苏云金芽孢杆菌δ-内毒素基因穿梭质粒的构建

在农业生产中长期使用化学农药已对环境和生态平衡造成一定破坏作用,同时有不少害虫也逐渐产生抗药性从而引起某些害虫的大流行,给农业生产带来巨大损失。应用苏云金杆菌杀虫蛋白基因(Bt基因)可构建具有抗虫作用的抗虫工程菌,这样通过拌种或植物叶面喷雾可达到快速、经济、有效的防治虫害的目的。国际上抗虫工程菌研究应用很快,如美国将BI基因转入到一种正常情况下定居在植物组织中的棒杆菌,将这种工程菌拌玉米种子,这样随植物生长该菌在植物体内大量繁殖,当玉米螟在茎和叶取食时,即因食用表达苏云金杆菌毒蛋白的工程菌而死亡。 田颖川等已克隆了苏云金芽孢杆菌内毒素基因CryIA(b)和CryIA(c)。本文将Bt基因CryIA(c)插入到大肠-枯草穿梭载体pBE-2中构建成Bt毒蛋白基因穿梭质粒pAMY,利用电穿孔法转人大肠杆菌DH5a,枯草芽孢杆菌B.subtilis BR151,IA511,野生型蜡状芽孢杆菌B.cereusa-47,短芽孢杆菌B.brevis A-5和枯草芽孢杆菌90-8,获得了具有较高杀虫活性的工程菌克隆。     

板栗干腐病的防治研究之五

研究证明,花期防治以及及时采收、低温贮藏和快速运输等保水措施是控制板栗干腐病的较为有效的措施。     

板栗干腐病研究之三——病原物的侵染特点

采用对板栗结果枝实行分期套袋、人工接种、以及药剂防治等方法,以分析观察板栗果仁干腐病的侵染时期和发病规律。结果表明,干腐病是由多种弱寄生和腐生真菌引起的一种贮藏期复合病害。病原物于开花期经由花器侵入幼果,呈潜伏状态,直到果实成熟不表现症状。等到采收后,在加工干燥和运输贮藏过程中开始发病出现多种干腐症状,病势随贮藏期果仁水分的丧失而迅速发展,最后引至大量果仁腐败变质。以上结果对于控制病害有一定启示。     

基因沉默与生物进化

基因沉默主要发生在转录水平和转录后水平,它是生物体抵御外来核酸片段入侵、保护基因组完整性并调控基因表达的一种重要机制。以RNA为媒介,以甲基化和特定RNA降解为手段的基因沉默普遍存在于生物界中,暗示其在生物进化过程中可能扮演了重要的角色。文章最后探讨了在基因沉默与生物进化关系研究中可能面临的一些问题。     

我国生物农药的发展现状

我国生物农药的研究开发始于 5 0年代 ,直到 80年代中期才开始正式列入国家科技攻关的发展计划。近十多年来 ,在生物农药的资源筛选评价、新产品开发、生产工艺、产品质量检测和新技术示范推广方面都取得了长足的进展。目前国内生物农药研究开发的热点 ,主要集中在苏云金芽胞杆菌杀虫剂、农用抗生素杀虫剂、农用抗生素杀菌剂、拮抗细菌生防制剂、昆虫病原真菌制剂和昆虫杆状病毒杀虫剂几个方面。生物农药技术产品开始逐渐走入市场。1　我国生物农药技术产品现状1.1　苏云金芽胞杆菌杀虫剂我国自 5 0年代末开始苏云金杆菌 (简称 Bt)杀虫剂的…     

电脉冲穿孔法将苏云金杆菌δ-内毒素基因导入野生型芽孢杆菌

利用电脉冲穿孔法将带有苏云金杆菌毒蛋白基因的穿梭质粒导入几株野生型芽孢杆菌中。它们是野生型的蜡状芽孢杆菌、短芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。通过观察在新霉素和氨苄青霉素平板上长出的抗性菌落数,计算出转化效率为10~1—10~4转化子/μgDNA。从转化子中分离到的质粒DNA大小及其用HindⅢ酶切的片段与原始质粒DNA相同,毒性测试表明重组转化子对烟青虫六天的致死率达90—100％。     

