对现实主义原理的新认识：以生物演化为例

虽然现代地质学的形成在很大程度上依赖于现实主义原理,但人们发现还需要重新认识这一假定的意义,即对越夹越多的地质现象的解释,需要依赖于那些在当今地球上观察不到的地质作用。在地质学中,我们必须考虑如何解释那些发生在远古时期的地质现象。那时的地球具有与现在不同的温度,大气的组成也十分不同,或地壳还没有发展到今     

猪卵母细胞c-mos基因表达以及RNA干扰

c-mos基因在动物卵母细胞减数分裂调控中起作用,但其作用机制目前仍不清楚。本实验通过RT-PCR、免疫荧光激光共聚焦检测方法检测了猪卵母细胞在体外成熟培养过程中c-mos基因在转录水平、翻译水平上的表达以及蛋白的分布,并应用注射小干扰RNA(siRNA)方法对其进行了RNA干扰(RNAi)研究。结果显示,猪卵母细胞在体外成熟培养过程中c-mos基因mRNA量逐渐增高,电激活后6h接近完全降解;MOS(c-mos基因蛋白产物)在GV卵母细胞生发泡中有一定量的表达,生发泡破裂(GVBD)前表达量增加且开始向卵母细胞胞质弥散,成熟培养44h未成熟卵母细胞中的MOS表达量要高于成熟卵母细胞,激活后6h核区MOS明显减少,但仍然有少量MOS分布于胞质中;成熟培养前干扰c-mos基因,所用三个siRNA都能成功敲低mRNA量,分别是同时期对照组mRNA量的0.08±0.03,0.11±0.06和0.20±0.06倍,干扰后虽然没有完全剔除MOS,但MOS量比同期卵母细胞有明显下降,仍可以引发成熟卵母细胞染色体解凝集。研究结果揭示了猪卵母细胞体外成熟及发育进程中c-mos基因在转录和翻译水平上的动态表达规律,建立了猪卵母细胞c-mos基因RNAi体系,为MOS在猪卵母细胞发育过程中的功能研究建立了重要的基础。     

人ApoE转基因小鼠与TGE_（7－2） TGE_（7－3）转基因鼠系的建立

用含小鼠金属硫蛋白（ＭＴ－１）基因启动子与突变的人ＡｐｏＥ７基因的６．０ＫｂＤＮＡ片段作为目的基因制备转基因小鼠,利用显微注射法将目的基因导入４４１枚受精卵,移植于２０只假孕鼠,其中１５只受孕,共产仔鼠８０只,经ａ－３２Ｐ斑点杂交与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法鉴定出两只整合有人ＡｐｏＥ基因的转基因雌鼠,其拷贝数分别为２和５。将两只首建鼠（雌性Ｆｏ代）与正常雄鼠交配,建立Ｆ１代转基因鼠系ＴＧＥ７－２和ＴＧＥ７－３,为进一步从整体上研究ＡｐｏＥ在脂质代谢中的作用以及ＡｐｏＥ与动脉粥样硬化和Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病的关系创造条件。     

小半夏加茯苓汤对小鼠移植心存活时间的延长效果研究

目的:探讨小半夏加茯苓汤对小鼠心脏移植模型中移植心存活时间的延长效果及作用机制。方法:将接受过腹腔心脏移植手术的小鼠分为实验组和对照组,自移植手术当日起至术后7天,每日经口给药,通过腹部触诊判断移植心脏跳动情况,移植术后30日,取部分小鼠移植心脏进行病理检查,取脾细胞进行淋巴细胞培养,并检测培养液中白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10和干扰素(IFN)-γ的浓度。取移植心脏存活时间超过30天的小鼠脾脏,通过流式细胞术检测调节性T细胞(Regulatory Tcells,Tregs)的含量。结果:与对照组相比,实验组的移植心存活时间明显延长(P0.01),心脏病理切片结果提示实验组的心脏血管病变受到了抑制,脾细胞培养液中IL-2和IFN-γ浓度明显降低,而IL-4和IL-10的浓度升高,脾细胞CD4阳性细胞中CD25和Foxp3均阳性的细胞含量明显高于对照组中同类细胞含量。结论:小半夏加茯苓汤可以显著延长小鼠移植心脏的存活时间,可能与其诱导调节T细胞的产生、改变受体小鼠体内Th-1和Th-2细胞因子的平衡及抑制IL-2、IFN-γ减轻心脏损伤有关。     

