地芽孢杆菌Y565-5分离鉴定及其木糖异构酶基因xylA的克隆表达和酶学性质

从甘肃玉门油田地表土中分离到一株嗜热木糖利用菌,地芽孢杆菌Y565-5。利用PCR方法从该菌株中克隆得到一个木糖异构酶基因,xylA。该基因开放阅读框长1182 bp,编码394个氨基酸,XylA氨基酸序列与Geobacillus sp.Y412MC52相似性达到99%。将xylA基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,得到重组质粒pET-28a(+)-xylA,然后将此重组质粒转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳检测出明显的45 kD(相对分子质量)特异性蛋白质条带,并且通过半胱氨酸咔唑法检测出表达产物具有木糖异构酶的活性。对其酶学性质的研究发现,XylA最适温度为90°C,最适pH值为8.0。     

索骨丹提取物抗氧化及对乳腺癌细胞的抑制作用

探讨索骨丹提取物的抗氧化作用及体外对乳腺癌细胞生长的影响.通过自氧化方法测定索骨丹提取物对超氧阴离子的清除能力;用MTT法测定索骨丹对乳腺癌细胞的影响.结果显示,索骨丹水提取物、索骨丹鞣质及蒽醌在浓度0.5～3.0 mg·mL1范围内对超氧阴离子的抑制作用随浓度的增加而增强;索骨丹乙酸乙酯提取物对乳腺癌细胞的生长在经过48h和72h作用后最大抑制率分别为57.9％和67.7％.结果表明,索骨丹提取物具有强的抗氧化活性,并对乳腺癌细胞的生长繁殖有较强的抑制作用.