆等试验。结果：1.重组慢病毒表达质粒构建正确,过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5×108TU/ml及4×108TU/ml;2.microRNA-194过表达的人骨肉瘤细胞系U2-OS细胞增殖速度,凋亡率及细胞周期相较于其它实验组都有明显变化（P〈0.01）。结论：成功构建了microRNA-194过表达及抑制过表达慢病毒表达载体;miR-194的表达水平对U2-OS细胞的增殖和凋亡造成显著影响。microRNA-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点,但该基因对骨肉瘤发生发展的作用及其机制尚待进一步研究。     

微波射频保肢术及截肢术治疗胫骨远端骨肉瘤的临床疗效比较

目的:探讨和比较截肢术和微波射频保肢术治疗胫骨远端骨肉瘤的临床效果和安全性。方法:选择2000年-2013年我院收治的明确诊断为胫骨远端骨肉瘤的患者79例,其中27例给予截肢治疗(截肢组),52例给予微波射频保肢和重建治疗(保守治疗组)。评价和比较两组患者的生存情况、局部复发情况、MSTS关节功能评分及并发症的发生情况。结果:两组患者的生存曲线、局部复发率和并发症的发生率比较均无统计学差异(P0.05),但保守治疗组的MSTS关节功能评分显著高于截肢组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:微波射频保肢术治疗胫骨远端骨肉瘤患者不会降低患者的生存几率,且在改善患者的关节功能方面有明显的优势。     

影响骨肉瘤治疗预后效果的临床因素的研究进展

骨肉瘤是最常见的骨的原发性恶性肿瘤,常常好发于15-19岁。目前治疗上已经有了很大的进步,其最有效的治疗方案包括新辅助加上局部控制。但不幸的是,其治疗效果仍然非常低。因此在选择不同的治疗方式前需要对患者的预后进行严谨和科学的预测和判断,从而选择最佳的治疗方案。传统意义上影响骨肉瘤治疗预后效果的因素主要包括以下几点:年龄,性别,肿瘤大小,位置,分期和耐药性等。但是这些因素有着太多的测量和衡量方法,在不同的研究中进行统一标准下的比较是很难的。通常来讲,利用转移,耐药性等因素来进行预后的判断尽管能达到较高的准确性,但已经往往处于疾病的后期,对疾病治疗本身的意义不大。因此,需要去寻找新的,能够在早期对于预后进行判断,能够于早期进行准确的诊断从而进行早期治疗的方法。本文从位置,大小,年龄,分期,肿瘤的复发或转移,病理性骨折,手术和化学治疗等方面对骨肉瘤的预后及影响因素进行综述。