蛇毒磷脂酶A2的毒理作用

生物体内含有多种磷脂酶,按水解底物部位的不同,一般可分为五大类,即磷脂酶 A_1、A_2、B、C、D(图一).其中蛇毒中的磷脂酶蛇毒 PLA_2的共同化学特征是(4):①水解磷脂底物 C-2位的酯键;②对胶束聚集的(micellar aggregate)底物水解速度快,     

对虾白斑杆状病毒DNA聚合酶调控序列的克隆

为了揭示对虾白斑杆状病毒的致病机理,将该病毒基因组中推测的DNA聚合酶上游调控序列克隆进荧光素酶报告基因载体中,以便寻找一个能表达该病毒基因的细胞系统.     

催乳素A基因的克隆与表达

用PCR和限制性酶酶切方法将CS-A基因克隆到表达载体pCDGFP中,用免疫沉淀和Western blot的方法检测转染后的表达以及表达产物在细胞中分布。结果表明表达产物的分子量与预测的一致,而且证明CS-A是一个分泌蛋白;荧光显微镜观察表明CS-A蛋白分布于细胞质中。     

湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶A_2的热稳定性

本文测定了湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶Ａ２在不同温度保温后的酶活性,结果表明此酶具有一定的热稳定性。     

若干化学修饰剂对PLA2酶活力的影响

利用化学修饰的方法研究了修饰后的ＰＬＡ２与其酶活力之间的关系。结果表明色氨酸、精氨酸及氨基酸被修饰后ＰＬＡ２酶活力均有不同程度的下降。     

五步蛇蛇毒磷脂酶A_2的纯化及部分性质

经Sephadex G-75和QAE-Sephadex A-50离子交换层析等方法,从湖南产五步蛇(Agkistrodon acutus)蛇毒中纯化一种均一的酸性磷脂酶A_2。SDS-PAGE测得分子量为15.8kD,按氨基酸残基计算其分子量为14.352kD,IEF-PAGE测得等电点为5.32。氨基酸组份分析表明磷脂酶A_2分子由128个氨基酸残基组成,富含Asp和Glu,不含中性糖。PLA_2酶活性的最适温度为45℃,最适pH为8.5左右,没有抗胰蛋白酶的活性,具一定的热稳定性。K~+、Ca~(++)和Na~+离子激活,而Cd~(++)、Sn~(++)、Cu~(++)、Li~+、Hg(++)、Zn~(++)、Fe~(++)和Co~(++)离子可抑制或完全丧失酶活力。手工微量顺序分析测得PLA_2分子N-末端氨基酸为Leu。此酶对小白鼠的LD_(50)至少大于10mg/kg(ip)。     

金属离子对湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶A2活性的影响

测定结果示,对湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶Ａ２,Ｋ＋可使酶活性增加,而Ｆｅ３＋等则不同程度地抑制酶活性     

制备式等电聚焦鉴定湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶A2的等电点及纯度

制备式等电聚焦测得湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶Ａ２为单一的吸收峰（ＯＤ２８０）,等电点为５．３２,证明了作者前报道的纯化的磷脂酶Ａ２为纯品     

凋亡抑制蛋白IAP及其调控

调亡过程中关键参与者是caspase家族的多种成员,它们在凋亡过程中要受到严格调控。凋亡抑制蛋白IAP通过抑制caspase的活性从而参与对凋亡的调控,所以IAP的结构特征及其调控机制具有重要意义。     

Ca^＋＋Na^＋离子对湖南产五步蛇蛇毒PLA2酶活力的影响

Ｃａ＾＋＋离子能极大地激活五步蛇蛇毒ＰＬＡ２的酶活力，Ｎａ＾＋离子只能在一定程度上激活，作者推测在测定ＰＬＡ２酶活力的底物溶液中可以不加Ｎａ＾＋离子。