Flag和GFP双标记的BKCa通道α亚基表达质粒的构建、鉴定和序列分析

目的：采用重叠PCR法构建表达质粒,为下一步研究通道功能奠定基础。方法：在已有编码大电导钙激活钾通道（BK_Ca）通道α亚单位的表达质粒pcDNA3.1-hSlo的基础上,采用重叠PCR法构建Flag和GFP双标签标记的表达质粒pcDNA3.1-Flag-hSlo-GFP （Flag-hSlo-GFP）。结果：构建的表达质粒Flag标签插入BK_Ca通道的S1-S2胞外环,GFP标签连接BK_Ca通道的胞内C末端,测序结果证实质粒构建成功。结论：成功构建BK通道基因表达质粒Flag-hSlo-GFP,重叠PCR能够很好的用于长片段基因扩增和插入片段的实验。     

颈动脉超声定量参数联合MPV/PC比值、NLR对急性缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值

摘要 目的：探讨颈动脉超声定量参数联合平均血小板体积（MPV）/血小板计数（PC）比值、中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）对急性缺血性脑卒中（AIS）患者预后不良的预测价值。方法：选择2020年3月至2022年3月合肥市第二人民医院收治的97例AIS患者,所有患者均行颈动脉超声检查和血常规检查,获得颈动脉超声定量参数,计算MPV/PC比值、NLR。出院后90 d采用改良Rankin量表（mRS）评估患者预后,将患者分为预后不良组和预后良好组。受试者工作特征（ROC）曲线分析颈动脉超声定量参数、MPV/PC比值、NLR联合预测AIS患者预后不良的价值。结果：预后不良组动脉内膜中层厚度（IMT）、舒张末期血流速度（EDV）、MPV/PC比值、NLR大于预后良好组（P＜0.05）,收缩期峰值血流速度（PSV）小于预后良好组（P＜0.05）。IMT、PSV、EDV、MPV/PC比值、NLR预测AIS患者预后不良的曲线下面积分别为0.751、0.710、0.693、0.769、0.771,联合IMT、PSV、EDV、MPV/PC比值、NLR预测AIS患者预后不良的曲线下面积为0.883,高于单独指标预测。结论：颈动脉超声定量参数联合MPV/PC比值、NLR在AIS患者预后不良评估中具有较高的预测价值。