血清HA、β2-MG、Flt3L联合检测对成人急性髓系白血病短期预后的评估价值

摘要 目的：分析血清透明质酸（HA）、β2微球蛋白（β2-MG）、FMS样络氨酸激酶3配体（Flt3L）联合检测对成人急性髓系白血病（AML）短期预后的评估价值。方法：选取我院2018年1月～2020年12月收治的100例成人AML患者,记作研究组,另取同期健康体检者100例作为对照组,检测并对比两组血清HA、β2-MG、Flt3L水平。此外,100例成人AML患者根据1年生存预后的差异分作死亡组和存活组,对比两组血清HA、β2-MG、Flt3L水平及各项基线资料,采用多因素Logistic回归分析成人AML患者短期预后的影响因素,采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清HA、β2-MG、Flt3L联合检测预测成人AML患者短期预后的效能。结果：研究组患者的血清HA、β2-MG水平高于对照组受试者,而Flt3L水平低于对照组受试者（P＜0.05）。死亡组患者的血清HA、β2-MG水平高于存活组患者,而Flt3L水平低于存活组患者（P＜0.05）。单因素分析结果显示,死亡组年龄≥60岁、继发性AML以及未接受过诱导化疗的患者比例高于存活组（P＜0.05）。进一步多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁、继发性AML、未诱导化疗以及血清HA、β2-MG升高是成人AML患者短期预后的不利影响因素（P＜0.05）,而血清Flt3L水平升高是成人AML患者短期预后的有利影响因素（P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示,血清HA、β2-MG、Flt3L联合检测预测成人AML患者短期死亡的曲线下面积为0.874、灵敏度为88.91%、特异度为86.43%,均高于上述三项指标单独检测。结论：血清HA、β2-MG、Flt3L联合检测对成人AML短期预后的评估价值较高,临床上可推广应用。     

血管性血友病因子裂解蛋白酶的稳定表达及其活性检测

本研究旨在得到重组的血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13),进一步研究其在血栓止血中的作用。利用脂质体将编码ADAMTS13全长序列的重组质粒pSecTag-ADAMTS13转染Hela细胞,用潮霉素(Hygromycin-B)筛选得到阳性克隆细胞株,并扩大培养,收集上清。利用Ni-NTA琼脂糖柱、梯度咪唑淋洗法纯化蛋白,SDS-PAGE和Westernblotting鉴定纯化产品纯度和免疫学活性,采用GST-His双抗夹心法测定蛋白剪切活性。结果显示,成功获得一株能恒定分泌重组ADAMTS13蛋白的细胞株ADAMTS2-4,每1L培养上清可纯化得到5.8mg重组蛋白。Western blotting结果显示,ADAMTS13多抗能与重组蛋白在190kDa处显单一条带,并且蛋白具有6.4U/mL的剪切活性(每毫升正常人混合血浆中ADAMTS13活性为1U)。重组蛋白具有较好的免疫原活性和酶活性,为进一步研究ADAMTS13作用机理和运用奠定了良好的基础。