糖的有色试剂标记微量测定法

本文报告用有色试剂4-N,N-二甲氨基-4′-氨基偶氮苯标记还原糖。标记产物可在聚酰胺薄膜上经双向层析分离鉴定。用盐酸熏后,标记产物由黄绿色转为蓝紫色。灵敏度达10~(-9)～10~(-10)克分子糖。本法可鉴定寡糖的组成成分和聚合度;结合酶解可鉴定寡糖的还原末端。     

高活性辣根过氧化物酶的制备

过氧化物酶是一类每个分子含有一个正铁血红素Ⅸ的蛋白质,存在于竹笋、箩卜、辣根等十五种以上的植物中,其中以辣根的含量为高。来源于辣根的,即称辣根过氧化物酶,其分子量为40,000。它是一种糖蛋白,糖的含量达到18％(W/W),有特殊的吸收光谱,在403     

肌肉蛋白的免疫化学研究——Ⅱ.软骨鱼系原肌球蛋白免疫化学的若干有关数据

在前文中我们报导了软骨鱼系原肌球蛋白的若干免疫化学性质。根据琼脂电泳、免疫电泳和琼脂双扩散反应,检出用其他化学或物理化学方法所未能检出的不均一性,并根据电泳移动速度,在(?)和鯊原肌球蛋白中,找到“快速泳动”和“慢速泳动”两部分。这两     

氨基酸定性分析技术的一些改进 Ⅰ.快速水解和高温滤纸层析

(1)提供了一种快速水解液,蛋白貭或多肽完全水解仅需20分鉀至2小时,其配制方法是:12NHCl:85%甲酸:水=2∶1∶1。水解温度160—180度。(2)提供了氨基酸高溫层析法及正丁醇:呲啶系統可在4小时內完成单向层析,10小时內完成双向层析,其溶剂系統各成分的比例如下: 酸性溶剂系統:(1)正丁醇:85%甲酸:水=15∶3∶2。(2)正丁醇:冰醋酸:95%乙醇:水=4∶1∶1∶2。溶剂(1)适用于单向层析和双向层析的第一向,溶剂(2)适用于单向层析。硷性溶剂系統:正丁醇:呲啶:60%乙醇:水=5∶1∶1∶1。此溶剂适用于双向层析的第二向。(3)高溫层析的温度有二种:(1)在40—45度进行(2)60度进行一半移室温完成。前者較易操作,重复性也較強。(4)引用了等的吲(口乃木)醌显色法,对氨基酸的分辨极有帮助,并发現一些氨基酸的衍生物或多肽也均显不同顏色。(5)經选择后的新华定性滤紙层析效果頗佳。     

兔抗葡聚糖硫酸钠—LRH血清在大白鼠下丘脑正中隆起LRH定位工作中的应用

以 DS—LRH 作为免疫原,所产生的免疫血清可以不经载体吸收,直接用于 LRH 的辣根过氧化物酶免疫标记定位。本文即以这种免疫血清研究正常雌性成年大白鼠下丘脑正中隆起 LRH 的分布,着重于尾端。在光学显微镜下观察,酶免疫标记的 LRH 呈棕色细颗粒,大小不一,排列成串珠状,有一定走向。根据连续切片,计算所取的大白鼠下丘脑正中隆起的长度,从漏斗隐窝开始到漏斗柄与脑基部完全分离,全长大约是1,500—1,800微米。将此范围分为四小段,分析 LRH 分布情况,可以认为 LRH 是在神经纤维末梢,在下丘脑正中隆起外区靠近门脉毛细血管的轴突末梢內。     

副肌球蛋白长带的细微结构

(1)用局部酶解方法,发现河蚌白闭壳肌的副肌球蛋白长带系由许多微丝组成,微丝直径约30A。(2)由于这些微丝束在完全松散前,仍呈现145A及70A横纹结构,而副肌球蛋白类晶体也具有类似的结构,我们推测微丝主要是由副肌球蛋白分子直线聚合而形成的。(3)用局部酶解方法,可以任意重现副肌球蛋白长带的点阵结构。(4)在副肌球蛋白长带中,存在有机械的弱点与酶解时易受作用之点,此结构上不均一性的物质基础尚不明了。     

副肌球蛋白和原肌球蛋白结构上的关系

(一)对同一河蚌斧足肌中共存的TM和PM,在分子大小形状、壹级结构若干特点和免疫专一性等几个方面进行了比较。也观察了同一河蚌的不同肌肉,即斧足肌与闭壳肌之间,同类蛋白质的异同。(二)在河蚌同一肌肉中并存的PM和TM分子大小截然不同;前者的初步数值靠近二十万,而后者约六万。在河蚌两种不同肌肉中的TM分子大小相同。(三)在抗原结构上,TM与PM有着本质上的差异,TM与PM同无免疫交叉反应。(四)TM与PM的酶解图谱属于两种不同的类型。(五)河蚌斧足肌和红、白两种闭壳肌的三种TM之同,免疫行为与酶解图谱极为相似,三种PM之间也极相似。(六)发现67%氯乙醇可使PM分子解聚成约51,000大小的亚基。(七)讨论了TM和PM的关系。从大的方面讲,TM和PM主要相同之处在于“零级”(氨基酸组成)或贰、叁级结构,主要不同之处在于壹级和肆级结构。TM和PM许多性质的同异,可以从这些结构上的同异来理解。看来TM和PM应是两类而非一类蛋白质。     

副肌球蛋白长带的细微结构

(1) 用局部酶解方法,发现河蚌白闭壳肌的副肌球蛋白长带系由许多微丝组成,微丝直径约30。(2) 由于这些微丝束在完全松散前,仍呈现145及70横纹结构,而副肌球蛋白类晶体也具有类似的结构,我们推测微丝主要是由副肌球蛋白分子直线聚合而形成的。(3) 用局部酶解方法,可以任意重现副肌球蛋白长带的点阵结构。(4) 在副肌球蛋白长带中,存在有机械的弱点与酶解时易受作用之点,此结构上不均一性的物质基础尚不明了。     

鲤(Cyprinus carpio)促性腺激素释放激素分泌核群的酶免疫细胞化学定位

利用抗DS-LRH 血清和PAP 免疫标记技术,作卵巢处于Ⅳ期的鲤鱼GRH 分泌核群定位,证叫NPO 系统是合成与释放GRH 的部位。NPO 细胞呈锥形,核周体有明显的棕色分泌颗粒,细胞核大,不着色。其神经纤维,含有棕色分泌颗粒者,排列呈串珠状,分布于(1)NPO 的周围,(2)前脑侧束区,(3)视前隐窝腹侧和尖端,(4)视交叉中部,(5)沿视束和下丘脑外侧区。对NPO 的功能进行了讨论。