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从蟾蜍血清中发现并纯化出了一种与血清载脂蛋白有关的可催化神经性军用毒剂梭曼(0-1,2,2-trimethylpropylmethylphosphofluoridate,soman)的水解酶,此酶全部与高密度脂蛋白(HDL)以复合形式存在于血清中。我们经过多种纯化手段,从HDL中分离纯化出了酯酶的最小分子量组分,得到了高活性、高纯度的酶蛋白,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及等电聚焦电泳中呈单一区带,分子量42kD,等电点pH5.2,并证明此酶不是HDL中的任何一种已知载脂蛋白,也不是磷脂酶A_2和磷脂酶C以及存在于HDL中的卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)。它是与HDL中的主要载脂蛋白apoA_1比较牢固地连接在一起并含量甚微的一种酶蛋白,水解梭曼的Km值pH7.2、37℃时为3.13mmol/L。可被对氯汞苯甲酸、HCl-胍和EDTA-Na_2所抑制,二硫苏糖醇对酶活性有恢复作用。 相似文献
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大肠杆菌梭曼水解酶的纯化和性质邵煌,刘昌玲,肖美珍,孙曼霁(北京军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850)梭曼属G类神经性有机磷毒剂.自然界发现多种细菌中均存在梭曼水解酶(Somanase)活性[1-3].研究细菌梭曼水解酶,寻求生物解毒的方法... 相似文献
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蟾蜍血清梭曼水解酶(somanase)的纯化及性质的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
从蟾蜍血清中发现并纯化出了一种与血清载脂蛋白有关的可催化神经性军用毒剂梭曼的水解酶,此酶全部与高密度脂蛋白以复合形成存在于血清中,我们经过多种纯化手段,从HDL中分离纯化出了酯酶的最小分子量组分,得到了高活性、高纯度的酶蛋白,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及等电聚焦电泳中呈单一区带,分子量42kD,等电点pH5.2并证明此酶不是HDL中的任何一种已知载脂蛋白,也不是磷脂酶A2和磷脂酶C以及存在于HD 相似文献
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蟾蜍血清梭曼水解酶(TSS)已被纯化.采用微量联苯胺法对该酶的酶学性质进行研究表明,该酶有两个最适pH,分别是pH7和pH10;最适作用温度为30℃;以梭曼为底物,在pH7.73,1/15 mol/L PB, 30℃条件下测定该酶的米氏常数为5.864 mmol/L,最大反应速度为692 μmol/L. Mg2+、Ca2+对TSS有激活作用,而Ni2+、Cu2+、Fe2+、Na+、K+对酶活性无明显影响.用TSS免疫Bal b/c小鼠,取其脾细胞在PEG4000作用下与P3x63-Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞进行融合,获得8株能分泌抗TSS单克隆抗体的杂交瘤细胞株:AC11,AE8,DA3,DE5,DG3,EB4,EC4,EH4.用酶联免疫吸附试验对其分泌的抗体滴度进行检测,其腹水滴度最高可达2×107,对其中4株杂交瘤分泌的抗体相对亲合力进行测定,它们的大小顺序为DA3>EH4>DG3>EC4;对其中6株杂交瘤分泌的抗体进行免疫球蛋白类型鉴定表明,6株单抗均为IgG1类.上述8株杂交瘤在体外连续培养6个月,分泌抗体水平未见下降. 相似文献
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