细胞松弛素B对体外人体肝癌细胞系的生物学效应以及秋水仙素的增强作用

Carter 于1967年首先观察到细胞松弛素B(Cytochalasin B,简称CB)能诱发体外培养的小鼠L 细胞发生排核作用以及其它的一些生物学效应。嗣后,这一观察不仅在许多种细胞类型中相继得     

细胞排核的扫描电镜观察

本文借扫描电镜术比较了秋水仙素、细胞松弛素B(CB),以及这两种化合物并合作用下人肝癌BEL-7402系细胞表面形态学的差异。结果表明,秋水仙素与CB诱发细胞排核的模式迥然各异,证实了我们先前在光镜水平上的观察:前者可使排出的核体具有独自游走的能力,甚至完全脱离胞质体而移向外缘;而后者则无这种效应。若并合这两种因子处理细胞,胞质体裂解成大小不等的球状结构。此外,细胞表面微绒毛的变化与CB有关而与秋水仙素的作用无关。文内对细胞骨架与细胞排核及细胞运动的关系作了简要的讨论。     

松胞素B和离心术并用制备体外培养哺乳类细胞的核体与胞质体

Carter于1967年发现,松胞素B(Cytochalasin B),简称CB,能诱发体外培养哺乳类细胞发生排核作用。嗣后,     

人体肝癌细胞(BEL-7402系)体外生长行为的显微缩时电影观察

恶性肿瘤有丝分裂行为之异常,早在本世纪初就已被注意到(Lambert,1913;Boveri,1914)。自那时以来,许多肿瘤病理学及生物学工作者曾围绕着这一课题开展了大量的工作,并已在临床手术标本以及动物的原发灶与移植性肿瘤的种种材料中观察到异常有丝分裂的各类图形。然而,这些资料大多来自固定、染色的标本,而对其演变过程的动态分析则付缺如。直至五十年代前后起,随着细胞培养术的进展并借助显微缩时电影术,才陆续见有一些     

人抗药基因在小鼠ES细胞中的表达及嵌合体小鼠的研究

本文用磷酸钙沉淀法将含人mdrl 基因表达质粒(pHaMDR 1/A)转染到小鼠胚胎干细胞(ES-5),得到了四个能稳定地在含有200 ng/ml 秋水仙素培液中生长传代的细胞克隆。经Southern 印迹杂交及RNA 印迹杂交证明人mdrl 基因已整合到ES 细胞基因组,并有表达。其中两个克隆杂交信号较强,抗药基因可随秋水仙素浓度提高而扩增,表达量也随之增加。用抗该基因编码的p170糖蛋白抗体对ES-mdr 1细胞作免疫荧光染色,证实p170蛋白分布于细胞表面。未发现ES-mdr 1细胞的体内、外发育潜能与亲代细胞的有何差异。但是mdr1细胞不能被RA 和HMBA 化学药物诱导分化,表明这些细胞已与亲代ES-5细胞不同,具有拮抗化学药物诱导分化的作用,其机理尚待研究。因此,ES-mdr1细胞可作为在细胞水平研究p170糖蛋白作用机理的体系,也可用以建立体外筛选拮抗抗约基因作用新手段的模型。我们也得到了含人mdr1基因的嵌合小鼠,并对它们的嵌合情况作了分析。     

人体肝癌体外细胞系BEL-7402的建立及其特征

1974年初,我们新培养了几例外科手术切除的人体肝癌标本。其中一例能在体外连续培养,细胞生长迅速、恒定,能每隔6—7天传代一次,已传了261代,历时3(1/2)年,在液氮(-196℃)保存已2(1/2)年。此系细胞定名为BEL-7402。前文曾作简要报道(陈瑞铭等,1975),现将此系细胞的建系过程及其一些特征,包括:细胞的生长率、形态的分类、分裂指数、染色体组型分析、异种移植、甲胎蛋白检测、以及酶的组织化学反应等方面的观察结果,描述于下。     

鸡新城疫病毒介导的细胞融合

鉴于鸡新城疫病毒(NDV)对人体无致病力、来源方便等优点,本文应用其强毒株NC_(48)CE_8和弱毒株HB_1介导融合体外培养的哺乳类细胞,包括:人体肝癌BEL-7402和BEL-7404系细胞、人宫颈癌Hela 细胞、人羊膜FL 细胞以及小鼠A9/28 DKS 系细胞。在本实验的最适条件下,NC_(48)CE_8株与HB_1株介导BDL-7404系细胞的融合率分别高达86.9%和60.7%。NDV 介导的细胞融合率与其稀释度及细胞的种系密切有关。借显微缩时电影术示范了BEL-7404系细胞在NC_(48)CE_8株与HB_1株介导下的融合过程。亚显微结构的分析,示明BEL-7404系细胞的表面,特别是在细胞紧密邻接的区域存在着大量的微绒毛。文内对此及融合所需的实验条件作了讨论。     

体外连续培养的成人肝细胞的超显微结构

正常人和动物组织的成体细胞不易于体外生长、连续传代,因此,对二倍体细胞的体外研究,多采用胚胎或生后幼年时期的材料进行。这两个时期的组织细胞较易     

癌细胞抗药性的分子基础

在分子水平上研究肿瘤细胞的抗药机理业已取得重大进展。抗药基因的分离成功及其产物P-膜糖蛋白之阐明,在抗药基因的结构与功能研究方面已进入了一个新阶段,且引向临床应用之探索。本文仅就抗药细胞之选择、遗传学特征、抗药基因的顺序分析及P-膜糖蛋白的结构以及基因的扩增、表达与转移等诸方面作了概述。对抗药基因研究之临床应用可行性亦作了探讨。     

三系人肝癌细胞体外长期培养后仍保持人肝癌的相关特性

本文就癌基因、特异性的单克隆抗体、细胞骨架的中等纤维之构型以及内源抗药性等诺方面,论证了本所于1974年间建立的三系人肝癌细胞在体外长期培养和冻存后,仍然具有人肝癌细胞之特征。