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蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricini Donovan)由本所昆虫饲养室提供。选择健康的5龄幼虫,饥饿24小时,先用自来水洗净虫体,将幼虫放入75%乙醇中浸泡20—30分钟,体表消毒,取出幼虫以灭菌的双重蒸馏水和Hanks液各洗涤2次,置幼虫于已灭菌的滤纸平皿中,吸干体表水分。剪脚部采血,直接滴入预先盛有2毫升培养液的扁瓶中,每瓶采血1—2滴,加盖橡皮塞,轻微摇动瓶子,使培养瓶内的细胞均匀悬浮于 相似文献
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将油桐尺蠖(Buzurasuppressaria)核多角体病毒晚期基因──多角体蛋白基因启动子及5′端编码区,以两种不同方式置于缺乏启动子的氯霉素乙酰基转移酶(CAT)基因上游,使其分别终止在不同翻译终止位点,其宿主菌具有明显不同的氯霉素抗性,最高达200mg/L LB培养基以上,表明昆虫病毒启动子能启动原核基因表达。对多角体蛋白基因启动子能在大肠杆菌中有效工作的原因进行了讨论。 相似文献
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人干扰素IFNα-2b在果蝇细胞中的稳定表达 总被引:1,自引:0,他引:1
以人干扰素IFNα-2b全长基因的质粒为模板,PCR扩增,PCR产物克隆到表达载体获得重组质粒,经转染和筛选,得到稳定表达的果蝇S2细胞株.经CuSO4诱导表达并对表达产物进行检测,结果显示,在果蝇S2细胞中成功地进行了人干扰素IFNα-2b的蛋白表达,表达产物的大小约为26kD.并且,通过体外的抗病毒活性测定,证明所表达蛋白具有抗病毒活性.该研究为进一步利用该系统表达真核细胞蛋白,研究其结构和功能提供了重要的基础. 相似文献
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核型多角体病毒属杆状病毒科,主要感染鳞翅目、双翅目和膜翅目的昆虫,具有90~160kb长的双链,超螺旋DNA基因组。现已发现约500种核型多角体病毒,这些病毒之间有什么关系?它们的亲缘关系如何?我们以甘兰夜蛾核型多角体病毒(简称MbNPV)、甜菜夜蛾核型多角体病毒(简称SeNPV)和斜纹夜蛾核型多角体病毒(简称SINPV)为材料,用限制性内切酪和分子杂交技术对它们的基因组DNA进行比较研究,并对其中一种病毒MbMV多角体蛋白基因进行了定位,现将结果报道如下;材料和方法1材料甜菜夜蛾和斜纹夜蛾健康幼虫,病毒麦种MbNPV、SeN… 相似文献
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介绍了一种从人血清中同步扩增和检测HBV-DNA和HCV-RNA的方法。HCV-RNA反转录成cDNA,这种cDNA和从HBV中抽提出的DNA一起,用根据HBV、HCV保守区序列设计的特异引物进行同步PCR扩增,这种方法对于检测HBV和HCV重复感染很有用处 相似文献
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用PCR方法从油桐尺蠖核型多角体病毒 (BusuNPV)中扩增出DNA聚合酶基因片段 ,经pGEM T载体克隆到大肠杆菌DH5α菌株中。经自动序列分析仪测出DNA聚合酶基因 2 379bp长的核苷酸序列 ,推导出 793的氨基酸序列。氨基酸同源性比较显示 ,BusuNPV与HzSNPV的同源性最高 ,达 57% ;与OpMNPV的同源性最低 ,为 39.6 %。 相似文献
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将油桐尺蠖核多角体病毒晚期基因-多角体蛋白基因启动子及5’端编码区,以两种不同方式置于缺乏启动子的氯霉素乙酰基转移酶(CAT)基因上激,使其分别终止在不同翻译终止位点,其宿主菌具有明显不同的氯霉素抗性,最高达200mg/LLB培养基以上,表明昆虫病毒启动子能启动原核基因表达,对多角体蛋白基因启动子能在大肠杆菌中有效工作的原因进行了讨论。 相似文献
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