"活的非可培养状态"细菌荧光观察方法

目的：建立一套稳定、简便、快捷,可靠的细菌活的非可培养状态（VBNC）荧光显微镜观察方法。利用市售的黑色钢笔墨水着染微孔滤膜,然后采用手动压片方式,将经LIVE/DEAD BacLightTM Bacterial Viability Kit（13152）染色的细菌样本固定在滤膜上,用落射荧光显微镜直接观察。结果：该法所得的荧光图像背景无光亮且黑暗,菌体荧光、形态、排列等均清晰可见,而且呈现绿色荧光的活菌与呈现红色荧光的死菌较易分辨。与现行技术相比,还能缩短染色时间近12～16h。结论：建立的VBNC细菌荧光观察方法能有效地克服现有技术存在的适用范围狭窄、取材困难、观察结果不准确、操作时间长等缺点,可为细菌VBNC研究提供值得借鉴的方法。     

鸽源H5N1亚型禽流感病毒株的HA和NA基因特征性分析

本研究自行设计合成两对特异性引物,通过RT-PCR扩增出1株鸽源H5N1亚型禽流感病毒血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）两个基因的cDNA片段,将它们成功克隆于pMD18-T载体上,然后进行序列测定。结果表明,HA基因全长1707bp,编码568个氨基酸, HA基因有7个糖基化位点,在裂解位点附近有连续6个碱性氨基酸（R-R-R-K-K-R）的插入,具有高致病性毒株的分子特征。受体结合位点的氨基酸分别为YWIHELY,左侧壁氨基酸为SGVSSA,右侧壁为NGQSGR;NA基因全长1350bp,编码446个氨基酸,NA基因有3个糖基化位点。     

奶犊牛直肠主要正常菌群的检测及其定植规律

采用稀释滴种法,对奶犊牛直肠内容物8种主要正常菌群（双歧杆菌、乳杆菌、真杆菌、类杆菌、大肠杆菌、消化球菌、梭菌、肠球菌）进行定性和定量分析,将所得结果进行统计学处理,得到奶犊牛直肠八种主要正常菌群的对数均值。犊牛出生6h后可检测到大肠菌、类杆菌和梭菌;12h后,8种菌群全部检测出来,并以大肠杆菌、类杆菌和梭菌为优势菌。随着厌氧菌大量增殖,需氧菌和兼性厌菌逐渐下降,1周后形成以乳杆菌、双歧杆菌为优势菌群的微生态区系。8种细菌的数量随饲草采食量增加呈下降趋势。断奶后1个月完成定植,此时直肠的优势菌是双枝杆菌、真杆菌,为7－8（logCFU/g),然后依次为乳杆菌、梭菌7(logCFU/g),类杆菌、大肠杆菌、消化球菌6(logCFU/g) ,肠球菌5（logCFU/g)。     

酵母富集微量元素铁的研究

目的：利用酵母细胞将无机态微量元素铁转化为有机态微量元素铁。方法：采用富集培养方法,从22株酵母菌中筛选出1株能够富集高含量铁的菌株,并测定其铁含量,同时对酵母菌最适生长条件,铁盐的筛选和硫酸亚铁添加浓度进行研究。结果：铁含量达6～8mg/g,适宜的铁盐为硫酸亚铁,其添加的离子浓度为60～120mg/kg,最适培养温度和pH分为28℃和5.5。结论：在上述优化条件下,酵母细胞富集铁能力最强。