E-cadherin在胰腺癌中的表达及其对预后的影响

目的：探讨钙粘蛋白E-cadherin的表达与胰腺导管腺癌临床病理特征及预后的关系。方法：利用组织芯片,采用免疫组织化学En Vision二步法检测106例胰腺导管腺癌组织和12例正常胰腺组织E-cadherin的表达情况。结果：E-cadherin在胰腺导管腺癌组织中表达部分缺失率为53.8%（57/106）,完全缺失率11.3%（12/106）,正常组织中的缺失率为0%,差异有统计学意义（P〈0.01）;E-cadherin的表达与患者性别、年龄,临床分期、神经浸润和淋巴结转移无关,与肿瘤分化程度有关。106例胰腺导管腺癌患者E-cadherin表达完全缺失、部分缺失和完整表达的中位总生存期分别为7个月、19个月和25个月,两者差异有统计学意义（P〈0.01）。单因素分析显示,肿瘤分化程度、淋巴结转移、切缘情况和E-cadherin表达缺失水平与预后相关;多因素分析显示,切缘情况和E-cadherin表达缺失水平与预后相关。结论：E-cadherin可以作为胰腺导管腺癌患者预后的独立指标。     

骨桥蛋白在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究骨桥蛋白OPN在胰腺癌中的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法:采用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测50例胰腺癌手术切除标本和20例癌旁正常胰腺组织中OPNmRNA及其蛋白水平的表达。结果:胰腺癌组织中OPNmRNA高表达率为90%(45/50)明显高于其在癌旁正常胰腺组织中的表达15%(3/20),差异有统计学意义(P<0.01);OPN蛋白的阳性率为86.0%(43/50),明显高于癌旁正常胰腺组织中的表达30%(6/20),差异有统计学意义(P<0.01);OPN在胰腺癌组织中表达与其淋巴结转移明显相关(P<0.05)。结论:OPN在胰腺癌中的过表达对胰腺癌的生长、浸润及转移起重要作用。     

人色素域解旋酶DNA结合蛋白5的基因克隆及其真核表达载体的构建

目的:克隆人色素域解旋酶DNA结合蛋白5(chromodomain helicase DNA-binding protein 5,CHD5)基因并构建真核表达载体.方法:应用PCR扩增人CHD5基因的编码区,使用基因重组方法构建真核细胞表达载体peGFPc1-CHD5,实时定量PCR技术检测重组质粒peGFPc1-CHD5转染293T工具细胞后的过表达能力.结果:经过PCR方法,有效扩增了CHD5基因编码区,构建了peGFPc1-CHD5真核细胞表达质粒,测序分析表明所克隆的CHD5基因编码区序列无误.实时定量PCR检测结果表明重组质粒peGFPc1-CHD5能有效地过表达CHD5基因.结论:成功地构建了人CHD5的真核细胞表达载体peGFPc1-CHD5.并在293T工具细胞中实现过表达,为进一步研究奠定了实验基础.     

TIP30在胰腺中的表达及对胰腺癌细胞生物学特性的影响

目的:探讨抑癌基因TIP30在胰腺中的表达情况,并研究其对胰腺癌细胞生物学特性的影响,为TIP30在胰腺癌基因治疗中的应用提供依据.方法:采用免疫组织化学检测12例正常胰腺组织和106例胰腺导管腺癌组织中TIP30的表达情况;RT-PCR和Western blot检测TIP30基因在三种主要胰腺癌细胞系中的表达情况;根据结果构建相应慢病毒载体转染胰腺癌细胞,检测TIP30对细胞增殖能力,克隆形成能力和成瘤能力的影响.结果:TIP30在胰腺导管腺癌组织中表达缺失率为49.1％,正常组织中的缺失率为0％,差异有统计学意义(P＜0.01);在不同胰腺癌细胞系中,内源性TIP30也存在差异化表达,Capan-2细胞系中表达量最高,SW1990细胞系其次,PANC-1细胞系中表达量最低;抑制Capan-2细胞内源性TIP30表达可以增强肿瘤细胞增殖、克隆形成和成瘤能力,使PANC-1细胞中TIP30过表达,可以抑制肿瘤细胞增殖、克隆形成和成瘤能力.结论:组织表达分析和细胞功能试验都证实TIP30作为抑癌基因在胰腺癌发生发展中起重要作用,为胰腺癌的治疗提供新的研究方向.