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目的建立一种准确、可靠的鉴定都柏林念珠菌基因型的方法。方法临床念珠菌分离自临床生殖器念珠菌病患者,45℃温度试验时几乎不生长,且其他表型实验结果也符合都柏林念珠菌特征。对41例临床念珠菌和1例白念珠菌标准株、1例都柏林念珠菌标准株rDNA内部转录间隔区的基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增,HpyF10Ⅵ酶切后观察PAGE图谱。结果聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)后,39例临床株鉴定为白念珠菌。2例临床菌株带型特殊,测序后行BLAST比对分析,1例鉴定为白念珠菌,另1例尚不能肯定为都柏林念珠菌,还需要进一步以其他分子生物学方法鉴定。结论PCR-RFLP方法酶切后两种念珠菌带型区分明显,可以鉴别大部分临床菌株。基因测序是该方法有意义的补充。 相似文献
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分离和鉴定沙冬青抗冻蛋白质 总被引:3,自引:0,他引:3
采用经典的蛋白质色谱技术,纯化沙冬青( Ammopiptanthus mongolicus (Maxim .) Chengf.) 叶片中的抗冻蛋白质,然后经非变性PAGE胶分离、回收,得到具有热滞活性的两条带:B1 和B3。前者在8 g/L时热滞活性为0.46 ℃,并在SDS_PAGE胶上分离出两条带( 分子量为67 kD和21 kD) ;后者在10 g/L时热滞活性为0.45 ℃,在SDS_PAGE胶上只有1 条带( 分子量为39.8 kD)。B1 和B3 均不能被Shiff 试剂染色,也不具有典型糖蛋白的紫外吸收特征,因而可能不是糖蛋白 相似文献
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沙冬青叶片热稳定抗冻蛋白特性分析 总被引:14,自引:0,他引:14
用双向电泳电泳回收法从沙冬青( Ammopiptanthus mongolicus(Maxim .) Chengf.) 叶片热稳定蛋白质中分离到一种抗冻蛋白afp,其分子量为40 kD,pI为9.0 ,热滞活性为0 .9 ℃(20 mg/mL) ,和其他抗冻蛋白进行比较,没有发现相同的类型。afp N 端序列为SDDLSFTFNKFVPCQTDILF。afp 在沙冬青体内广泛分布且叶片含量较高,可能是沙冬青抗冻生理过程中的主要物质,对于沙冬青抵御冬季冷冻温度具有重要的作用。 相似文献