体细胞核移植克隆民猪: 培养液对卵母细胞成熟及胚胎发育的影响

体外培养成熟的卵母细胞是进行克隆猪研究所需受体卵母细胞的主要来源, 卵母细胞成熟质量与体细胞核移植胚胎发育能力关系密切. 为提高卵母细胞体外成熟率和成熟质量, 进而提高体细胞核移植猪的成功率, 本实验以改进的TCM199培养液为基础液(T), 分别添加10%的猪卵泡液(T+pFF)和 10%的胎牛血清(T+FBS)后进行卵母细胞成熟培养, 以成熟率和体细胞核移植胚胎发育率等重要指标为标准, 研究了pFF和FBS对卵母细胞成熟及核移植胚胎发育能力的影响. T, T+pFF和T+FBS组在成熟培养后42 h卵母细胞成熟率分别为(53.2±3.8)%, (69.7±3.8)%和(70.2±3.7)%, 添加10%的pFF和FBS显著(P<0.05)提高了卵母细胞成熟率; 3组不同成熟培养液获得的成熟卵母细胞在体细胞核移植后囊胚发育率差异不显著, 但T+pFF组的囊胚细胞数(34.5±2.24)显著(P<0.05)高于T组的囊胚细胞数(26.6±1.25). 来自T+pFF组的体细胞核移植胚胎经手术法移植入发情周期为第0天或第1天的18头受体母猪输卵管, 其中有3头受体母猪妊娠发育到期, 获得克隆民猪14头, 其中有6头健康成活至今. 实验结果表明, 培养液中添加10%pFF可以有效提高卵母细胞成熟比例和成熟质量, 在含有10% pFF培养液中获得的成熟卵母细胞具有支持核移植胚胎全程发育的能力.     

记黑颏穗鹛与白眉黄臀鹎的发现

<正>我曾经有个梦想——沿着祖国的边境线去看鸟,找寻和发现中国的鸟种新记录。然而现实却是,绵延边境线上的多数地区人口稀少、交通不便,我想去的许多地方只能停留在梦里。庆幸的是也有一些地方,如西藏日喀则地区的樟木镇,因其是重要的中国与尼泊尔的通商口岸,有交通工具可到达;云南的西双版纳更是驰名中外的旅游胜地,随时可以去造访。     

小鼠主动脉平滑肌细胞的分离培养及鉴定

目的:建立分离培养小鼠原代主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的方法并检测其生长特性。方法:剥离小鼠主动脉中膜层,分别采用组织块培养法及胶原酶消化法分离培养小鼠主动脉来源的原代VSMC,免疫荧光法检测细胞的纯度和分化状态;3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法测定小鼠主动脉VSMC传代细胞的生长、增殖特性。结果:组织块培养法培养组织块8d后,细胞从组织块边缘爬出,18 d后细胞汇合度达到80%以上后传代;胶原酶消化法分离培养的细胞生长7 d后,汇合度可达80%,此时进行传代;2种方法获得的细胞进行免疫荧光染色,结果显示细胞传至第3代时纯度在95%以上,传至第8代时分化状态并没有改变;MTT法显示细胞生长3~5 d时处于指数生长期。结论:本研究建立了2种可靠稳定的分离和培养小鼠主动脉VSMC的方法,VSMC纯度高,多次传代后细胞特征稳定。     

中国鸟类种新记录——黑颏穗鹛

2010年2月12-13日,在西藏日喀则樟木镇海拔2070m及1900m处的公路旁分别观察并拍摄到一种鸟类.根据观察资料及所拍照片,鉴定为黑颏穗鹛(Stachyris pyrrhops)(图1).经查阅文献(Zheng,2002;Zheng,2005)属鹟科(Turdinae)画鹛亚科(Timaliinae)穗鹛属(Stachyris)的中国鸟类新记录,特此报道.     

人NDRG2启动子的克隆与活性鉴定

目的:克隆人NDRG2的启动子,并进行启动子的活性鉴定。方法:用Advantage-GC Taq酶,采用PCR方法,以BCA克隆R-998D1为模板,克隆人NDRG2(-1455/ 274)的启动子。分别构建NDRG2(-1131/ 274)、NDRG2(-273/ 274)、NDRG2(-135/ 274)、NDRG2(-79/ 274)和NDRG2(-79/ 57)等不同长度的截短体,并分别亚克隆入pGL3-basic报告基因载体,测序鉴定。分别转染HEK293和HeLa细胞后,运用双荧光报告基因系统进行启动子活性分析,从而判断核心启动子的位置。结果:人NDRG2的启动子克隆成功,并构建了不同长度的截短体,DNA测序结果与报道一致。报告基因分析结果将人NDRG2启动子的核心区域定位于NDRG2(-79/ 57)。结论:随着人NDRG2的启动子的长度逐渐被截短,启动子的基础活性也逐渐降低,可将人NDRG2启动子的核心区域定位于NDRG2(-79/ 57)。