天麻AFLP分析技术体系的建立

目的:建立一个适于天麻研究用的AFLP分析技术体系。方法:以11份天麻种质资源为试材,构建供试天麻的AFLP指纹图谱,同时对AFLP分析过程中DNA提取、酶切、连接、预扩增、引物筛选、选择性扩增、电泳和银染等多种因素进行分析。结果:AFLP分析体系要求DNA模板质量高,酶切连接可同时进行,37℃、9h效果较好,预扩增要求高质量DNA聚合酶,产物15倍稀释作为选择性扩增模板效果好,制胶前玻璃板的处理和银染时间的掌控对获得较好结果非常关键。P-GGA/M-GT引物构建的指纹图谱拥有可清晰辨认的扩增条带45条。结论:AFLP指纹技术具有稳定性高、重复性好等优点,可用于天麻DNA分析。     

高脂高糖饮食结合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型的改良

目的对目前常用的高脂高糖饮食结合链脲佐菌素建（STZ）建立2型糖尿病大鼠模型的方法进行改良。方法选择40只雄性SD幼鼠,对传统方法进行改良。改良的方法包括：1.采用幼鼠（4周龄）造模;2.用实验方法确定STZ致糖尿病的亚致病剂量;3.大鼠生化指标检测根据用血量不同采取尾静脉、尾动脉和摘除眼球取血等多种取血方式。结果实验组大鼠血糖明显升高（13.7±1.57 mmol/L）。大鼠肝脏、胰腺、脑组织和肾脏等多个器官出现了病变,实验大鼠生存时间较长（9个月以上）。结论本研究完善了2型糖尿病的建模方法。     

AFLP技术在天麻遗传变异研究中的初步应用

为探讨AFLP技术在天麻遗传变异研究的应用,选取11对AFLP引物对11份不同来源天麻品种之间遗传关系进行AFLP分析的结果表明,11对引物共扩增出543条扩增带,每个引物组合在个体间扩增条带的数目有33~83条,平均为49.5。采用UPGMA法聚类分析得到的天麻各品种之间遗传距离为0.0792~0.6004。UPGMA聚类图显示,11份样品分为两大组群,其中的贵州天麻一群又分为2个组群。