从云豹分离的一株猫泛白细胞减少症病毒的特性

从病死的云豹体内分离到1株猫泛白细胞减少症病毒,进行了鉴定,研究了它的血凝特性和对猫与水貂的致病力,分析了它与猫泛白细胞减少症病毒参考毒株(FNF-8)抗原的相关性。 用中国兽药监察所提供的猫肾传代细胞(FK)进行病毒的分离鉴定。同步接种和异步接种测得病毒的TCID50均为4.8/ml。病毒经乙醚、酸(pH3.0)、热(56℃1小时)     

DNA分子标记在药用植物中的应用

对DNA分子标记技术在药用植物鉴定、中药质量标准化、遗传图谱构建和近缘物种进化关系等方面的研究进展进行了综述,并展望了分子标记技术在药用植物研究中的发展前景。     

猪繁殖和呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因在大肠杆菌中的 …

以ＰＲＲＳＶ弱毒株膜蛋白（Ｍ）和核衣壳（Ｎ）蛋白基因为模板,设计的一对含有ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ酶切位点的引物,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增出一约９００ｂｐ的ＭＮ基因片段,将此基因片段成功克隆于高效表达载体ｐＢＶ２２０,构建成重南粒ｐＢＶＭＮ,导入大肠杆菌ＤＨ５α,经温敏诱导,成功地表达了ＭＮ基因。表达产物经ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ电泳和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ印迹分析,其分子量约３４ｋＤ,与兔抗ＰＲＲＳＶ高兔血清     

应用RT—PCR检测流产胎儿组织中猪繁殖与呼吸综合征病毒

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）美洲型膜蛋白和核衣壳蛋白基因序列,设计了一对含有ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ酶切位点的引物,用ＲＴ－ＰＣＲ对四个流产猪场的病料进行了检测,扩增出约９１８ｂｐ的基因片段。通过病毒分离、酶切鉴定和序列分析证实为ＰＲＲＳＶ感染。结果说明应用所设计的引物进行ＲＴ－ＰＣＲ快速检测ＰＲＲＳ是可行的,为我国快速特异诊为ＰＲＲＳ和ＰＲＲＳＶ强毒株的深入研究奠定了基础。     

我国两个不同地区猪繁殖和呼吸综合征病毒分离株ORF5基因序列比例

猪繁殖和呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)为动脉炎病毒科成员之一,可引起感染母猪流产、死胎及断奶仔猪呼吸困难和死亡.该病毒呈球形,有囊膜,大小45nm～83nm,基因组为单股RNA,大小约15kb,有8个阅读框(ORF),分别编码2种非结构蛋白和6种结构蛋白,其中ORF5编码病毒糖基化膜蛋白(GP5)[1,2].GP5蛋白为该病毒主要结构蛋白之一,含有病毒线性中和抗原表位.该蛋白可诱导感染细胞发生细胞凋亡[3,4].目前,PRRSV有欧洲型和美州型两个血清型,其结构蛋白基因同源性为54%～70%[5,6].不同美洲型PRRSV野毒株基因也有一定差异.由ORF5基因推导的氨基酸序列有4个相对保守区,但其N端和C端氨基酸残基可变性较大.由该基因构建的重组质粒具有良好免疫原性[7,8].尽管一些欧美国家已普遍使用Resp PRRS弱毒疫苗,但该病仍时有发生[9,10].我国于1996年亦已证实存在该病,并有不断蔓延趋势,已造成我国养猪业严重经济损失.     

应用RT-PCR检测流产胎儿组织中猪繁殖与呼吸综合征病毒

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型膜蛋白和核衣壳蛋白基因序列,设计了一对含有EcoR I和BamH I酶切位点的引物,用RT-PCR对四个流产猪场的病料进行了检测,扩增出约918 bp的基因片段.通过病毒分离、酶切鉴定和序列分析证实为PRRSV感染.结果说明应用所设计的引物进行RT-PCR快速检测PRRS是可行的,为我国快速特异诊断PRRS和PRRSV强毒株的深入研究奠定了基础.     

猪繁殖和呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达

以 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 弱毒株膜蛋白（ Ｍ） 和核衣壳（ Ｎ） 蛋白基因为模板,设计的一对含有 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ 和 Ｂａｍ Ｈ Ｉ酶切位点的引物,通过 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 扩增出一约９００ ｂｐ 的 Ｍ Ｎ 基因片段,将此基因片段成功克隆于高效表达载体ｐ Ｂ Ｖ２２０ ,构建成重组质粒ｐ Ｂ Ｖ Ｍ Ｎ,导入大肠杆菌 Ｄ Ｈ５α,经温敏诱导,成功地表达了 Ｍ Ｎ 基因。表达产物经 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 电泳和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 印迹分析,其分子量约３４ ｋ Ｄ,与兔抗 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 高免血清发生反应,经光密度扫描分析,表达产物量占菌体总蛋白的１２ ％ 。该研究为 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ 基因诊断抗原的研制奠定了基础