沼泽红假单胞菌J001产辅酶Q10摇瓶发酵条件优化

本试验对沼泽红假单胞菌J001菌株250ml摇瓶发酵辅酶Q10条件进行了优化。结果表明其最佳初始pH值为6.5-7.5,温度为28-31℃,摇床转速100 r min-1,摇瓶装液量为200ml,接种量达10%时可直接进入对数生长期;碳源以NaAc较好,氮源以(NH4)2SO4和NH4Cl较好,磷源用量对考察指标影响不明显;用中心组合设计响应曲面法对碳氮源用量进行了优化,当NaAc浓度为5.39（g l-1）,(NH4)2SO4浓度为0.385（g l-1）即碳氮比为14/1时,对菌胞生长最有利;当NaAc浓度为5.70（g l-1）,(NH4)2SO4浓度为0.365（g l-1）即碳氮比为15.6/1时,对辅酶Q10产量最有利。     

酚类抑制剂抗5-脂氧合酶的分子对接研究

目的:研究抗5-脂氧合酶酚类抑制剂的结构活性关系及作用机制。方法:构建7个抗5-脂氧合酶阳性酚类抑制剂分子库,利用Autodock 4.2和iGEMDOCK 2.1软件包对受体与抑制剂进行模拟对接研究并计算结合自由能。结果:用Autodock 4.2、iGEMDOCK 2.1计算得到的结合自由能与抑制剂的抑制活性之间都存在良好的相关性,它们的决定系数(R2)依次为0.856 64和0.784 41,标准误差(SD)分别为0.430 92和5.323 35,P值分别为0.002 79和0.007 98;配体与受体之间形成的氢键在决定配体在受体活性部位的构象及定位中起重要作用,但两者结合的主要驱动力为范德华作用力;具有碳氧双键及与该双键共轭的碳碳双键的多环酚类化合物有较强的抗5-脂氧合酶活性。结论:Autodock 4.2比iGEMDOCK 2.1预测抗5-脂氧合酶酚类抑制剂的能力强;具有碳氧双键及与该双键共轭的碳碳双键的多环酚类化合物有较强的抗5-脂氧合酶活性。     

对沼泽红假单胞菌生产CoQ10添加前体物的优化

CoQ10因其具有多种生理生化功能而不仅用于药物也用作食品添加剂.本研究采用全因析中心复合设计及响应面法对茄尼醇、对羟基苯甲酸及甲硫氨酸三种CoQ10前体物的添加量进行了优化,以达到沼泽红假单胞菌J001最大量地生产CoQ10的目的.结果表明:经过对所得模型进行响应曲面法分析,当茄尼醇、对羟基苯甲酸及甲硫氨酸最佳添加量分别为124.8mg1-1,267.7mg1-1,130.2mg1-1时,得最大CoQ10产量预测值40.6[(mgCoQ10)(g干细胞)-1].对上述最佳组合进行试验验证得40.5±0.2[(mg CoQ10)(g干细胞)-1],很接近预测值,比对照(未加三种CoQ10前体物)CoQ10产量提高了109.8%.     

鸡血藤中黄酮类化合物与环氧合酶-2对接研究北大核心CSCD

探索黄酮类化合物抗环氧合酶-2的分子机理,筛选鸡血藤中选择性抗环氧合酶-2的黄酮类化合物。本研究应用Autodock 4.2软件对环氧合酶和环氧合酶抑制剂进行分子对接研究,建立阳性抑制剂结合自由能与抑制活性关系模型,并筛选鸡血藤中选择性抗环氧合酶-2的黄酮类化合物。阳性抑制剂与环氧合酶的对接模型R2分别为0.96997和0.84171,建立了预测能力较好的对接模型,可用于指导环氧合酶抑制剂的筛选。筛选结果表明,3',4',7-三羟基黄酮、儿茶素、没食子儿茶素、表儿茶素具有较强的环氧合酶-2选择性抑制活性,可作为母体用于新型抗炎药物设计。     

透明质酸生物合成途径及基因工程研究进展

透明质酸是由N-乙酰氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸组成的双糖单位聚合而成的直链酸性黏多糖,已被广泛应用于药物、化妆品和食品添加剂。微生物发酵法是目前生产透明质酸最有效的方法。生物体内透明质酸的合成途径基本一致,均为Leloir途径。透明质酸合成操纵子由透明质酸合酶基因、尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶基因和尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因组成,其表达受Cov S/CovR和Lux S等多种调控系统调控。随着分子生物学技术的迅速发展以及对透明质酸合成相关基因了解的不断深入,人们从提高透明质酸安全性、提高透明质酸产量和调控透明质酸分子质量三个方面出发,通过基因工程手段构建出了高产、安全、一定分子质量范围的透明质酸生产菌株。就有关透明质酸生物合成途径、合成相关基因表达调控及生产菌株分子生物学改造的策略与研究进展进行综述和展望。     

5-脂氧合酶及其抑制剂

5-脂氧合酶（5-lipoxygenase, 5-LOX）是生物体内一种重要的双加氧酶.5-LOX是催化花生四烯酸（arachidonic acid,AA）生成白三烯类（leukotrienes, LTs）的关键酶. LTs是重要的炎症介质,并且在许多疾病中发挥着重要作用.近年来,很多学者致力于5 LOX的研究,从而为5-LOX抑制剂的研发提供理论依据.本文对5-LOX的分子结构、细胞内定位、表达与活性调控及其抑制剂的研究进展进行综述.     

EPSP合酶的研究进展

5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase,EPSP合酶)是莽草酸途径中的第六位酶,参与合成芳香族氨基酸以及部分次生代谢的产物,同时EPSP合酶不仅是除草剂草甘膦、抗菌素、抗寄生虫药物的作用靶酶,而且也是促进生物体内莽草酸积累的重要调控位点。近年来,随着分子生物学技术的快速发展和对EPSP合酶的深入研究,EPSP合酶基因在耐草甘膦转基因作物、医药卫生等方面被广泛应用。对EPSP合酶的研究进展进行综述及展望。     

微生物CoQ合成途径及CoQ10生产菌株的分子生物学改造

CoQ10具有呼吸链电子传递者、抗氧化性、调控基因表达等多种生理生化功能,目前不仅用作药物也用作食品添加剂。微生物发酵法是目前生产CoQ10最有效的方法。本文就有关微生物CoQ合成途径及基于CoQ合成途径的CoQ10生产菌株分子生物学改造的策略与研究进展进行了综述和展望。