小鼠动物实验方法系列专题(二) 肝脏大部分切除实验在小鼠肝再生研究中的应用

小鼠肝大部分切除(partial hepatectomy,PH)实验是研究肝再生的一个重要的实验。本文以C57小鼠为例,对肝大部分切除实验做了较为详细的介绍。实验结果显示,在术后的1～8天,小鼠的肝脏体重比值逐渐增加,在术后的7～10天里可以达到原来肝重的90%以上,10天以后肝细胞停止分裂。正常情况下,实施肝大部分切除后,小鼠的存活率可以达到90%以上。该模型的建立为研究肝脏再生的细胞和分子生物学机制奠定了基础。     

斑蝥酸钠与喜树碱联用抗肿瘤效果的实验研究

斑蝥酸钠(sodium cantharidinate,SCA)和喜树碱(camptothecin,CPT)均已在临床用于肿瘤的治疗。该文就SCA与CPT联合用药在体外和体内对肿瘤细胞的生长抑制作用进行了研究。结果表明,两种药物的联合使用可增强对肺癌细胞系A549和肝癌细胞系Hep3B的体外增殖的抑制作用,且不同浓度配比下联用组的CI值均小于1,表现出了协同效应。利用肿瘤移植后的斑马鱼胚胎作为模型,研究结果证明,和单药作用相比,SCA和CPT联合应用可以显著抑制斑马鱼胚胎中A549细胞的增殖和扩散,且在实验剂量下,两者的合用对斑马鱼的胚胎发育没有明显的影响。另外,还发现CPT能够抑制斑马鱼胚胎的鳍发育,并对其血管生成产生抑制作用。该文的研究结果对于临床上联合使用SCA和CPT治疗相关肿瘤提供了有用的实验数据。     

抗小鼠PLRP1多克隆抗体的制备以及特异性鉴定和应用

小鼠胰泡细胞表达和分泌一种被称为胰甘油三脂酶(PTL)的脂肪酶,主要参与食物来源的甘油三脂的消化吸收,胰泡细胞同时也表达胰脂肪酶相关蛋白1(PLRP1),它同PTL具有很高的同源性．为了研究PLRP1的生物学功能,需要制备其抗体．应用谷胱甘肽S-转移酶(GST)表达系统表达了GST融合蛋白,亲和纯化后用以免疫新西兰大白兔,获得了抗PLRP1的多克隆抗体．免疫印迹分析表明,该多克隆抗血清能检测出0.6 ng的融合蛋白抗原以及在3 μg的小鼠胰液提取物中检测出PLRP1蛋白．在证明抗体的特异性方面,尝试了一种新的方法：用PLRP1基因剔除的小鼠作为阴性对照,通过免疫印迹和免疫组化实验证明了该多克隆抗血清具有很高的特异性．进一步的研究发现,进食能促进胰腺中PLRP1的外分泌,这表明PLRP1可能在食物的消化过程中具有一定的生物学功能．