棉花维管组织内生细菌分析之一——不同抗性品种含菌动态与土质和生育期的关系

于１９９３年棉花生长季节,对种植在偏砂性和偏粘性土壤中的不同抗枯萎病品种中棉－１２、８６－１、川７３－２７和感病品种邯郸－１４进行了内生细菌分析。试验分别在五叶期、现蕾期和开花结铃后期取样,在ＴＳＡ培养基上分离维管组织内生细菌,共获得细菌分离物５３００余株。细菌数量经ＳＡＳ软件进行统计分析,结果表明,不同品种、不同土质及不同生育期的含菌量变化,在ａ＝０．０５水平上差异显著。四个品种在偏砂性土中的内生细菌含量均高于偏粘性土壤中的棉株,三个抗枯萎病品种的含菌量也均高于感病品种邯郸－１４,其中以８６－１含菌量最高,其次为中棉－１２,再次为川７３－２７。不同生育期的菌量变化是五叶期最低,现蕾期最高,开花结铃后期又下降,但仍高于五叶     

板栗干腐病研究:Ⅰ.树体及果实中真菌区系分析

详细地调查了我国不同产栗区及栗不同生长期中,树体及栗果实的自然带菌情况,分析了板栗各生长期真菌区系的变化及其与栗干腐病发病的关系。结果初步证明,栗树整个生长期中都带菌,只是不同生长期和部位所带微生物的数量和种类有所不同。例如,栗树枝条、芽、栗棚和成熟栗子的带菌情况不是不同的,也即在不同生长期和不同部位,微生物的区系组成有较大差异。其中分离频率较高的真菌有Phoma sp.、Dothiorella sp.、Sphaeropsis sp.、Gloeosporium sp.、Cytospora sp.、Alternaria sp.、Rhizoctonia sp.、Comeothyrium sp.、Phomopsis sp.、Fusarium sp.等。真菌种类最多的时期是花期和栗实贮藏期。调查结果还表明,不同地区真菌区系组成有较大的差异,其中致病和弱致病菌所占比例高低顺序为:西南>长江流域>淮河流域>燕山地区。分布较广的致病菌有Phoma sp.、Dothiorella sp.、Gloeosporium sp.、Rhizoctonia sp.、Alternaria sp.等。从分析栗树微生物区系变化与干腐病发病的关系中看出,某一地区干腐病的轻重,与该地区的常见致病菌的分布与数量比例有关。致病菌数量及种类多,则干腐病重,反之,则轻。     

蜡质芽孢杆菌超氧化物歧化酶的理化性质研究

本文对从蜡质芽孢杆菌发酵菌体中纯化的Ｆｅ－ＳＯＤ进行了理化性质研究,测定结果表明：在２７℃,ｐＨ６８,光照强度为４０００Ｌｕｘ条件下,光照２０分钟为酶活性测定的最佳条件;经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析得其亚基分子量为１７,７８３道尔顿;等电聚焦电泳表明：Ｆｅ－ＳＯＤ的等电点（ＰＩ）大约为６５左右;经ＤＮＳ法分析Ｎ－末端氨基酸为谷氨酸（Ｇｌｕ）;其氨基酸的组成中酸性氨基酸的含量大于碱性氨基酸的含量,表明此酶为酸性蛋白。     

板栗干腐病研究:Ⅱ.症状及病原

对板栗干腐病症状及病原的研究结果表明:1.板栗干腐病主要发生于种仁上,其病斑大小、质地不一。按色泽可分为褐、黑、白、灰、黄五类。果实其它部位也偶有症状产生;2.此病为多种真菌复合侵染所致。主要的致病菌有Phoma、Phomopsis、Dothiorella、Gloeosporium和Cytospora等属真菌,另有十余种弱寄生及腐生菌有时也混合发生。