表皮生长因子受体基因突变检测方法改进及初步临床验证

目的:改进现有的检测表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的荧光PCR法并开发出新的试剂盒,将其与直接测序法和ARMS法进行对比,验证该试剂盒用于临床诊断的敏感性、特异性和准确性。方法:收集2013年6月至2015年8月手术确诊的141例非小细胞肺癌(NSCLC)的石蜡包埋组织标本。采用盲法分别使用直接测序法、ARMS法和新试剂盒检测EGFR突变,比较新试剂盒与其他两种检测方法的差异,结果不一致时采用三种方法分别重复检验一次。结果:三种方法检测成功率均为100%,新试剂盒与直接测序法测得结果完全一致的比率达75.9%(107/141),在直接测序法测得的96例突变阳性中,92例在新试剂盒检测中得到验证(95.8%)。而直接测序法显示突变阴性的45例中,新试剂盒检测发现了23例突变阳性,两种检测方法的结果存在统计学差异(x2=40.745,P0.05)。与直接测序法进行比较,新试剂盒检测EGFR突变的敏感性、特异性分别为95.8%、48.9%,阳性预测值、阴性预测值分别为80.0%、84.6%,检测准确度为80.9%。以ARMS检测法为金标准,新试剂盒测得结果完全一致的比率达84.4%(119/141),两者的一致性比较好(K=0.749,P0.05),敏感性、特异性分别为94.1%、86.4%。结论:改进后EGFR基因突变检测的试剂盒在技术上较好地控制了检测结果的假阳性和假阴性,该检测方法较直接测序法具有更好的敏感性和准确性,与现有的ARMS法一致性较高。     

锡嘴雀中脑背外侧核的听觉传入系统

鸟类的中脑背外侧核(Nucleus mesencephalicus lateralis,pars dorsalis;MLd)相当于哺乳类的下丘,与听觉传入有关。 本实验选用成年锡嘴雀(Cocoothraustes cocoothraustes)21只(10 11)。经轻度麻醉后,于中脑背外侧核(Po.3,LR 2.7—3.2,H8.0—8.5)注入30％HRP(Sigma Ⅵ)溶液0.1—0.4μl。动物存活36—48小时,颈动脉灌流固定后取脑,连续冰冻切片,片厚40     

介绍一点打猎经验

我愿意把我学得的一点打猎的常识献给为了实习或是为了获取兽类标本而暂时从事打猎的人们。打猎必须经过找兽迹、放猎犬、扎线口、鸣猎枪四个或者三、二至少是一个阶段。现在来依次加以介绍。一、找兽迹猎兽初,当你还不能肯定山里有无兽类存在,但为了有把握地围猎野兽,就得先找野兽的行迹。在自然界里,有不少野兽是以庄稼为食的。因而可到庄稼地里去找。到山林里的小道上去固然可以找到兽迹,但不如耕地里面的清楚易见;同时,庄稼地比山路要好走一些。但在收藏季节,当然只有到山路上去找,因为野     

叶龄及树冠不同部位光强对黄花梨光合速率的影响

笔者以黄花梨为试材,研究了叶龄及树冠不同部位光强对其光合速率的影响。结果表明:黄花梨叶片在展叶后约11天即有少量光合产物输出,25天时,单叶净光合速率接近最大值;密植梨树高光合叶幕厚度约125cm左右。     

哺乳动物卵子的透明带

哺乳动物的卵子表面由透明带所包围,已知透明带可被蛋白质分解酶、低PH、氧化剂、还原剂以及热处理等溶解破坏.有关透明带的来源,过去曾认为是由卵子颗粒层细胞,或是卵细胞,以及由两者共同产生.最近的研究表明,透明带是由卵细胞所产生.目前一般认为卵子的透明带在受精时,可起到种间识别、阻止多精子受精以及在着床前保护受精卵的作用.此外,透明带还具     

羊草草地枯枝落叶中N,P,K变化动态

羊草草地枯枝落叶中Ｎ、Ｐ、Ｋ变化动态郭继勋,祝廷成（东北师范大学国家草地生态工程实验室,长春１３００２４）ＤｙｎａｍｉｃｓｏｆＮ,ＰａｎｄＫｉｎｌｉｔｔｅｒｓｏｎＡｎｅｕｒｏｌｏｐｉｄｉｕｍｃｈｉｎｅｎｓｅｇｒａｓｓｌａｎｄ．￥ＧｕｏＪｉｘｕｎａｎｄ...     

人凝血因子Ⅷ遗传工程研究进展

早在一千七百多年前,人们就认识到甲型血友病是一种出血性絮乱。直到1937年才证实FⅧ在血友病发病中起关键作用。然而有关FⅧ的详细生化特征和结构特征在最近的10年才搞清楚。 治疗甲型血友病主要采取多次输入从人血浆中浓缩的FⅧ。虽然这种替代治疗能有效地控制阵发性出血,但还存在如下严重问题。首先,患者有感染病毒性疾病如病毒性肝炎和艾滋病的危险。通过增加灭活病毒步骤以及运用单克隆抗体进一步纯化FⅧ已显著降低了患者感染病毒的危险。然而这一制备FⅧ的过程却提高了成本,从而使治疗费用大为增加。其次,由于血浆FⅧ存在时间的限制,患者需要经常地预防性治疗。这种治疗法能导致关节慢性出血,组织损伤。此外,频繁地静脉输入FⅧ,还会引起诸如寻找外