CCR5基因转染对骨髓源神经干细胞生物学行为的影响

骨髓源神经千细胞（bonemarrow—derived neural stem cells,BM—NSCs）具有自我更新和分化为神经元与神经胶质细胞的潜能,可用于修复治疗多种神经系统退变与损伤性疾病。但由于其表面缺乏趋化因子受体,移植后向中枢病变部位迁移的速度较慢,疗效欠佳。该研究构建了趋化因子受体CCR5基因,并转染BM—NSCs,用免疫荧光细胞化学法、流式细胞胞仪法及Boyden小室细胞趋化实验,体外研究了CCR5高表达对BM-NSCs增殖、分化与迁移能力的影响。结果表明,CCR5高表达能显著增强BM．NSCs~O趋化能力,而不影响其自我更新和分化为神经元与神经胶质细胞的能力,说明其植入体内后可保持细胞替代与神经修复作用,并能快速大量迁移到病灶部位,显著增强疗效。     

CBS教学法在药学专业临床药物治疗学教学中的应用

目的：改变药学专业临床药物治疗学的传统教学方法,提高学生分析问题和解决问题的能力。方法：精心设计教学内容,采用CBS教学法进行教学改革。结果：表明CBS教学法可激发学生的学习兴趣,帮助学生建立正确的临床药物治疗思维,已初步取得良好教学效果。结论：CBS教学法优于传统教学模式。     

牛蒡苷元对H89 诱导的SH-SY5Y 细胞损伤的保护作用

目的：考察牛蒡苷元对H89 诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y 细胞损伤的保护作用。方法：用蛋白激酶A 抑制剂H89 处理SH-SY5Y 细胞,建立细胞损伤模型。将SH-SY5Y 细胞分成正常组（正常细胞）、模型组（经H89 处理的细胞）、H89+ 牛蒡苷元组（经H89 处理后给予牛蒡苷元处理的细胞）和H89+ 丹酚酸B 组（阳性对照组,经H89 处理后给予丹酚酸B 处理的细胞）。采用MTT 法检测细胞活力、免疫荧光细胞化学法检测细胞中β- 淀粉样肽和神经营养因子-3 的表达以及Hoechst 33258 染色法检测细胞凋亡率。结果：H89 诱导的细胞损伤模型造模成功。牛蒡苷元在低浓度（0.5 μmol · L-1）时对细胞损伤模型的保护作用最佳,与模型组相比,H89+ 低浓度牛蒡苷元组细胞的细胞活力显著提高（P<0.01）,细胞中β- 淀粉样肽的表达下调5.17%（P<0.05）,而神经营养因子-3 的表达上调80.54%（P<0.01）,凋亡细胞百分比也显著降低（P<0.05）。结论：低浓度牛蒡苷元对H89 诱导的SH-SY5Y 细胞损伤具有显著保护作用。     

肌球蛋白轻链激酶活性片段对肌球蛋白轻链的非钙依赖性磷酸化作用特征

肌球蛋白轻链激酶 (MLCK)的活性片段 (MLCKF)能比完整的MLCK更有效地、以非钙依赖性的方式磷酸化肌球蛋白轻链 (MLC2 0 )。该片段是用胰蛋白酶水解MLCK ,再经DEAE 5 2柱层析分离而获得的 ,分子量约为 6 1kD。Western印迹已证实该MLCKF与完整的MLCK同源。MLCKF对肌球蛋白轻链的磷酸化作用及其作用特征通过甘油电泳及ScoinImage扫描软件检测 ,肌球蛋白ATP酶活性通过分光光度法检测。实验结果证实 ,MLCKF催化的MLC2 0 非钙依赖性磷酸化 (CIPM)比MLCK催化的CIPM效力高、耗能多 ,但比MLCK催化的MLC2 0 钙依赖性磷酸化 (CDPM)效力低、耗能少 ;MLCKF催化的CIPM与MLCK催化的CIPM均较MLCK催化的CDPM稳定 ,不易受温育温度、温育时间及离子浓度等变化的影响 ,且对MLCK抑制剂ML 9敏感性低。