基于科学素养培养的科学技能综合实验课程的设计——以NLRP3炎性小体结构域的功能研究为例

该研究设计了一门以科学素养培养为目标的科学技能综合实验课程,该课程由科研讲座、基础实验和创新实验组成,科研讲座对科研思路、方法等进行介绍,帮助学生形成正确、严谨、完整的科学研究架构;基础实验以NLRP3炎性小体为研究对象,基于科研基本逻辑,依次利用生物信息学、分子克隆及细胞生物学、免疫学相关方法对NLRP3结构域的功能进行研究;创新实验以基础实验的结果和方法为基础,对NLRP3的功能和结构等进行进一步探究。该课程涵盖多学科重点实验技术,科研讲座、基础实验与创新实验有机融合,保证重点实验技术培养和相关理论知识的深化理解,同时也为学生提供了较大的创新空间,有利于学生树立良好的科研思维和习惯,为学生提供相对完整的科研训练。同时,该课程相关技术成熟、结果稳定、可行性高,值得推广。     

红景天苷对脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞共培养炎性介质分泌的影响

本研究旨在探讨红景天苷(salidroside, Sal)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR 8383和II型肺泡上皮细胞RLE-6TN共培养炎性活化的影响。CCK-8比色法检测细胞增殖百分率,Western blot检测磷酸化AKT (p-AKT)和总AKT蛋白表达,酶联免疫吸附法测定细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα, TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein-2, MIP-2)和白介素10 (interleukin-10, IL-10)的含量。结果显示:与对照组相比,32和128μg/mL Sal预处理RLE-6TN细胞或共培养RLE-6TN和NR 8383细胞1 h后继续培养24 h,细胞增殖百分率显著增加(P 0.05);与对照组相比,32和128μg/mL Sal预处理RLE-6TN细胞,p-AKT/AKT蛋白比值显著增加(P 0.05)。32μg/mL Sal预处理不仅抑制LPS诱导NR 8383细胞分泌TNF-α和MIP-2 (P 0.05),而且加强RLE-6TN和NR 8383细胞共培养对LPS诱导NR 8383细胞分泌TNF-α和MIP-2的抑制作用(P 0.05)。此外,32μg/mL Sal预处理能促进LPS诱导NR 8383细胞分泌IL-10 (P 0.05),并能加强RLE-6TN和NR 8383细胞共培养对LPS诱导NR 8383细胞分泌IL-10的促进作用(P 0.05)。以上结果提示,Sal不仅能直接抑制LPS诱导的NR 8383炎性活化,还可能通过PI3K/AKT信号通路促进RLE-6TN增殖,参与II型肺泡上皮细胞对LPS诱导肺泡巨噬细胞炎性活化的调节作用。