正交试验优选环草石斛(D.loddigesii Rolfe.)组培苗壮苗生产工艺

采取正交试验设计对环草石斛(Dendrobium loddigesiiRolfe.)组培苗壮苗进行了优化生产工艺研究,以培养基(A)、添加物马铃薯汁液(B)、激素NAA(C)和pH值(D)为因素,以环草石斛组培苗的株高(cm)、茎粗(cm)、叶片数、叶面积(cm2)、根数、根长(cm)、丛生芽数、单株鲜重(g)等各个性状的增加值为考察指标,优选环草石斛组培苗壮苗的生产工艺。其中自己设计了一种改良培养基(WM),结果显示,改良培养基、添加物马铃薯汁液、激素NAA和pH值均对环草石斛组培苗壮苗产生显著影响,其影响程度为培养基>pH>马铃薯汁液>NAA。由此正交试验筛选出环草石斛组培苗壮苗较优生产工艺为A3B3C3D2,即培养基WM,添加马铃薯汁液200 g/L,NAA2 mg/L,pH值5.6。优选出的壮苗工艺经济,简便,苗壮根多且长,适宜工厂化生产。     

钩藤的组织培养与植株再生

1植物名称钩藤[Uncariarhynchophylla(Miq.)Jacks.]。2材料类别成熟种子。3培养条件以B5为基本培养基。(1)种子萌发培养基:加活性炭和不加活性炭的B5(不含任何激素);(2)增殖培养基:B5+6-BA2.0mg·L-1(单位下同)+NAA0.2+0.2%活性炭;(3)生根培养基:B5+NAA0.5+0.2%活性炭。上述培养基均附加3%蔗糖和0.8%琼脂粉,pH5.8。培养温度为(25±2)℃,光照时间12h·d-1,光强为30～40μmol·m-2·s-1。4生长及分化情况4.1无菌材料的获得参考张建康等(2005)的方法,选取成熟饱满、色泽好且未开裂的蒴果,先用70%的酒精进行表面消毒30s,再用0.1%的升汞溶…     

杜鹃兰的组织培养与植株再生

1植物名称杜鹃兰(Cremastra appendiculata). 2材料类别自然条件下杜鹃兰种子萌发形成的原球茎. 3培养条件基本培养基为MS.(1)无菌材料的建立培养基:MS NAA 0.2 mg·L-1(单位下同);(2)增殖培养基:MS 6-BA 6.0 NAA 0.3;(3)分化培养基:MS 6-BA 2.0 NAA 0.3;(4)生根培养基:1/2MS NAA 0.5.以上培养基均附加2%蔗糖、0.8%琼脂粉和0.2%活性炭,pH 5.8.培养温度为(25±1)℃,光照时间12 h·d-1,光照度为1500l x.     

黄连细胞培养物中小檗碱的分离与鉴定

用黄连幼叶切块,接种在含1．0～2．0mg／L 2,4-D和0．1mg／LKT的6．7-v固体培养基上,诱导形成愈伤组织。选择较松散的愈伤组织转入液体悬浮培养,获得游离细胞和细胞聚集体。通过平板培养和细胞株的筛选．选择小檗碱含量较高的细胞株。经35次转代培养后,进行固体、液体培养。收集悬浮培养细胞进行化学提取和分离,获得黄色晶体,经TLc、UV、IR、MS鉴定分析为小檗碱,与天然植物提取分离的小檗碱具有相同的生理活性。     

蔗糖和硝酸铵对黄连悬浮培养细胞生长和小檗碱含量的影响

在６、７－Ｖ液体培养基中较为适合黄连细胞生长的蔗糖浓度为．３％,当蔗糖浓度增加到７％时,细胞生长速率开始下降,但小檗碱含量提高到５．２０％．小檗碱产率为４５６．６０ｍｇ／Ｌ（２３天）。基本培养基中随着补加ＮＨ４ＮＯ３浓度的增加,抑制细胞生长愈严重;补加０．８ｇ／ＬＮＨ４ＮＯ３的小檗碱含量比未加的增加约１０％,随着浓度的增加又急剧下降。     

猪苓与蜜环菌高亲和性组合的筛选

猪苓与蜜环菌共生亲和性是猪苓人工栽培成功的关键因素。为获得猪苓与蜜环菌的高亲和性组合,本文采用了5株猪苓菌株与4株蜜环菌菌株进行筛选。通过将猪苓菌株与蜜环菌菌株共培养,比较不同组合的生长速度、拮抗线形成情况,以及两种菌丝生长过程中形态学变化等指标,结果发现组合GU-06&AM-08生长速度最快,为3.36mm/d。GU-06和GU-07-2菌株与每株蜜环菌共培养均可产生拮抗线,共培养28d后,产生拮抗的猪苓菌丝分枝较多,可以看到菌丝束。被蜜环菌菌索侵染的猪苓菌核,切面可以明显观察到侵入猪苓菌核中的蜜环菌菌索,侵染到猪苓菌核中的蜜环菌菌索分枝较多,中空,表皮细胞细长。发生侵染现象的组合有7组：GU-04与AM-06;GU-06与AM-06,AM-08,AM-13;GU-07-2与AM-06,AM-08;GU-15与AM-06,其中以GU-06与AM-06,AM-13两组组合侵染最严重,其余组合没有发现侵染现象。综合以上共生筛选指标获得GU-06&AM-08、GU-06&AM-06、GU-07-2&AM-08以及GU-06&AM-13 4组高亲和性的组合。