p53转录非依赖活性介导细胞凋亡

p53主要通过两条途径诱导细胞凋亡：p53作为转录因子,促进细胞凋亡的靶基因的表达上调,如PUMA、NOXA、PIDD、p53AIP1、COP1等,并通过这些蛋白参与内源和外源凋亡途径;另一方面,胞浆中的p53能转位到线粒体,激活内源性的线粒体途径,促进凋亡。后者已成为研究p53促凋亡机制的热点。本文就p53对转录非依赖活性诱导细胞凋亡途径的研究进展作一概述。     

天花粉蛋白诱导的凋亡相关基因(GRETA)的分离

天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)制备成免疫毒素后,可抑制肿瘤细胞的生长,已尝试用于治疗恶性肿瘤。在无细胞体系中TCS可通过抑制蛋白质的合成发挥毒性作用。对完整的活细胞,近来发现它可阻断激活信号传递中ZAP-70与CD3ζ链的物理结合,并能诱导人体外周血淋巴细胞发生凋亡。凋亡为一受基因控制的细胞程序性死亡,有关死亡信号传递通路中相关基因的分离是研究和阐明这一细胞自杀事件的有效途径,并有助于了解TCS的作用机理和探索其用于恶性肿瘤治疗的新方式。本文采用mRNA差别显示技术,从TCS诱导     

人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型、细胞系建立及其生物学特性研究

目的建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系.方法将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下,成瘤后行鼠间传代,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤和建系细胞进行一系列生物学特性检测.结果历时14个月传至5代,皮下移植瘤存活率为90%,持续6个月,体外建系(OVA-319)细胞生长稳定.镜下观察组织形态学和超微结构符合原肿瘤组织基本特征;染色体分布在12～46条之间,多为异倍体,显示人类肿瘤异常染色体;流式细胞术和RT-PCR技术分析原代、体内移植瘤和OVA-319细胞结果一致,表现为瘤细胞生长活跃、细胞周期分布相仿,MAGE-2基因在mRNA水平异常表达.结论人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和OVA-319细胞系为人类肿瘤的研究提供了良好的实验材料.     

应用cDNA微阵列研究肿瘤基因表达谱

随着研究水平的深入 ,对基因在发育过程中、生理反应中和疾病发展中表达上的时空差别 ,基因蛋白质产物的亚细胞定位和细胞分子间的相互作用等研究领域的开拓 ,所涉及到的基因的广泛性用传统方法研究已很难达到要求 ,因此一些新的研究方法应运而生 ,基因表达谱的研究即为其中之一。基因表达谱 ( ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅ)是指细胞中所有基因表达的格局 ,具体说来就是指细胞中产生所有ｍＲＮＡ的总和。对于所有的ｍＲＮＡ来说 ,通常采用的研究方法是将其逆转录成ｃＤＮＡ ,通过构建ｃＤＮＡ文库 ,再进行分析研究。原先采用…     

干扰OVA66基因表达对移植瘤生物学功能的影响

目的探讨干扰OVA66基因表达对移植瘤细胞生物学功能的影响。方法采用脂质体法,以重组的pSUPER-shRNA-OVA66和空载体转染HeLa细胞获得稳定表达细胞株,经RT-PCR和Western blot鉴定OVA66基因的表达。将两组细胞接种于BALB／cnu／nu裸鼠的前肢腋下,连续观察干扰OVA66表达对肿瘤的生长影响。并于接种4周后,应用RT-PCR,免疫组化、免疫荧光等方法检测移植瘤细胞中OVA66的蛋白表达。组织病理分析肿瘤细胞生长和转移的特征。结果经检测pSUPER-shRNA-OVA66能有效抑制目的基因的表达。比较两组荷瘤小鼠中肿瘤的生长曲线发现,OVA66实验组的肿瘤生长速度明显低于对照组,并且肿瘤细胞体内转移和浸润能力显著降低。结论干扰OVA66基因和蛋白表达,可以抑制肿瘤细胞的生长,浸润和侵袭能力。