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旨在构建植原体免疫主导膜蛋白Imp基因原核表达载体,并进行初步表达。以重组克隆质粒pMD18-T-Imp为模板,PCR扩增Imp基因片段。构建表达载体pET-28a(+)-Imp,转化宿主菌E.coliBL21(DE3)。筛选阳性克隆,提取重组质粒作PCR鉴定、酶切鉴定及IPTG诱导表达鉴定。PCR及双酶切结果显示,重组质粒pET-28a(+)-Imp构建成功。经IPTG诱导BL21(pET-28a(+)-Imp)表达约20 kD的蛋白,与预期的携带6×His-Tag的目的蛋白(19.5 kD)大小相符,主要以包涵体形式存在。结果显示,构建的表达载体pET-28a(+)-Imp在E.coliBL21(DE3)中能够达一定量表达,为进一步纯化Imp蛋白奠定基础。 相似文献
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二次正交旋转组合设计对马占相思组培增殖培养基的优化 总被引:11,自引:0,他引:11
在马占相思组织培养初步取得成功的基础上 ,采用二次正交旋转组合设计对马占相思增殖培养基进行优化 ,建立增殖率 (Y)对Ca2 +浓度 (X1)、6 BA浓度 (X2 )及NAA浓度 (X3 ) 3个试验因子的正交回归模型 :y=2 2 80 -0 1 68X1-0 2 5 9X2 +0 1 85X21 -0 2 1 0X22 +0 1 67X23+0 3 2 6X1X2 ,从模型推知 ,当Ca2 + 浓度为 0 5 8倍常规MS培养基浓度 ,6 BA为 0 76mg/L ,NAA为 0 1 6mg/L时 ,增殖率达最大值为 4 3 2 1 ,与事实验证结果相符。 相似文献
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几种保护酶活性变化与马占相思树对低温胁迫的抵抗性的关系研究 总被引:17,自引:1,他引:16
马占相思(Acacia mangium)QLD19835家系树苗在人工气候室经低温处理后,体内相关的生理指标及酶活性产生明显变化。随着温度不断下降至-6℃产生的冻害导致植株细胞膜ATP酶活性有所下降,而蛋白质的含量则显著升高,同时,细胞保护酶SOD、POD、CAT的活性呈下降趋势,但仍能维持较高的活性水平。这些实验结果表明,马占相思QLD19835对低温胁迫能产生一种防卫反应,从而对冻害有一定适应性,而具有一定活性的细胞保护酶及蛋白质的含量提高可能是植株有较强抗寒力的重要原因。 相似文献
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